【摘要】：黑茶是六大茶類之一,具有明顯的降脂降壓,抗氧化等藥理保健功能。黑茶的生物活性物質(zhì)變化是黑茶具有多種生物學(xué)功能主要原因,因此對(duì)黑茶特征性基礎(chǔ)物質(zhì)和品質(zhì)形成及變化規(guī)律的研究是研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn),研究黑茶中特征性物質(zhì)是由哪些微生物組合作用,對(duì)黑茶功能性物質(zhì)的研究開(kāi)發(fā)對(duì)提高黑茶品質(zhì)價(jià)值和商業(yè)化具有重要的意義。本論文旨在篩選出高產(chǎn)功能性Teadenol化合物的菌株,有研究證明Teadenol是由曲霉屬真菌代謝產(chǎn)物使茶葉中兒茶素類物質(zhì)衍生而得,具有明顯的降脂抗氧化等功能,研究高產(chǎn)化合物菌株對(duì)工業(yè)化微生物發(fā)酵茶提供了潛在價(jià)值,同時(shí)為黑茶人工可控發(fā)酵選擇菌株,選擇發(fā)酵參數(shù)和化學(xué)分析提供方法,也為從小分子化合物水平研究渥堆微生物對(duì)黑茶化學(xué)品質(zhì)的影響提供一種思路。本文采用了傳統(tǒng)分離鑒定方法分離鑒定不同來(lái)源的真菌,篩選出真菌最適溫度,單菌株固態(tài)發(fā)酵篩選,對(duì)篩選出的單菌株發(fā)酵茶感官評(píng)審和理化分析,再對(duì)篩選出的合適單菌株固態(tài)發(fā)酵茶通過(guò)HPLC-MS等技術(shù)分析產(chǎn)目標(biāo)化合物情況,以得到有高產(chǎn)目標(biāo)化合物的菌株,并對(duì)該菌株產(chǎn)目標(biāo)化合物Teadenol的HPLCMS、NMR分離鑒定分析,最終實(shí)現(xiàn)獲得高產(chǎn)Teadenol化合物的菌株。論文研究結(jié)果如下:(1)分離自普洱茶和湖南黑茶真菌和13株外源真菌,經(jīng)傳統(tǒng)分離鑒定方法,共分離鑒定出34株真菌6個(gè)不同屬,分別為曲霉屬(米曲霉、散囊菌、黑曲霉)、青霉屬、根霉、彎孢屬、節(jié)菱孢屬和酵母。(2)在茶湯培養(yǎng)基和普通培養(yǎng)基上篩選出分離出真菌最適溫度30、37℃。通過(guò)單菌株固態(tài)發(fā)酵確定37℃為發(fā)酵溫度,并篩除致病菌株和發(fā)酵效果不好菌株。對(duì)篩選出菌株感官評(píng)審和水浸出物、粗多糖值測(cè)取,篩除感官結(jié)果不好菌株,最終篩選出20株真菌作為發(fā)酵菌株。(3)采用HPLC-MS等方法比較不同屬真菌單菌株固態(tài)發(fā)酵茶中目標(biāo)化合物的含量,檢測(cè)出曲霉屬D17B35(A.amstelodami)、D17B50(E.amstelodami)、D17DA(A.tubingensis)、D17DB(A.niger)、D17HA(A.niger)、D17HB(E.amstelodami)、D17A3(A.niger)、D17DC(A.luchuensis)、D17A2(A.niger)產(chǎn)目標(biāo)化合物A、B,其中曲霉屬D17A3在含水量50%發(fā)酵20 d產(chǎn)目標(biāo)化合物量最高。最終篩選出較高產(chǎn)目標(biāo)化合物Teadenol化合物的菌株D17A3(A.niger)作為目標(biāo)菌株。(4)利用HPLC-MS、NMR等方法分析高產(chǎn)菌株D17A3產(chǎn)出的目標(biāo)化合物A、B,證明在準(zhǔn)分子離子峰[M-H]-1質(zhì)荷比都為275.05質(zhì)譜圖上保留時(shí)間15.5 min產(chǎn)出的化合物A為Teadenol A,保留時(shí)間18.7 min產(chǎn)出的化合物B為Teadenol B。
【圖文】：

從不同黑茶分離的”金花”菌在不同培養(yǎng)基的形態(tài)特征和顯微結(jié)構(gòu)

從不同來(lái)源分離的米曲霉屬在不同培養(yǎng)基的形態(tài)特征和顯微結(jié)構(gòu)
【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：TS272.7;O657.63

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2694818