L-抗壞血酸（又名維生素C）是一種人體必須的營養(yǎng)元素,在人體多種生理活動中均起到重要作用,但由于其不穩(wěn)定性極大限制了應(yīng)用。2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸（AA-2G）是一種L-抗壞血酸衍生物,具有穩(wěn)定性好、生理活性與L-抗壞血酸最接近等優(yōu)勢。AA-2G主要通過酶法合成,環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶（CGTase）被認為是合成AA-2G的最佳酶源。本研究利用海洋微生物Y112所產(chǎn)的CGTase催化L-抗壞血酸和β-環(huán)糊精合成AA-2G,首先采用單因素試驗優(yōu)化游離酶合成AA-2G的條件,進一步通過響應(yīng)面法對AA-2G的轉(zhuǎn)化條件進行了考察。然后采用吸附交聯(lián)包埋法固定化CGTase,研究了固定化CGTase的穩(wěn)定性,并探討了與游離酶相比利用固定化CGTase轉(zhuǎn)化合成AA-2G的優(yōu)勢,為今后酶法轉(zhuǎn)化合成AA-2G的研究提供了理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果分述如下:游離CGTase轉(zhuǎn)化合成AA-2G的條件優(yōu)化:采用單因素試驗初步優(yōu)化游離酶合成AA-2G的條件,考察pH、加酶量、底物濃度、溫度、底物配比、反應(yīng)時間對AA-2G產(chǎn)量的影響,并通過Plackett-Burman試驗設(shè)計對影響AA-2G合成的6個因素進... 

【文章來源】：上海海洋大學上海市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

AA-2G標準樣品、VC標準品及轉(zhuǎn)化反應(yīng)液HPLC圖

18h，24 h，36h，42 h，48h。由圖2-3 可知，AA-2G 的產(chǎn)量隨著反應(yīng)時間的延長而逐漸增大，當反應(yīng)時間延長至 24 h時，AA-2G 的產(chǎn)量最高，超過 24 h 后 AA-2G 產(chǎn)量開始減少，所以選擇 24 h 進行后續(xù)酶法轉(zhuǎn)化合成 AA-2G 條件優(yōu)化研究。(b)VCAA-2G(c)VC

圖 2-3 轉(zhuǎn)化時間對合成 AA-2G 的影響Fig. 2-3 Effect of time on the synthesis ofAA-2G度對酶法轉(zhuǎn)化合成 AA-2G 的影響度對 CGTase 酶法轉(zhuǎn)化合成 AA-2G 的影響，保持其他條件為 15℃，25℃，30℃，35℃，40℃，45℃，50℃，55 ℃進，隨著轉(zhuǎn)化溫度的升高，AA-2G 的產(chǎn)量也在不斷增加，溫繼續(xù)升高溫度，AA-2G 的產(chǎn)量呈現(xiàn)下降的趨勢，這可能是轉(zhuǎn)化反應(yīng)速度加快，而超過 40℃后溫度過高造成酶活有部 40℃進行后續(xù)酶法轉(zhuǎn)化合成 AA-2G 條件優(yōu)化研究。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]固定化CGTase生物轉(zhuǎn)化合成AA-2G及轉(zhuǎn)化過程優(yōu)化研究[D]. 單麗媛.江南大學 2016
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本文編號：3357473