【摘要】：為檢測(cè)小分子農(nóng)藥草甘膦(PMG)的殘留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通過(guò)免疫制備高敏感性、特異性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法將PMG分別與載體蛋白BSA和OVA偶聯(lián),合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;經(jīng)紫外掃描、SDS-PAGE電泳、質(zhì)譜鑒定后,免疫BALB/c小鼠,制備多抗血清;利用間接ELISA法測(cè)定多抗血清效價(jià),競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定多抗血清的敏感性和特異性。結(jié)果表明,所合成的免疫抗原效果較好,免疫的4只小鼠效價(jià)均達(dá)1∶104以上,4號(hào)小鼠的多抗血清敏感性最高,半數(shù)抑制濃度IC50為31.4μg·m L-1,與其他有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥無(wú)交叉反應(yīng),具備良好的特異性。本試驗(yàn)成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特異性好的鼠源多抗血清,為PMG單克隆抗體制備及其免疫學(xué)快速檢測(cè)方法的建立奠定了基礎(chǔ)。

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