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運(yùn)動預(yù)適應(yīng)保護(hù)效應(yīng)中大鼠心房利鈉肽的變化

發(fā)布時間:2017-08-10 01:31

  本文關(guān)鍵詞:運(yùn)動預(yù)適應(yīng)保護(hù)效應(yīng)中大鼠心房利鈉肽的變化


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【摘要】:研究目的:運(yùn)動預(yù)適應(yīng)(exercise preconditioning,EP)在心肌保護(hù)效應(yīng)中扮演著重要的角色,其機(jī)制也逐漸被人們所闡明和揭示。心房利鈉肽(atrial natriuretic peptide,ANP)的發(fā)現(xiàn)確定了心臟不僅是個血泵,同時具有重要的內(nèi)分泌功能。ANP在利鈉、利尿和調(diào)節(jié)循環(huán)血量;擴(kuò)張血管和降低血壓等方面發(fā)揮了重要作用。據(jù)此,本實(shí)驗(yàn)在本課題組前期研究的基礎(chǔ)上,探討EP對右心房組織ANP表達(dá)變化的影響及在EP早期和晚期保護(hù)效應(yīng)中有心房組織ANP的作用及可能存在的機(jī)制。為進(jìn)一步豐富EP心肌保護(hù)效應(yīng)機(jī)制的研究方法提供更新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠150只,將大鼠按體重分層,隨機(jī)分為6組,每組25只,分別為對照組(C組)、大強(qiáng)度運(yùn)動組(HE組)、早期運(yùn)動預(yù)適應(yīng)組(EEP組)、晚期運(yùn)動預(yù)適應(yīng)組(LEP組)、早期運(yùn)動預(yù)適應(yīng)+大強(qiáng)度運(yùn)動組(EEP+HE組)、晚期運(yùn)動預(yù)適應(yīng)+大強(qiáng)度運(yùn)動組(LEP+HE組)。參照本課題組及相關(guān)學(xué)者研究報道,采用一次大強(qiáng)度間歇跑臺運(yùn)動建立EP動物模型;采用一次大強(qiáng)度持續(xù)跑臺運(yùn)動建立大鼠急性運(yùn)動性心肌損傷模型。通過化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測大鼠血漿心肌肌鈣蛋白I(cardiac troponin I,c Tn I)和血漿ANP的含量;用HE染色法和心肌缺血缺氧染色法綜合評價運(yùn)動性心肌損傷和保護(hù)程度;用免疫組織化學(xué)法和免疫印跡法,原位雜交組織化學(xué)法、熒光定量PCR法觀察和檢測EP早期和晚期心肌保護(hù)效應(yīng)中右心房組織ANP和ANP m RNA的表達(dá)變化。研究結(jié)果:1.心肌損傷與保護(hù)綜合評價指標(biāo):與C組相比,HE組血漿c Tn I水平明顯升高,心肌組織C-2R和HBFP染色MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與C組相比,EEP和LEP組血漿c Tn I水平、心肌組織C-2R和HBFP染色MOD值無明顯變化,差異不具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組與LEP+HE組血漿c Tn I水平明顯下降,心肌組織C-2R和HBFP染色MOD值明顯降低,差異具有顯著性(P0.05);與EEP+HE組相比,LEP+HE組血漿c Tn I水平明顯升高,心肌組織C-2R和HBFP染色MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05)。2.血漿ANP水平變化:與C組相比,HE組、EEP組血漿ANP水平無明顯變化;與C組相比,LEP組血漿ANP水平有明顯升高現(xiàn)象,但差異不具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組與LEP+HE組血漿ANP水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與EEP+HE組相比,LEP+HE組血漿ANP水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05)。3.右心房組織ANP免疫組化:與C組相比,HE組、EEP組和LEP組右心房組織ANP免疫反應(yīng)MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組與LEP+HE組右心房組織ANP免疫反應(yīng)MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05)。與EEP+HE組比,LEP+HE組右心房組織ANP免疫反應(yīng)MOD值有明顯升高現(xiàn)象,但差異不具有顯著性(P0.05)。4.