貴金屬納米團(tuán)簇材料是一種尺寸小于2 nm,由幾個到上百個貴金屬原子組成的小尺寸原子聚集體材料。由于其特殊尺寸效應(yīng),使其具有特殊的物理和化學(xué)性質(zhì),如精確的分子結(jié)構(gòu)、良好的熒光特性。生物分子模版法合成的貴金屬納米團(tuán)簇,由于其合成方法簡單、重現(xiàn)性好、生物相容性好、熒光可調(diào)性等特點(diǎn),在生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用與細(xì)胞成像等領(lǐng)域引起了廣泛關(guān)注。根據(jù)功能多肽合成的貴金屬納米團(tuán)簇可以保持多肽的生物活性及貴金屬納米團(tuán)簇的熒光特性、催化活性等物化性能,本課題開發(fā)了一系列功能多肽模板合成的貴金屬納米團(tuán)簇,并成功研發(fā)了實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核多模式成像的成像探針。結(jié)合本課題組前期工作貴金屬團(tuán)簇在治療癌癥、炎癥等生物效應(yīng)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究了貴金屬團(tuán)簇材料的抑菌效果。具體內(nèi)容如下:（1）功能多肽金團(tuán)簇構(gòu)建及細(xì)胞核多模式成像在此實(shí)驗(yàn)中,使用了具有特異靶向細(xì)胞核能力的SV多肽（NH₂-CCYGGPKKKRKVV-COOH）為模板,合成了兩種不同類型的金團(tuán)簇,一種具有紅色熒光發(fā)射(λ_ex=560 nm,λ_em=657 nm),粒徑為1.7±0.27 nm;一種具有藍(lán)色熒光發(fā)射(... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 金納米團(tuán)簇
    1.2 金納米團(tuán)簇的制備與結(jié)構(gòu)
        1.2.1 金納米團(tuán)簇的制備
            1.2.1.1 基于有機(jī)小分子化學(xué)合成
            1.2.1.2 蛋白質(zhì)為模板合成
            1.2.1.3 多肽作為模板合成
        1.2.2 金納米團(tuán)簇的結(jié)構(gòu)
    1.3 金納米團(tuán)簇的應(yīng)用
        1.3.1 細(xì)胞成像
        1.3.2 生物體組織成像
        1.3.3 生物檢測分析
        1.3.4 抗腫瘤治療與抗菌
    1.4 課題研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試劑與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 SV-Au NCs的合成及對細(xì)胞核多模式成像
        2.2.1 不同熒光發(fā)射的金納米團(tuán)簇的合成
            2.2.1.1 最佳反應(yīng)條件的探索
            2.2.1.2 金納米團(tuán)簇的最佳反應(yīng)條件
        2.2.2 金納米團(tuán)簇的表征
        2.2.3 TMB測定金納米團(tuán)簇的類過氧化物酶活性
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.4.1 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
            2.2.4.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
            2.2.4.3 細(xì)胞的凍存
        2.2.5 金納米團(tuán)簇的毒性
        2.2.6 金團(tuán)簇的細(xì)胞攝取
        2.2.7 金團(tuán)簇的靶向細(xì)胞核研究
            2.2.7.1 探索最佳孵育濃度
            2.2.7.2 探索最佳孵育時間
            2.2.7.3 最佳孵育條件
        2.2.8 DAB法測定金團(tuán)簇染色細(xì)胞核的濃度依賴性和時間依賴性
        2.2.9 不同成像模式下細(xì)胞核成像效果的對比
    2.3 CCY-Au NCs的合成及抗菌性研究
        2.3.1 金團(tuán)簇的合成
        2.3.2 金團(tuán)簇的表征
        2.3.3 CCY-Au NCs的穩(wěn)定性研究
        2.3.4 金團(tuán)簇的濃度測定
        2.3.5 CCY-Au NCs細(xì)胞毒性研究
        2.3.6 細(xì)菌培養(yǎng)
        2.3.7 金團(tuán)簇的體外抗菌研究
        2.3.8 細(xì)菌攝入金團(tuán)簇量檢測
3 結(jié)果與分析
    3.1 基于SV多肽合成金團(tuán)簇及細(xì)胞核多模式成像
        3.1.0 金團(tuán)簇的合成
        3.1.1 金團(tuán)簇形貌表征
        3.1.2 紫外可見光譜與紅外光譜分析
        3.1.3 金團(tuán)簇?zé)晒夤庾V
        3.1.4 金團(tuán)簇細(xì)胞毒性與靶向細(xì)胞核熒光成像
        3.1.5 金團(tuán)簇的類過氧化物酶活性
        3.1.6 DAB法標(biāo)記細(xì)胞核成像
        3.1.7 不同成像模式下細(xì)胞核成像效果的對比
    3.2 基于CCY多肽合成金團(tuán)簇及其抗菌性研究
        3.2.1 金團(tuán)簇的合成與表征
        3.2.2 CCY-Au NCs的細(xì)胞毒性
        3.2.3 CCY-Au NCs體外抗菌性研究
4 討論
    4.1 SV多肽為模板合成金納米團(tuán)簇與多模式細(xì)胞成像
        4.1.1 以SV多肽為模板合成不同尺寸的金團(tuán)簇
        4.1.2 對細(xì)胞核的多模式成像
    4.2 金團(tuán)簇的抗菌性研究
5 結(jié)論
    5.1 SV-Au NCs的合成與細(xì)胞多模式成像
    5.2 CCY-Au NCs的合成與抗菌性研究
6 創(chuàng)新之處
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間論文發(fā)表情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Specific detection and effective inhibition of a single bacterial species in situ using peptide mineralized Au cluster probes[J]. Xiangchun Zhang,Li Liu,Ru Liu,Jing Wang,Xuhu Hu,Qing Yuan,Juanjuan Guo,Gengmei Xing,Yuliang Zhao,Xueyun Gao.  Science China（Chemistry）. 2018(05)
[2]Assessment of the MT1-MMP expression level of different cell lines by the naked eye[J]. Xiangchun Zhang,Qing Yuan,Xueyun Gao.  Science China（Life Sciences）. 2018(04)



本文編號：3485346