赭曲霉毒素A（OTA）是一種由青霉菌屬和曲霉菌屬次級代謝產(chǎn)生的霉菌毒素,廣泛存在于諸如谷物、咖啡、可可、酒類及果汁等。OTA具有腎毒性、肝毒性、DNA損傷以及抑制RNA和蛋白質(zhì)合成等危害。以高效液相色譜（HPLC）為代表的儀器分析及以抗體為代表的免疫分析是檢測OTA傳統(tǒng)方法,但是這些方法耗時、繁瑣、價格昂貴等限制了它們在即時檢測中的應(yīng)用。因此,迫切地需要簡單、快速、高靈敏、高選擇性的檢測方法。近年來,新興的核酸適配體作為抗體替代物成為分析化學(xué)家研究的熱點,核酸適配體具有高親和性、高特異性、易于化學(xué)合成及修飾、熱穩(wěn)定性好等優(yōu)點,同時鳥嘌呤（Guanine）對于熒光素（FAM）具有一定的猝滅能力,以鳥嘌呤為猝滅基團可以有效降低設(shè)計及合成難度,降低檢測成本。本論文基于核酸適配體特異性識別能力,利用鳥嘌呤猝滅FAM熒光建立了單標(biāo)記檢測OTA的新方法。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)分析,預(yù)測OTA與適配體形成反平行G四鏈體結(jié)構(gòu)且尾端有3對互補堿基,所以原36個堿基的核酸適配體可以去掉3’端5個堿基,并以此31個堿基的序列為核心結(jié)構(gòu)設(shè)計了兩條新型單標(biāo)記OTA核酸適配體序列OTXAsF1、OTXAsF2,這兩組... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 赭曲霉毒素A簡介
        1.1.1 OTA理化性質(zhì)
        1.1.2 OTA的毒性
        1.1.3 OTA限量標(biāo)準(zhǔn)
    1.2 OTA檢測方法
        1.2.1 OTA的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法
        1.2.2 OTA的儀器檢測方法
        1.2.3 OTA的免疫分析方法
    1.3 基于核酸適配體的OTA檢測方法
        1.3.1 核酸適配體簡介
        1.3.2 OTA的核酸適配體
        1.3.3 基于核酸適配體檢測OTA的光學(xué)方法
        1.3.4 基于核酸適配體檢測OTA的電化學(xué)方法
    1.4 基于鳥嘌呤猝滅熒光的研究
        1.4.1 鳥嘌呤做猝滅團研究實例
        1.4.2 鳥嘌呤猝滅FAM熒光原理
    1.5 研究目的與意義
2 基于末端突出鳥嘌呤猝滅熒光的核酸適配體生物傳感方法
    2.1 實驗儀器與試劑
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗中用到的DNA序列
    2.2 實驗原理及方法
        2.2.1 實驗原理
        2.2.2 OTXAsF1生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇方法
        2.2.3 OTXAsF1生物傳感器工作曲線及特異性測定方法
        2.2.4 OTXAsF2生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇方法
        2.2.5 OTXAsF2生物傳感器工作曲線及特異性測定方法
    2.3 實驗結(jié)果與討論
        2.3.1 OTXAsF1生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇
        2.3.2 OTXAsF1生物傳感器工作曲線分析
        2.3.3 OTXAsF1生物傳感器選擇性分析
        2.3.4 OTXAsF2生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇
        2.3.5 OTXAsF2生物傳感器工作曲線分析
        2.3.6 OTXAsF2生物傳感器選擇性分析
    2.4 本章小結(jié)
3 基于G四鏈體猝滅熒光的核酸適配體生物傳感方法
    3.1 實驗儀器與試劑
        3.1.1 實驗儀器
        3.1.2 實驗試劑
        3.1.3 實驗中用到的DNA序列
    3.2 實驗原理及方法
        3.2.1 實驗原理
        3.2.2 OTXAsF10生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇方法
        3.2.3 OTXAsF10生物傳感器工作曲線及特異性測定方法
        3.2.4 OTXAsF20生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇方法
        3.2.5 OTXAsF20生物傳感器工作曲線及特異性測定方法
    3.3 實驗結(jié)果與討論
        3.3.1 OTXAsF10生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇
        3.3.2 OTXAsF10生物傳感器工作曲線分析
        3.3.3 OTXAsF10生物傳感器選擇性分析
        3.3.4 OTXAsF20生物傳感器最佳反應(yīng)條件選擇
        3.3.5 OTXAsF20生物傳感器工作曲線分析
        3.3.6 OTXAsF20生物傳感器選擇性分析
    3.4 本章小結(jié)
4 四種核酸序列的比較
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]采用Origin軟件計算DXI 800發(fā)光儀的四參數(shù)logistic定標(biāo)數(shù)據(jù)[J]. 王強,馬小紅,翁秀妹.  檢驗醫(yī)學(xué). 2014(06)
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本文編號：3458012