本文以貴州雷山地區(qū)青錢柳(Cyclocarya paliurus(batal)IIjinskaja,C.paliurus)葉為原材料,優(yōu)化了青錢柳葉總糖和總黃酮的超聲輔助提取的工藝,并對其化學(xué)成分進(jìn)行了提取分離及成分分析,收集了全國11個產(chǎn)地的青錢柳葉,采用高效液相色譜(HPLC)對其進(jìn)行了指紋圖譜研究:1.本實驗采用Box-Behnken方法對青錢柳葉總糖和總黃酮的纖維素酶超聲提取工藝進(jìn)行了響應(yīng)面優(yōu)化,以溶劑類型、料液比、超聲時間和纖維素酶用量四個單因素為依據(jù),采用四因素三水平的方法優(yōu)化出最佳工藝,并以最佳工藝條件結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線測定了不同月份青錢柳葉中總糖和總黃酮的含量,建立其變化曲線圖�？偺呛涂傸S酮的最佳工藝分別是:(1)總糖:水提料液比為1:8.38(g/mL),超聲時間為27.3 min,纖維素酶量為0.2%。(2)總黃酮:乙醇濃度為75%,料液比為1:44.5(g/mL),超聲時間為29 min,纖維素酶用量為0.454%。在此條件下,測得多糖提取率為3.746%,黃酮提取率為5.472%。對比不同月份青錢柳中總糖和總黃酮含量可知,多糖含量4月份最高,6月份最低,黃酮含量8月份最高,4月份最低;對比不同地區(qū)青錢柳中總糖和總黃酮含量可知,九十九地區(qū)的青錢柳葉多糖和黃酮含量普遍高于獨南地區(qū);對比不同種源青錢柳中總糖和總黃酮含量可知,種播的青錢柳葉多糖含量普遍高于野生移植,而野生移植的青錢柳葉黃酮含量普遍高于種播。2.利用氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)對青錢柳葉的石油醚提取物進(jìn)行了成分分析,一共得到了44種物質(zhì),將這44種物質(zhì)歸類為6大類,分別是脂肪類、芳香類、類芳香、生物堿類、甾體類和萜類。3.利用高效液相色譜(HPLC)分別考察了波長、流動相、提取部位對色譜圖的影響情況,最終優(yōu)化出最佳的色譜條件:檢測樣品為50%甲醇提取物,色譜柱為DIONEX C18(250×4.6 mm),流動相分別為:乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B);梯度洗脫:0~8 min,2%~10%A;8~39 min,10%~25%A;39~57 min,25%~32%A;57~70 min,32%~60%A;70~85 min,60%~90%A;85~90 min,90%~95%A;體積流量:1.0 mL/min,柱溫:35℃,進(jìn)樣量10μL,檢測波長 254 nm 。在此色譜條件下,對11個產(chǎn)地的青錢柳葉進(jìn)行了HPLC檢測,應(yīng)用國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)》評價了11個批次青錢柳藥材的指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)11個產(chǎn)地的青錢柳葉共有峰有20個,采用聚類分析可以將其分成5類,Ⅰ類有S1(湖南)、S2(浙江)、S11(江西)、S5(貴州),Ⅱ類有S3(廣西)、S9(湖北)、S6(貴州),Ⅲ類有S4(江西)、S10(貴州),Ⅳ類有S7(河南),Ⅴ類有S8(浙江);主成分分析認(rèn)為峰14、峰18、峰8是青錢柳葉的特征峰。
【學(xué)位單位】：武漢工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：O657.72;TQ914.1
【部分圖文】：

圖 2.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2.3 Standard curve of glucose圖 2.4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2.4 Standard Curve of rutin

19圖 2.4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2.4 Standard Curve of rutin由圖 2.3 和 2.4 可知，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線為 A=0.0244c（c 的位 μg/mL ），R2=0.9994，這說明了吸光度 A 在 0~40 μg/mL 的度范圍內(nèi)有著良好的線性關(guān)系；黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線為 A=0.0241c（c 的位 μg/mL ），R2=0.9992，這說明了吸光度 A 在 0~41 μg/mL 的度范圍內(nèi)有著良好的線性關(guān)系。2.2.2 提取率的計算方法青錢柳提取率計算公式如下：

武漢工程大學(xué)碩士學(xué)位論文 100%1.24745.0525100.0096/%14 VMAV多糖提取率 100%0.25871.028100.0299/%14 VMAV黃酮提取率式中：A 為吸光度，V1為測定體積，V 為測試液體積，M 為樣質(zhì)量。2.2.3 單因素實驗結(jié)果與分析2.2.3.1 探究最適溶劑濃度
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本文編號：2884940