本文關(guān)鍵詞：溫腎健脾法對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織IFN-γ、TGF-β1、NOD2、SIGIRR表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:1.潰瘍性結(jié)腸炎的病因病機較為復(fù)雜,其證候類型繁多,諸多醫(yī)家采用辨證論治進行治療,臨床上取得了較好療效。但其證候類型和治法過于分散,因此有效的治法和方藥規(guī)律探討不夠深入,臨床推廣受限。研究采用頻數(shù)分析的方法,對近年來關(guān)于潰瘍性結(jié)腸炎的病機和治法進行歸納分析,探討潰瘍性結(jié)腸炎的常見病機和治法,為臨床選方及深入研究提供文獻學(xué)依據(jù)。2.四神丸是臨床報道治療脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎的有效方,但其治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用機制不明。研究通過觀察四神丸對脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠血清及結(jié)腸IFN-γ、TGF-β1因子的含量及結(jié)腸組織NOD2、SIGIRR基因和蛋白表達的影響,探討四神丸治療脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎的分子機制,為該方的進一步推廣應(yīng)用和開發(fā)提供實驗依據(jù)。方法:采用番瀉葉灌胃+氫化可的松腹腔注射[1]+TNBS/乙醇混懸液灌腸復(fù)制脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型。從大鼠的一般狀態(tài)、結(jié)腸損傷情況、病理學(xué)改變等對模型進行評價。實驗大鼠隨機分為空白組,模型組,SASP組,四神丸低、中、高劑量組。SASP組按0.36g/kg/d的生藥劑量灌胃。四神丸低、中、高劑量組分別按生藥2.5、5、10g/kg/d的劑量灌胃。空白組、模型組采用等體積蒸餾水灌胃,連續(xù)治療21d。采用ELISA法檢測大鼠組織及血清中IFN-γ、TGF-β1因子含量的變化;采用RT-qPCR法和Western Blot法檢測大鼠結(jié)腸NOD2、SIGIRR基因和蛋白表達的變化。探討IFN-γ、TGF-β1、NOD2、SIGIRR的表達變化及四神丸的干預(yù)作用。結(jié)果:1.一般狀態(tài):空白組大鼠毛發(fā)干凈順滑,精神尚佳,飲食規(guī)律,大便正常,在造模與治療期間無明顯變化。模型組大鼠在造模完成后,外觀來看,出現(xiàn)毛發(fā)污穢,精神不佳,嗜臥不活躍,大便質(zhì)稀,爪甲顏色較淡,尾巴變涼,弓背倦怠,喜扎堆,飲食、飲水量顯著下降等現(xiàn)象。因機體自身存在一定的修復(fù)周期,造模后第7天,病癥最為嚴(yán)重,第14天開始有一定的改善,而第21天改善較為明顯。但相比其他各治療組,修復(fù)效果不佳。通過一段時間內(nèi)不同藥物及不同劑量的治療,各組大鼠都有了不同層次的修復(fù)。sasp組大鼠皮毛略有潔凈,靈活度也略有恢復(fù),精神較正常,活動尚靈敏,飲食尚可,大便基本正常,個別有稀便現(xiàn)象。四神丸組大鼠皮毛光澤,反應(yīng)靈敏,精神活動可,飲食接近正常,大便呈顆粒狀。其中,中劑量組恢復(fù)最好,基本與空白組無異。2.大體形態(tài):模型組大鼠結(jié)腸黏膜可見明顯的充血、水腫、潰瘍,腸壁變厚、腸道縮短等,證實模型復(fù)制成功(p0.01)。經(jīng)過3種劑量的四神丸和sasp治療后,大鼠結(jié)腸黏膜損傷情況均有改善,但各組具體的修復(fù)情況不全相同。其中,sasp組、四神丸中、高劑量組中的大鼠黏膜僅存在少量的充血水腫,中劑量組損傷基本恢復(fù)至正常形態(tài)。四神丸組、sasp組與模型對照組對比,結(jié)腸損傷評分均降低(p0.01)。3.