右心房組織ANP免疫印跡:與C組相比,HE組和LEP組右心房組織ANP水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與C組相比,EEP組右心房組織ANP水平有明顯升高現(xiàn)象,但差異不具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組右心房組織ANP水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與HE組相比,LEP+HE組右心房組織ANP水平有明顯下降現(xiàn)象,但差異不具有顯著性(P0.05)。5.右心房組織ANP m RNA原位雜交:與C組相比,HE組、EEP組和LEP組右心房組織ANP m RNA原位雜交陽性信號MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組與LEP+HE組右心房組織ANP m RNA原位雜交陽性信號MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與EEP+HE組比,LEP+HE組右心房組織ANP m RNA原位雜交陽性信號MOD值明顯升高,差異具有顯著性(P0.05)。6.右心房組織ANP m RNA實(shí)時熒光定量PCR:與C組相比,HE組、EEP組右心房組織ANP m RNA水平有明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與C組相比,LEP組右心房組織ANP m RNA水平有明顯升高現(xiàn)象,但差異不具有顯著性(P0.05);與HE組相比,EEP+HE組與LEP+HE組右心房組織ANP m RNA水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05);與EEP+HE組相比,LEP+HE組右心房組織ANP m RNA水平明顯升高,差異具有顯著性(P0.05)。研究結(jié)論:EP能減輕一次大強(qiáng)度運(yùn)動引起的急性心肌損傷,對心肌具有早期和晚期保護(hù)作用,且EP早期保護(hù)效應(yīng)較晚期保護(hù)效應(yīng)更為明顯。EP通過上調(diào)右心房組織ANP m RNA水平,促進(jìn)右心房組織ANP表達(dá)增加,引起血漿ANP水平的升高。在EP早期和晚期保護(hù)效應(yīng)中,血漿ANP和右心房組織ANP均參與了EP對運(yùn)動性心肌損傷的保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】:運(yùn)動預(yù)適應(yīng) 心房利鈉肽 心肌保護(hù)效應(yīng) 右心房 大鼠
【學(xué)位授予單位】:上海體育學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:G804.2
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-12
  • 第一部分 心房利鈉肽在心肌保護(hù)和運(yùn)動中的研究現(xiàn)狀及展望12-20
  • 1 ANP生物學(xué)特征12-13
  • 1.1 ANP的分子結(jié)構(gòu)12-13
  • 1.2 ANP在體內(nèi)的合成分布和作用機(jī)理13
  • 2 ANP對心肌組織的保護(hù)作用13-14
  • 2.1 ANP對心肌組織缺血缺氧的保護(hù)作用13
  • 2.2 ANP與心肌組織缺血/再灌注損傷13-14
  • 3 運(yùn)動對ANP表達(dá)的影響14-15
  • 3.1 運(yùn)動與心肌組織ANP的表達(dá)14
  • 3.2 不同運(yùn)動強(qiáng)度與心肌組織ANP的表達(dá)14-15
  • 3.3 不同運(yùn)動形式與心肌組織ANP的表達(dá)15
  • 4 心肌組織ANP與運(yùn)動預(yù)適應(yīng)15-16
  • 4.1 運(yùn)動預(yù)適應(yīng)15-16
  • 4.2 心肌組織ANP的表達(dá)與運(yùn)動預(yù)適應(yīng)16
  • 5 展望16
  • 6 參考文獻(xiàn)16-20
  • 第二部分 運(yùn)動預(yù)適應(yīng)保護(hù)效應(yīng)中大鼠心房利鈉肽的變化20-52
  • 1 前言20-21
  • 2 材料與方法21-33
  • 2.1 技術(shù)路線21
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑21-22
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備22
  • 2.4 動物模型與方法22-23
  • 2.4.1 運(yùn)動預(yù)適應(yīng)與心肌損傷模型的建立22-23
  • 2.4.2 實(shí)驗(yàn)條件和動物分組23
  • 2.5 動物取材與石蠟切片制備23-24
  • 2.5.1 動物取材23-24
  • 2.5.2 石蠟切片制備24
  • 2.6 大鼠血漿cTnI含量的檢測24-25
  • 2.7 大鼠心肌組織HE染色25
