【摘要】：目的研究大頭金蠅(Chrysomya megacephala)卵不同發(fā)育時間的形態(tài)變化和基因表達差異規(guī)律。方法從大頭金蠅成蟲產完卵后,取出卵塊,記時為0 h,每隔2 h取卵10枚,直至有幼蟲孵出,分別用體視顯微鏡和掃描電鏡觀察其不同發(fā)育時間的形態(tài)學變化。提取0、2、4、6和8 h等5個發(fā)育時間點的蠅卵RNA,應用RT-PCR比較循環(huán)閾值(threshold cycle,CT值)法測定bicoid、slalom和幾丁質合成酶(chitin synthase)基因相對表達水平,SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對CT值及時間進行擬合直線方程、等比級數(shù)曲線方程和指數(shù)方程分析。結果體視顯微鏡下觀察,大頭金蠅卵產后0~4h形態(tài)學變化不明顯,6h有體節(jié)形成,8 h開始出現(xiàn)皺縮,9 h有幼蟲孵出;掃描電鏡下觀察,卵產后0~4 h時變化不明顯,卵孔一端略向外突出,卵孔周圍光滑,6 h后卵孔一端向內凹陷,卵孔周圍有不規(guī)則突起形成,8 h時凹陷明顯,9 h已發(fā)育為幼蟲。大頭金蠅卵在不同發(fā)育時間bicoid、slalom和chitin synthase等3個基因的相對表達水平隨著時間變化呈一定的規(guī)律變化,相關回歸方程式3個基因CT值的差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論體視顯微鏡和掃描電鏡下大頭金蠅卵形態(tài)結構隨時間改變而發(fā)生變化。大頭金蠅卵不同發(fā)育時間的bicoid、slalom和chitin synthase基因表達水平有差異。
[Abstract]:Objective to study the morphological changes and gene expression of (Chrysomya megacephala) eggs in Drosophila macrocephala. Methods the eggs were taken out from adults of Drosophila macrocephala at 0 h and 10 eggs were taken out every 2 hours until the larvae hatched. The morphological changes of the eggs at different developmental times were observed by stereomicroscopy and scanning electron microscope. The relative expression levels of bicoid,slalom and chitin synthase (chitin synthase) gene were determined by RT-PCR comparative circulation threshold (threshold cycle,CT) method. The CT value and time were fitted by SPSS19.0 software, and the linear equation, the equal-ratio series curve equation and the exponential equation were analyzed. Results under stereoscopic microscope, the morphological changes were not obvious at 0h, 6h, 8h, and 9h, respectively. Under scanning electron microscope, the changes were not obvious at 0h postpartum, the one end of egg foramina was slightly protruded out, and the circumference of egg foramen was smooth. After 6 h, one end of egg foramen was concave inward, irregular protuberance formed around egg foramen, and obvious depression was observed at 8 h. The larva has developed into larva in 9 h. The relative expression level of three genes (bicoid,slalom and chitin synthase) in the egg of Drosophila macrocephala changed regularly with time, and the CT values of the three genes in the regression equation were significantly different (P0.05). Conclusion the morphological structure of Drosophila macrocephala eggs changed with time under stereoscopic microscope and scanning electron microscope. The expression levels of bicoid,slalom and chitin synthase genes in Drosophila macrocephala eggs at different developmental times were different.
【作者單位】： 貴州省貴陽醫(yī)學院法醫(yī)學系/法醫(yī)司法鑒定中心;貴州省安順市公安局刑偵支隊;
【基金】：2013年貴州省高校工程技術研究中心項目(黔科合KY字[2013]114號) 2012年貴州省教育廳產學研基地項目(黔教合KY字[2012]031號) 貴州省衛(wèi)生廳科學技術基金項目(WT2013-1) 貴陽醫(yī)學院院基金項目(院基金合同字第021號)~~
【分類號】：D919

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本文編號：2425148