以硅膠為基質(zhì)、氨基己酸為配基制備了一種新型弱陽離子交換/疏水（WCX/HIC）雙功能混合模式色譜固定相。該固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高鹽濃度下表現(xiàn)為HIC的性質(zhì),可作為HIC固定相使用;在低鹽濃度條件下表現(xiàn)為離子交換的性質(zhì),可作為WCX固定相使用。分別考察了該介質(zhì)在WCX和HIC兩種模式下對標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的分離性能,并與商品柱進(jìn)行比較。結(jié)果表明,所合成的WCX/HIC雙功能固定相在WCX和HIC兩種模式下對蛋白質(zhì)均有較高的分離度和選擇性,且分離能力與商品柱相當(dāng),兩種模式下標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的質(zhì)量和活性回收率均大于93%,表明該柱具有"一柱二用"的功能,適于生物大分子的分離純化�；诖穗p功能色譜柱構(gòu)建的在線單柱二維液相色譜（2DLC-1C）可在60 min內(nèi)實現(xiàn)8種蛋白質(zhì)的快速分離。在70 min內(nèi)完成了對蛋清中溶菌酶的二維純化,純度可達(dá)到98.3%。該技術(shù)中一根色譜柱可當(dāng)作兩根色譜柱使用,對蛋白質(zhì)組學(xué)研究和重組蛋白藥物的生產(chǎn)具有重要的應(yīng)用價值。 

【文章來源】：色譜. 2016,34(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 實驗部分
    1.1 儀器與試劑
    1.2 實驗部分
        1.2.1 固定相的制備
        1.2.2 色譜條件
        1.2.3 溶菌酶的活性測定方法
        1.2.4 蛋白質(zhì)含量的測定
        1.2.5 蛋白質(zhì)回收率的測定
        1.2.6 靜態(tài)吸附量的測定
2 結(jié)果與討論
    2.1 氨基己酸為配基的WCX/HIC雙功能固定相對蛋白質(zhì)的分離
    2.2 質(zhì)量回收率、活性回收率和靜態(tài)吸附量
    2.3 在線單柱二維液相色譜對蛋白質(zhì)的分離
    2.4 在線單柱二維液相色譜對蛋清中溶菌酶的純化
3 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于超高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的桑黃干預(yù)后大鼠尿液代謝組學(xué)分析[J]. 董宇,俞忠明,李洪玉,趙麗沙,壽旦.  色譜. 2016(08)
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[3]采用高效液相色譜-質(zhì)譜考察家福捕鳥蛛粗毒中多肽和蛋白質(zhì)的多樣性[J]. 胡朝暾,肖震,周熙,陳佳,陳波,劉中華.  色譜. 2015(06)
[4]在線二維液相色譜法同時測定嬰幼兒和成人配方營養(yǎng)品中的維生素A、D3和E[J]. 張艷海,其布勒哈斯,金燕,王佳,馬文麗.  色譜. 2015(03)
[5]基于大體積循環(huán)進(jìn)樣的低豐度蛋白質(zhì)富集[J]. 張權(quán)青,張磊,高小迪,張維冰,張慶合.  色譜. 2014(11)
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[7]在線單柱二維液相色譜法快速純化牛胰腺中細(xì)胞色素C[J]. 楊曉明,余煒,耿信篤.  中國科學(xué):化學(xué). 2013(05)
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本文編號：3401124