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基于單細(xì)胞拉曼光譜技術(shù)的葡萄球菌黃素生物合成分析

發(fā)布時間:2018-08-31 11:59
【摘要】:利用光鑷?yán)庾V技術(shù)研究吲哚對金葡菌細(xì)胞中葡萄球菌黃素合成的抑制作用以及色素含量在分批培養(yǎng)過程中的動態(tài)變化。收集經(jīng)不同濃度吲哚(終濃度為0,0.2,0.6,0.8,1.2和1.5 mmol/L)處理后的以及不同培養(yǎng)時間的金葡菌單細(xì)胞的拉曼光譜,以光譜1523 cm-1峰強(qiáng)度表征色素含量,并與紫外可見分光光度法得到的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果表明,細(xì)菌拉曼光譜1523 cm~(-1)峰強(qiáng)度與分光光度法測得的色素含量有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)達(dá)0.9772;群體和單細(xì)胞水平的光譜數(shù)據(jù)均表明,吲哚可劑量依賴性地抑制葡萄球菌黃素的合成,色素含量降低幅度超過70%;在分批培養(yǎng)中細(xì)菌色素含量在對數(shù)生長中期(12 h)達(dá)到最大值,各個時間點(diǎn)的群體內(nèi)部細(xì)胞間色素含量的異質(zhì)性較小,RSD在39.2%~61.1%之間。本研究表明光鑷?yán)庾V技術(shù)是一種在單細(xì)胞水平分析葡萄球菌黃素含量的可靠方法。
[Abstract]:The inhibitory effect of indole on staphylococcal flavin synthesis in Staphylococcus aureus cells and the dynamic changes of pigment content in batch culture were studied by optical tweezers Raman spectroscopy. The Raman spectra of single cell of Staphylococcus aureus treated with different concentrations of indole (0 0. 2 and 0. 6 mmol/L) and cultured for different time were collected. The pigment content was characterized by the intensity of spectrum 1523 cm-1 peak. The results obtained by UV-vis spectrophotometry were compared with those obtained by UV-vis spectrophotometry. The results showed that there was a good linear relationship between the intensity of 1523 cm~ (-1) peak of bacterial Raman spectrum and the pigment content measured by spectrophotometry, and the correlation coefficient was 0.9772. Indole inhibited the synthesis of staphyloflavin in a dose-dependent manner, and the content of pigment decreased by more than 70%, and the content of bacterial pigment reached the maximum in the middle phase of logarithmic growth (12 h) in batch culture. The relative standard deviation (RSD) of cytochrome content between populations at different time points was between 39.2% and 61.1%. This study shows that optical tweezers Raman spectroscopy is a reliable method for the analysis of staphylococcal flavin at single cell level.
【作者單位】: 廣西科學(xué)院生物物理實驗室;廣西師范大學(xué)物理科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;廣西科學(xué)院國家非糧生物質(zhì)能源工程技術(shù)研究中心;
【基金】:廣西自然科學(xué)基金(No.2014GXNSFAA118193) 廣西科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)資助項目(No.15YJ22SL08)資助
【分類號】:O657.37

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