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基于拉曼光譜技術(shù)的茶樹葉片中類胡蘿卜素含量的無損快速檢測

發(fā)布時間:2020-02-14 22:04
【摘要】:葉片中類胡蘿卜素是植被環(huán)境脅迫、光合能力和植被發(fā)育階段的指示器;谌~片的原位拉曼光譜響應(yīng)特性對龍井43葉片的類胡蘿卜素含量進(jìn)行了研究,建立了兩者之間的定量模型。本文共對315個龍井43葉片樣本進(jìn)行了拉曼光譜采集和分光光度檢測。為排除檢測過程中受噪聲、基線漂移等因素的干擾,運(yùn)用和比較了五種光譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法提取原始拉曼光譜中與茶葉中類胡蘿卜素含量有關(guān)的有效信息;陬A(yù)處理后的數(shù)據(jù)建立了偏最小二乘(PLS)回歸模型,拉曼光譜與類胡蘿卜素含量的建模集和預(yù)測集的相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.817和0.786。為進(jìn)一步研究類胡蘿卜素的拉曼光譜響應(yīng)機(jī)理,本文采用連續(xù)投影算法(SPA)優(yōu)選了17個拉曼特征波數(shù)建立相應(yīng)的特征波數(shù)模型,模型的建模集和預(yù)測集的相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.808和0.777。根據(jù)已建立的模型,探究了茶樹四個不同葉位的葉片類胡蘿卜素含量的變化。發(fā)現(xiàn)茶樹葉片隨著葉齡的增加,類胡蘿卜素濃度呈先增后減的趨勢。以第2位葉的類胡蘿卜素含量最高。進(jìn)一步驗(yàn)證了模型的可行性以及探索了將該模型應(yīng)用于茶樹葉片樹齡和葉位探測的可能性。采用拉曼光譜技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)茶樹葉片中類胡蘿卜素含量的原位、無損、定量檢測。
【圖文】:

茶樹葉


工澆水,實(shí)驗(yàn)時葉齡約為2年。材料1:用于建模的龍井43葉片315片,將葉片放入密封袋中、標(biāo)號。對葉片進(jìn)行拉曼光譜采集,采集后的葉片立即放入4℃冰箱內(nèi)避光冷藏。光譜采集后剪取主葉脈兩邊的葉片約0.1g,,記錄其濕重;然后將樣品剪碎研磨后加入10mL色素提取液(95%酒精溶液),置于暗室保存約24h,用于紫外分光光度計(jì)檢測類胡蘿卜素含量。材料2:用于驗(yàn)證模型的樣本選用一株茶樹上不同葉位的4片葉片,對樣本進(jìn)行拉曼光譜面掃描。葉片的葉位及形態(tài)如圖1所示:頂芽附近第一片葉作為1號位葉,往下依次標(biāo)記為第2、3、4葉。圖1茶樹葉位的選擇圖Fig.1Sketchmapofsamplepreparation1.1.2儀器本實(shí)驗(yàn)用到的拉曼光譜儀為雷尼紹共聚焦激光顯微拉曼儀(RenishawinVia-Reflex532/XYZ)。激發(fā)波長532nm;激光強(qiáng)度50mW;積分時間1s;拉曼光譜檢測波長范圍為579~3062cm-1;分辨率0.2nm;選用放大倍數(shù)為5×的物鏡。材料1:每個樣本掃描葉片上中下三個點(diǎn),取三條光譜的平均,用平均光譜作為樣本的代表性拉曼光譜。本實(shí)驗(yàn)采用紫外分光光度計(jì)法測定茶樹葉片的類胡蘿卜素含量,單位mg·g-1。材料2:4個樣本分別進(jìn)行拉曼面掃描,步長2μm,1,3和4號樣本的面掃描區(qū)域一共包含221(17×13)個點(diǎn),2號樣本包含224(16×14)個點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)采用WIRE3.3對采集的拉曼光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行提。挥茫眨睿螅悖颍幔恚猓欤澹颍梗泛停停幔簦欤幔

特征波,茶葉,類胡蘿卜素


圖3茶葉類胡蘿卜素的特征波數(shù)Fig.3TheoptimizedcharacteristicwavenumbersusingSPA為茶樹葉片光譜的ν4(C—H)平面外擺動[12],1000cm-1為茶樹葉片光譜的甲基ν3(C—H3)平面內(nèi)搖擺振動,1160cm-1為茶樹葉片光譜的ν1(C—C)伸縮振動[7]。其余特征歸屬見表3。結(jié)合圖2來看,茶樹葉片的C迨C雙鍵和C—C單鍵的平面內(nèi)伸縮振動拉曼譜峰強(qiáng)度較高,而甲基(CH3)的平面內(nèi)搖擺振動稍弱之,這些峰都是可作為茶葉中類胡蘿卜素檢測的特征峰,說明了篩選出17個特征波數(shù)能夠解釋茶葉中的類胡蘿卜素含量。特征波數(shù)的減少,簡化了模型,而同時模型的擬合度、穩(wěn)健性得以保留。提取后的特征波數(shù)推廣能力強(qiáng),可廣泛用于回歸建模,提高了光譜儀的掃描速度。為茶葉生產(chǎn)中茶葉類胡蘿卜素含量的在線、實(shí)時檢測提供了理論依據(jù)。圖4基于特征波數(shù)建立的PLS模型建模效果Fig.4PredictedconcentrationofcalibrationandpredictionusingPLS表3拉曼特征波數(shù)的化學(xué)歸屬Table3ChemicalassignmentsofcharacteristicRamanshiftsWavenumber/cm-1AssignmentReferenceWavenumber/cm-1AssignmentReference945ν4(C—H)平面外擺動[13]1515ν2(C迨C)平面內(nèi)伸縮[7,12]1000ν3(C—H3)平面內(nèi)搖擺振動[

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本文編號:2579621

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