高效液相色譜法在幾種中草藥中的應(yīng)用研究
本文關(guān)鍵詞:高效液相色譜法在幾種中草藥中的應(yīng)用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)是現(xiàn)代一種重要的新型分離分析技術(shù),具有分離效能好、檢測(cè)靈敏度高、分析速度快、適用范圍廣和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。它是采用高壓輸液系統(tǒng)將流動(dòng)相送入色譜柱中,各成分在柱內(nèi)被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。目前,該方法已廣泛的應(yīng)用于食品分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、生物工程、制藥工業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域。 中國(guó)是中草藥的發(fā)源地,中草藥中的有效成分是預(yù)防治療疾病的物質(zhì)基礎(chǔ),.其含量的多少己成為評(píng)估中藥質(zhì)量的重要標(biāo)志。近年來(lái),隨著生活水平的不斷提高,使得人們“回歸自然”的要求日趨強(qiáng)烈,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)中藥中天然成分的研究提出了許多新方法新思路,現(xiàn)代的分析技術(shù)也在中藥研究中得到廣泛的應(yīng)用。其中,高效液相色譜法(HPLC)是中藥質(zhì)量分析最重要的手段之一 樣品前處理是色譜分析前的一個(gè)重要步驟,由于中藥是一個(gè)典型的復(fù)雜未知樣品,各成分的物理化學(xué)性質(zhì)不同,含量相差大,因此,樣品前處理技術(shù)的先進(jìn)與否,往往是色譜分析成敗的關(guān)鍵。 本文由緒論和研究報(bào)告兩部分組成。緒論部分簡(jiǎn)單介紹了高效液相色譜法的特點(diǎn)和發(fā)展?fàn)顩r、酚類化合物和樣品前處理技術(shù)的研究進(jìn)展。研究報(bào)告部分建立了虎杖中白藜蘆醇的提取測(cè)定;高良姜中槲皮素、山奈酚、高良姜素的分離測(cè)定;小兒瀉速停顆粒中沒(méi)食子酸、兒茶素、表兒茶素的分離測(cè)定; 1、膠束萃取-高效液相色譜法測(cè)定虎杖中的白藜蘆醇 以5%(w/v)的非離子表面活性劑Triton X-100為萃取劑,建立了一種簡(jiǎn)便綠色的膠束提取-高效液相色譜測(cè)定虎杖中的白藜蘆醇的方法。色譜柱為phenomenex C18(250mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相為甲醇-0.25%乙酸等度洗脫,流速0.8mL·min-1,,檢測(cè)波長(zhǎng)306nm。白藜蘆醇在0.04~200μg/mL,(r=0.9998)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,定性檢測(cè)限(S/N=3)為9.46ng/mL,加入6%的NaCl來(lái)進(jìn)行濁點(diǎn)富集,可提高萃取回收率,加標(biāo)回收率為94.47%。 2、超聲提取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定高良姜中的槲皮素、山奈酚、高良姜素 建立基于非離子表面活性劑超聲提取-反相高效液相色譜法同時(shí)分離測(cè)定高良姜中槲皮素、山奈酚、高良姜素的方法。方法:采用phenomenex C18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈-0.25%冰醋酸水溶液,采用梯度洗脫;流速1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)360nm。通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定最優(yōu)提取方案為:在40℃下,100倍量的8%Triton X-100溶液超聲提取40min。結(jié)果:槲皮素、山奈酚和高良姜素分別在0.0076~76μg/mL,(r=0.9999);0.0064~64μg,mL,(r=1.0000);0.0152~152μg/mL,(r=0.9999)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,定性檢測(cè)限(S/N=3)依次為:7.32ng/mL,1.92ng/mL,1.13ng/mL:結(jié)論:該方法簡(jiǎn)便快速、靈敏度高、成本低、綠色環(huán)保,適用于高良姜中黃酮類物質(zhì)的含量測(cè)定,為高良姜中黃酮化合物的的檢測(cè)及分離提供了一個(gè)有效的科學(xué)方法。 3、膠束萃取-高效液相色譜法測(cè)定小兒瀉速停顆粒中的多酚類化合物 建立了基于表面活性劑膠束萃取-反相高效液相色譜法同時(shí)分離測(cè)定小兒瀉速停顆粒中沒(méi)食子酸、兒茶素、表兒茶素的方法。方法:采用phenomene×C18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈-0.2%冰醋酸水溶液,采用梯度洗脫;流速0.8mL/mim檢測(cè)波長(zhǎng)280nm?疾炝松V條件,優(yōu)化了膠束萃取和濁點(diǎn)富集參數(shù)。結(jié)果:沒(méi)食子酸、兒茶素和表兒茶素分別在0.0104~223μg/mL,(r=0.9999);0.0152~108μg/mL,(r=0.9999);0.0184~132μg/mL,(r=0.9999)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,定性檢測(cè)限(S/N)依次為:0.087ng/mL,0.43ng/mL,0.42ng/mL:在優(yōu)化條件:5%Triton X-100表面活性劑;固液比為1:100(g/mL);在30℃超聲萃取30min,萃取率可達(dá)到最大。加入5%NaCl來(lái)進(jìn)行濁點(diǎn)富集,可提高萃取回收率。平均回收率為91.85%-98.48%結(jié)論:本法簡(jiǎn)便快速、靈敏度高、成本低、綠色環(huán)保,可用于該制劑的質(zhì)量控制。
【關(guān)鍵詞】:高效液相色譜 膠束萃取 Triton X表面活性劑 中草藥
【學(xué)位授予單位】:西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:O657.72
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-9
- 第一部分 緒論9-23
- 1 高效液相色譜發(fā)展簡(jiǎn)況9-10
- 2 中草藥的發(fā)展現(xiàn)狀10-11
- 3 酚類化合物及其研究進(jìn)展11-13
- 4 樣品前處理技術(shù)的概念、分類及應(yīng)用發(fā)展13-22
- 5 課題研究的意義及主要內(nèi)容22-23
- 第二部分 研究報(bào)告23-41
- 一、膠束萃取-高效液相色譜法測(cè)定虎杖中的白藜蘆醇23-27
- 1 引言23
- 2 實(shí)驗(yàn)部分23-24
- 3 結(jié)果與分析24-26
- 4 結(jié)論26-27
- 二、超聲提取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定高良姜中的槲皮素、山奈酚、高良姜素27-33
- 1 引言27
- 2 實(shí)驗(yàn)部分27-29
- 3 結(jié)果與分析29-30
- 4 方法的驗(yàn)證30-32
- 5. 結(jié)論32-33
- 三、膠束萃取-高效液相色譜法測(cè)定小兒瀉速停顆粒中的多酚類化合物33-41
- 1 引言33-34
- 2 實(shí)驗(yàn)部分34-35
- 3 結(jié)果與分析35-39
- 4 結(jié)論39-41
- 參考文獻(xiàn)41-55
- 碩士期間發(fā)表的論文55-57
- 致謝57
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:高效液相色譜法在幾種中草藥中的應(yīng)用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):337186
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