基于稀土配合物熒光探針的時(shí)間分辨熒光生化分析技術(shù)由于可有效消除生物樣品背景熒光的干擾,使得其在高靈敏度生化分析領(lǐng)域呈現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用價(jià)值,而設(shè)計(jì)合成對(duì)生物活性組分具有特異性識(shí)別與熒光響應(yīng)功能的稀土配合物熒光分子探針,對(duì)于時(shí)間分辨熒光生化分析技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用起著關(guān)鍵的作用。在本博士論文的研究中,通過(guò)適當(dāng)?shù)呐湮惑w結(jié)構(gòu)修飾,設(shè)計(jì)合成了幾種對(duì)次氯酸及生物硫醇具有特異性識(shí)別與熒光響應(yīng)功能的新型稀土配合物熒光分子探針,在探針性質(zhì)表征充分的基礎(chǔ)上,探究了其在時(shí)間分辨熒光生物成像測(cè)定中的應(yīng)用性能。以聯(lián)三吡啶多羧酸銪（Ⅲ）配合物為發(fā)光基團(tuán),利用在其配位體中引入2,4-二硝基苯肼衍生物基團(tuán)的方法,設(shè)計(jì)合成了一種次氯酸（HOCl）特異性響應(yīng)銪（Ⅲ）配合物熒光探針NPPTTA-Eu3+。分子內(nèi)光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移（PET）的存在使得探針的熒光十分微弱,但與HOCl的反應(yīng)可切除二硝基苯胼基團(tuán),使得銪（Ⅲ）配合物的熒光恢復(fù)。該探針對(duì)HOCl的熒光響應(yīng)具有速度快、特異性好等優(yōu)點(diǎn),使其可用于水溶液中HOCl的高靈敏度時(shí)間分辨熒光測(cè)定（檢測(cè)下限達(dá)1.1 nM）。基于該探針,成功實(shí)現(xiàn)了活體RAW264.7細(xì)胞中內(nèi)源性及大型蚤中外... 

【文章來(lái)源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：123 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．６?Ｅｕ１１１和Ｔｂ１１１離子配合物的發(fā)光原理??Ｆｉｇ．?１．６?Ｅｍｉｓｓｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ?Ｅｕ３＋?ａｎｄ?Ｔｂ３＋ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ??

器預(yù)留一定的延遲時(shí)間，待短壽命的背景熒光及散射光衰減消失后再采集來(lái)自樣??品的長(zhǎng)壽命熒光信號(hào)，因此可極大地降低本底噪音，進(jìn)而顯著提高分析檢測(cè)的信??噪比與靈敏度［６（）１。圖１．７為時(shí)間分辨熒光檢測(cè)的原理示意圖。??Ｃｙｃｌｅ?ｔｉｍｅ?（１ｍｓ）???Ｆｌａｓｈ?ｅｘｃｉｔａｔｉｏｎ??．？￥＊?ｉ?Ｓｈｏｒｔ－ｌｉｖｅｄ?ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ??Ｊ?Ｌｏｎｇ－ｌｉｖｅｄ?ｌａｎｔｈａｎｉｄｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ??ｇ?Ｄｅｌａｙ?！??售?ｔｉｍｅ?Ｃｏｕｎｔｉｎｇ，ｔＴｍｅ＾?｜??］?＼?，’，，，，，?Ｒｅｃｏｖｅｒｙ?ｔｉｍｅ??￣ｉ?１?ｉ?ｉ???〇?２００?６００?１〇〇〇??Ｔｉｍｅ／卩?ｓ??圖１．７時(shí)間分辨熒光檢測(cè)的原理??Ｆｉｇ．?１．７?Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｔｉｍｅ－ｇａｔｅｄ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ??近年來(lái)，熒光顯微鏡成像及傳感技術(shù)作為監(jiān)測(cè)生物系統(tǒng)中生物活性組分的含??量、分布和轉(zhuǎn)輸過(guò)程的重要工具和方法，在生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)以及新藥研發(fā)等方??面發(fā)揮著重要的作用［６１】。作為熒光顯微鏡生物成像技術(shù)的一個(gè)重要組成部分，基??于稀土配合物探針的時(shí)間分辨熒光成像技術(shù)在蛋白標(biāo)記陽(yáng)］、病原微生物檢測(cè)［？－６７］??及免疫細(xì)胞化學(xué)［６８］等多個(gè)方面得到了廣泛的應(yīng)用與發(fā)展。與傳統(tǒng)利用有機(jī)染料探??針的穩(wěn)態(tài)熒光生物成像相比，時(shí)間分辨熒光成像技術(shù)通過(guò)利用激發(fā)后經(jīng)過(guò)一定的??延遲時(shí)間再成像的方式

針及ＬｙｓｏＴｍｃｋｅｒ?Ｂｌｕｅ共培養(yǎng)后的共聚焦成像測(cè)定證明了探針的溶酶體定位性能，??而大型蚤體內(nèi)一氧化氮的時(shí)間分辨熒光成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明了?ＴＲＰ－ＮＯ在??復(fù)雜生物樣品測(cè)定中的適用性。圖１．１２給出了幾種可用于活性氧／氮物種檢測(cè)的??稀土配合物熒光探針的結(jié)構(gòu)。??。續(xù)Ｑ氣蹲＇ｘ：ｎａ??〇乂?ＰＥＴ?ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ?。乂?ＰＥＴ?ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ?［?Ｗ?」３??ＴＰＲ１?丨?Ｅｕ（ｐｆｄａｐ）３（ｔｐｙ）ｌ??ＬＪ??＇ｈｏ?ｒ－９?Ｌｏｎｇ－ｌｉｖｅｄ?〇２??�。蘩铩Ｂ暎阂�??。弋?？０Ｈ?“。?Ｅｘｃ＾！Ｄ－Ｃｌ＾ｊＬ??ＴＰＲ２?ＰＥＴ?ｓｗｉｔｃｈ?ｏｈ?＿?Ｎ?Ｎ＊＾］?＾??ｈｙｄｒｏｘｙｌ３ｔ６ｄ?ｂｙ?ＯＨ?ｅｔ?ｃｏｏ－＊＾〇〇＊?ｃｏｏ?＊＾ｃ〇〇??〇?＼?ｒ?〇、、?、ｖ?ＴＲＰ－ＮＯ??ＨＯ?丫Ａ?匕？＇?Ｒ３??Ｎ＾Ｎ?．－Ｈ２０?Ｉ！?］?Ｎ?１??〇人?１?Ｒ，?＝?ＣＯＯＨ．?Ｒ２?＝?Ｒ３?＝Ｈ?。乂?ｒ！’’．Ｉ?１１?：??；ｃｒ？＝ｈ＝ｈｈ?酬啊成（，－??６?Ｒ，＝?Ｒ２?＝?Ｒ３?＝ＣＯＮＨＭｅ??圖１．１２幾種基于稀土配合物的活性氧／氮物種熒光探針??Ｆｉｇ．?１．１２?Ｓｅｖｅｒａｌ?ｌａｎｔｈａｎｉｄｅ?ｃｏｍｐｌｅｘ－ｂａｓｅｄ?ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ?ｐｒｏｂｅｓ?ｆｏｒ?ＲＯＳ?ａｎｄ?ＲＮＳ??１５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]檢測(cè)活性氧物種的氧雜蒽類光學(xué)探針的研究進(jìn)展[J]. 陳巍,馬會(huì)民.  分析化學(xué). 2012(09)
[2]分析化學(xué)在生命科學(xué)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 姚武.  黃山學(xué)院學(xué)報(bào). 2006(03)



本文編號(hào)：3590671