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Micro-RNA在腫節(jié)風多糖促進骨骼肌損傷及修復過程中的作用和機制研究

發(fā)布時間:2023-04-01 10:11
  研究目的:骨骼肌損傷是運動損傷中常見的損傷,關(guān)于其治療一直是一個研究熱點。本研究通過離心運動復制大鼠骨骼肌損傷模型,觀察腫節(jié)風多糖對大鼠骨骼肌愈合過程中micro-RNA、炎癥因子、超微結(jié)構(gòu)的變化,探討腫節(jié)風多糖在骨骼肌運動損傷愈合中的作用及可能機制。研究方法:選用24只8周齡Wistar健康雄性大鼠,按照體重隨機分為4組,每組6只。分組:安靜對照組(A)、離心損傷組(B)、自然恢復組(C)、腫節(jié)風干預組(D)。通過大強度離心運動建立運動損傷模型,用時四周,每周運動時間、速度不斷遞增。造模成功后,再進行為期一周的灌藥及自然恢復。用戊巴比妥鈉進行麻醉,腹腔注射。腹主動脈取血,離心得到血清后置于超低溫冰箱保存;迅速取少量比目魚肌,放入多聚甲醛中進行固定;取比目魚肌,如米粒大小快速投入3%的戊二醛固定液中固定;再取比目魚肌,快速放入EP管錫紙包裹置于超低溫冰箱等待勻漿。(1)血清CK、LDH、MDA、T-AOC采用比色法進行檢測。(2)骨骼肌中的miR-155-5p、miR-133a-5p、SOCS1m RNA、IL-1βm RNA采用RT-PCR法檢測。(3)骨骼肌中SOCS1蛋白表達水平...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略詞表(Abbreviations)
1.緒論
    1.1 選題依據(jù)
    1.2 研究意義
    1.3 研究設(shè)計
2.文獻綜述
    2.1 骨骼肌損傷
        2.1.1 骨骼肌損傷概述
        2.1.2 骨骼肌損傷的分類
        2.1.3 骨骼肌損傷機制的研究進展
        2.1.4 離心運動對骨骼肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響
    2.2 骨骼肌損傷的治療研究進展
        2.2.1 骨骼肌損傷修復的相關(guān)方法
        2.2.2 肌衛(wèi)星細胞對骨骼肌損傷后產(chǎn)生的影響
    2.3 MicroRNA在骨骼肌損傷后修復中與炎癥的關(guān)系
        2.3.1 MiR-155在骨骼肌損傷后修復中與炎癥的關(guān)系
        2.3.2 MiR-223在骨骼肌損傷后修復中與炎癥的關(guān)系
        2.3.3 MiR-133在骨骼肌損傷后修復中與炎癥的關(guān)系
    2.4 中藥通過調(diào)節(jié)Micro RNAs對機體炎癥的影響
    2.5 腫節(jié)風的藥理作用研究
        2.5.1 腫節(jié)風的抑菌與抗炎作用
        2.5.2 腫節(jié)風的抗病毒作用
        2.5.3 腫節(jié)風的抗腫瘤作用
        2.5.4 腫節(jié)風的保肝作用
        2.5.5 腫節(jié)風抑制血小板的作用
    2.6 腫節(jié)風多糖促進骨骼肌損傷后修復的可能機制
        2.6.1 腫節(jié)風多糖對骨骼肌、血液相關(guān)生化指標的影響
        2.6.2 腫節(jié)風多糖對巨噬細胞的免疫調(diào)節(jié)作用
3.研究內(nèi)容與方法
    3.1 實驗對象及分組
        3.1.1 實驗對象
        3.1.2 動物分組
    3.2 動物實驗模型
        3.2.1 離心運動損傷實驗模型
        3.2.2 損傷及損傷后恢復處理
        3.2.3 大鼠樣本提取
    3.3 實驗儀器、試劑及方法
        3.3.1 實驗儀器
        3.3.2 實驗試劑
        3.3.3 制作石蠟組織切片
        3.3.4 石蠟切片免疫熒光實驗
        3.3.5 石蠟切片免疫組化實驗
        3.3.6 大鼠血清CK、LDH、MDA與 T-AOC變化的檢測
        3.3.7 大鼠骨骼肌免疫印跡實驗
        3.3.8 RT-PCR實驗
        3.3.9 大鼠骨骼肌透射電鏡實驗
    3.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
4 研究結(jié)果
    4.1 不同組別大鼠血液CK、LDH水平比較
    4.2 不同組別大鼠血液MDA、T-AOC水平的比較
    4.3 不同組別大鼠骨骼肌microRNA-155-5p、microRNA-133a-5p表達水平的結(jié)果
    4.4 不同組別大鼠骨骼肌SOCS1m RNA表達水平的比較
    4.5 不同組別大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表達水平(免疫印跡)的比較
    4.6 不同組別大鼠骨骼肌SOCS1蛋白表達水平(免疫組化)的比較
    4.7 不同組別大鼠骨骼肌IL-1βm RNA表達水平比較
    4.8 不同組別大鼠骨骼肌Pax7蛋白表達水平(免疫熒光)的比較
    4.9 不同組別大鼠骨骼肌電鏡的觀察結(jié)果
5 討論與分析
    5.1 離心運動骨骼肌損傷模型的建立
    5.2 腫節(jié)風多糖對大鼠血清中CK、LDH的影響
    5.3 腫節(jié)風多糖對大鼠血清中的MDA、T-AOC的影響
    5.4 腫節(jié)風多糖對運動損傷大鼠骨骼肌microRNA-155-5p/SOCS1/IL-1β信號通路的影響
    5.5 腫節(jié)風多糖對運動損傷大鼠Pax7蛋白表達的影響
    5.6 腫節(jié)風多糖對大鼠骨骼肌纖維電鏡結(jié)構(gòu)的影響
6 研究結(jié)論
參考文獻
致謝
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本文編號:3776951

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