【摘要】：目的:建立基于實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)技術(shù)檢測蓮蓉制品中蕓豆成分的方法。方法:以蕓豆pvsbe2基因高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物和探針,通過對蓮子及其他富含淀粉類植物DNA進(jìn)行擴(kuò)增,以驗證方法的特異性;以1 ng/μL的蕓豆DNA進(jìn)行系列稀釋,確定此法檢測靈敏度;對含有1%蕓豆與蓮子的混合樣品的DNA模板進(jìn)行10倍梯度稀釋,確定重量檢測靈敏度;并應(yīng)用此方法和PCR方法對市場樣品進(jìn)行了檢測,對建立的熒光PCR方法進(jìn)行驗證。結(jié)果:該檢測方法具有高度特異性,與蓮子及其他高淀粉植物無交叉反應(yīng);DNA質(zhì)量濃度的檢測靈敏度達(dá)到1 pg/μL,重量檢測靈敏度可達(dá)0.01%。含蕓豆成分的蓮蓉月餅擴(kuò)增陽性,檢測結(jié)果與食品標(biāo)簽相符。結(jié)論:本研究建立的實時熒光PCR方法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡便的特點,更適合蓮蓉制品中蕓豆成分的快速檢測。
[Abstract]:Aim: to establish a real-time fluorescent polymerase chain reaction (polymerase chain) method for the determination of kidney bean in lotus paste products. Methods: specific primers and probes were designed with highly conserved region of pvsbe2 gene of kidney bean to amplify lotus seed and other starch-rich plants to verify the specificity of the method. The sensitivity of this method was determined. The DNA template containing 1% kidney bean and lotus seed was diluted by 10 times gradient to determine the sensitivity of gravimetric detection. The established fluorescent PCR method was verified. Results: this method has a high specificity. The sensitivity of the method is 1 pg/ 渭 L without cross reaction with lotus seed and other high starch plants, and the sensitivity of weight detection is 0. 01%. Lotus paste mooncakes containing kidney bean components were amplified positive, and the results were consistent with food labels. Conclusion: the real-time PCR method developed in this study has the characteristics of high specificity, high sensitivity, rapid and simple, and is more suitable for rapid detection of kidney bean components in lotus seed paste products.
【作者單位】： 廣西梧州食品藥品檢驗所;
【分類號】：O657.3;TS207.3

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本文編號：2134033