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活性氧小分子熒光探針的設(shè)計(jì)、合成與生物成像研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-12 08:13
【摘要】:活性氧物質(zhì)在生命體中扮演著重要的角色,在生物細(xì)胞中的信號(hào)傳導(dǎo)、分化、遷移和細(xì)胞免疫中均起著非常重要的作用。過(guò)氧化氫(H_2O_2)和次氯酸(HOCl)作為生物體內(nèi)重要的活性氧小分子,在生物體內(nèi)具有重要的生理作用,參與眾多生理過(guò)程。一旦細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫或次氯酸的濃度發(fā)生異常,將導(dǎo)致各種組織損傷而引起各種疾病,所以,有效的跟蹤檢測(cè)生命體細(xì)胞中的過(guò)氧化氫和次氯酸具有非常重要意義。二氧化硫(SO_2)作為一種新的被認(rèn)可的氣體信號(hào)分子,在調(diào)節(jié)心血管功能方面起著重要的作用。因此,利用有效的分子工具闡明二氧化硫及其衍生物的產(chǎn)生和生理作用也非常有意義和價(jià)值。本論文以檢測(cè)細(xì)胞和生物體中H_2O_2、HOCl以及SO_2小分子為研究目的,熒光檢測(cè)為手段,綜合利用分子識(shí)別和分子熒光響應(yīng)機(jī)制設(shè)計(jì)合成六例熒光探針,具體研究?jī)?nèi)容如下:簡(jiǎn)述熒光探針的的識(shí)別機(jī)理和HOCl/H_2O_2熒光探針的研究進(jìn)展;谒谋揭蚁┭苌锞奂T導(dǎo)發(fā)光性質(zhì)(AIE)和激發(fā)態(tài)分子態(tài)質(zhì)子轉(zhuǎn)移(ESIPT)機(jī)制,合成三個(gè)過(guò)氧化氫探針TPE-H_2O_2-N,TPE-H_2O_2-O以及TPE-H_2O_2-S。重點(diǎn)研究探針TPE-H_2O_2-S對(duì)H_2O_2的識(shí)別的光譜性質(zhì),同時(shí)探針TPE-H_2O_2-S成功應(yīng)用到活細(xì)胞(RAW264.7,HepG2)中進(jìn)行成像研究。基于芘類(lèi)衍生化合物二聚體發(fā)光性質(zhì)和PET機(jī)制,設(shè)計(jì)合成一例具有較大Stokes位移的過(guò)氧化氫熒光探針Py-Boe。該探針對(duì)過(guò)氧化氫的識(shí)別具有良好的靈敏性和選擇性,最低檢測(cè)限可以達(dá)到6.7μM。該探針成功應(yīng)用于RAW264.7細(xì)胞進(jìn)行熒光成像。基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)機(jī)理,選擇羅丹明和萘分別作為熒光能量的受體分子和供體分子,得到一例比率型次氯酸熒光探針Lyso-HOCl。探針Lyso-HOCl可以進(jìn)行肉眼觀察到加入NaClO水溶液后,探針溶液顏色從無(wú)色變成紅色。該探針對(duì)次氯酸的最低檢測(cè)限為12.3μM。此外,探針Lyso-HOCl成功定位到活細(xì)胞(RAW264.7,HeLa)中溶酶體上進(jìn)行熒光成像,并且具有較高的共定位系數(shù);谒谋揭蚁┼邕蝾(lèi)衍生物作為熒光基團(tuán)和ESPIT機(jī)制,得到一例具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光性質(zhì)的比率型二氧化硫探針TPE-SO_2。探針TPE-SO_2顯示良好的光譜性質(zhì),對(duì)SO_3~(2 )的響應(yīng)具有較好的靈敏性和選擇性,最低檢測(cè)限可達(dá)到0.9μM。探針TPE-SO_2成功應(yīng)用于活細(xì)胞(RAW264.7,HepG2,He La)成像。探針TPE-SO_2應(yīng)用于活體斑馬魚(yú)成像。
【圖文】:

示意圖,示意圖,過(guò)程


ICT過(guò)程示意圖

示意圖,熒光共振能量轉(zhuǎn)移,過(guò)程,苯并吡喃


圖 1-14 熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)過(guò)程示意圖Figure 1-14 The schematic diagram of FRET progress.Akio Ojida[68]課題組利用香豆素?zé)晒饣鶊F(tuán)作為能量供體,,通過(guò)含雜原子連接苯并吡喃鹽化合物,構(gòu)成典型的 FRET 機(jī)理的熒光探針 11。如下圖示:當(dāng)激發(fā)香豆素?zé)晒饣鶊F(tuán)時(shí),通過(guò) FRET 過(guò)程,得到苯并吡喃發(fā)色團(tuán)的
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)礦業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:O657.3

【參考文獻(xiàn)】

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2 楊榮松;董湘玉;;內(nèi)源性二氧化硫生物學(xué)特性及研究進(jìn)展[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2013年11期

3 侯聰聰;王剛;楊曉改;;線粒體是雙乙酰丙酮氧釩在腎上皮細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生活性氧物種的主要來(lái)源(英文)[J];Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences;2013年01期

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本文編號(hào):2659921

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