  • 2.8 大鼠心肌組織變色酸 2R-亮綠染色25-26
  • 2.9 大鼠心肌組織HBFP染色26
  • 2.10 大鼠血漿ANP含量的酶聯(lián)免疫吸附法檢測26-27
  • 2.11 大鼠心肌組織ANP免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)與圖像分析27-28
  • 2.11.1 大鼠心肌組織ANP免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟27
  • 2.11.2 大鼠心肌組織ANP免疫反應(yīng)圖像分析27-28
  • 2.12 大鼠心肌組織ANP免疫印跡法檢測28-30
  • 2.13 大鼠心肌組織ANP mRNA原位雜交組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)與圖像分析30-31
  • 2.13.1 大鼠心肌組織ANP mRNA原位雜交組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟30-31
  • 2.13.2 大鼠心肌組織ANP mRNA原位雜交圖像分析31
  • 2.14 大鼠心肌組織ANP mRNA實(shí)時熒光定量PCR檢測31-33
  • 2.15 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析33
  • 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-43
  • 3.1 大鼠心肌損傷與保護(hù)檢測結(jié)果33-37
  • 3.1.1 大鼠血漿心肌肌鈣蛋白I水平的變化33-34
  • 3.1.2 大鼠心肌組織HE染色34-35
  • 3.1.3 大鼠心肌組織變色酸 2R-亮綠染色和圖像分析35-36
  • 3.1.4 大鼠心肌組織HBFP染色和圖像分析36-37
  • 3.2 大鼠血漿和心肌組織ANP檢測結(jié)果37-43
  • 3.2.1 大鼠血漿ANP水平變化37-38
  • 3.2.2 大鼠右心房組織ANP免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和圖像分析38-40
  • 3.2.3 大鼠右心房組織ANP免疫印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-41
  • 3.2.4 大鼠右心房組織ANP mRNA原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與圖像分析41-42
  • 3.2.5 大鼠右心房組織ANP mRNA實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-43
  • 4 分析與討論43-48
  • 4.1 ANP生物學(xué)特性43-44
  • 4.2 運(yùn)動預(yù)適應(yīng)誘導(dǎo)心肌保護(hù)效應(yīng)44-45
  • 4.3 大鼠血漿ANP水平的變化45-46
  • 4.4 大鼠右心房組織ANP表達(dá)的變化46-47
  • 4.5 大鼠右心房組織ANP mRNA表達(dá)的變化47-48
  • 5 研究結(jié)論48-49
  • 6 參考文獻(xiàn)49-52
  • 附圖52-59
  • 常用名詞中英文對照和縮略語59-60
  • 致謝60

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 孫曉娟;潘珊珊;;短期和長期運(yùn)動預(yù)適應(yīng)對大鼠血液和心臟降鈣素基因相關(guān)肽的影響[J];體育科學(xué);2010年05期

2 蔡科;孫雨;;運(yùn)動預(yù)適應(yīng)與心肌保護(hù)研究進(jìn)展[J];當(dāng)代體育科技;2014年14期

3 申毓軍;潘珊珊;;運(yùn)動預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)效應(yīng)與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究現(xiàn)狀和展望[J];上海體育學(xué)院學(xué)報;2010年06期

4 代志軍;馬延超;;運(yùn)動預(yù)適應(yīng)對C57BL/6小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的預(yù)防作用及其機(jī)制分析[J];體育學(xué)刊;2014年03期

5 朱萍;郭維;;運(yùn)動預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J];浙江體育科學(xué);2013年04期

6 馬治云;潘珊珊;申毓軍;郝U,

本文編號:648286


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