病理改變:空白組結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)清晰,粘膜完整,無潰瘍、炎癥等形成,未見明顯異常;模型組結(jié)腸結(jié)構(gòu)不清晰,被大量炎癥細胞浸潤,深達肌層,潰瘍形成,結(jié)腸全層增厚;sasp組、中藥低劑量組、中藥高劑量組上皮有不同程度的恢復(fù),肌層也略有修復(fù),但仍有斷裂存在,結(jié)腸仍存在少量炎癥細胞;中藥中劑量組結(jié)腸結(jié)構(gòu)相對完整、清晰,已接近正常組織結(jié)構(gòu)。4.elisa法檢測ifn-γ、tgf-β1含量:與空白組比較,模型組大鼠ifn-γ的表達不論在組織還是血清中都升高(p0.01),同時,tgf-β1的表達下降(p0.01)。與模型組比較,各治療組大鼠組織及血清中ifn-γ的含量降低(p0.01,p0.05),而tgf-β1含量升高(p0.01,p0.05)。5.rt-qpcr法檢測nod2、sigirrmrna的表達:與空白組比較,模型組大鼠的nod2mrna基因的表達上升(p0.01),此外,sigirrmrna的基因表達量降低(p0.01);與模型組比較,治療組nod2mrna的表達降低(p0.05),而sigirrmrna的表達升高(p0.01,p0.05)。6.westernblot法檢測nod2、sigirr的表達:相比空白組,nod2在模型組大鼠中的蛋白表達顯著增高(p0.01),相反,sigirr在該組大鼠的表達降低(p0.01);與模型組比較,治療組大鼠結(jié)腸的nod2的表達降低(p0.01),而sigirr的表達升高(p0.05)。結(jié)論:1.番瀉葉灌胃+氫化可的松注射液腹腔注射+2、4、6-三硝基苯磺酸(tnbs)/乙醇法灌腸法能成功的復(fù)制脾腎陽虛型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型。2.脾腎陽虛是UC重要且常見的證型,溫腎健脾法是治療UC的重要治法。3.大鼠結(jié)腸組織形態(tài)的肉眼觀察與病理學(xué)檢測其結(jié)果表明:四神丸低、中、高劑量均對病變結(jié)腸黏膜組織有不同程度的修復(fù)作用。4.四神丸使?jié)冃越Y(jié)腸炎模型大鼠血清及結(jié)腸中促炎因子IFN-γ、NOD2等表達降低,抑炎因子TGF-β1、SIGIRR等表達上升,其作用機制可能是通過下調(diào)促炎因子以及上調(diào)抑炎因子使免疫調(diào)節(jié)趨于平衡,促進粘膜修復(fù)與潰瘍愈合,從而達到治療潰瘍性結(jié)腸炎的目的。
【關(guān)鍵詞】：潰瘍性結(jié)腸炎 脾腎陽虛 四神丸
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 縮略詞表12-13
• 前言13-15
• 1. 文獻研究15-18
• 1.1 資料來源15
• 1.2 檢索方法15
• 1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)15
• 1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)15-16
• 1.5 證型名稱的規(guī)范16
• 1.6 統(tǒng)計方法16
• 1.7 結(jié)果16-18
• 2. 實驗研究18-35
• 2.1 實驗材料19-20
• 2.2 實驗條件20-21
• 2.3 藥物的制備21
• 2.4 實驗方法21-23
• 2.5 檢測方法23-28
• 2.6 統(tǒng)計方法28
• 2.7 實驗結(jié)果28-35
• 3. 討論35-41
• 3.1 脾腎陽虛型UC模型的建立35-36
• 3.2 四神丸的選用36-37
• 3.3 溫腎健脾法對UC模型大鼠IFN-γ、TGF-β1、NOD2、SIGIRR的影響37-41
• 結(jié)語41-42
• 參考文獻42-45
• 附錄45-48
• 文獻綜述48-66
• 1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對UC的研究進展48-56
• 1.1 UC病名的探討48
• 1.2 UC病因、病機的研究進展48-54
• 1.3 UC治療的進展54-56
• 2. 中醫(yī)學(xué)對UC的認識56-62
• 2.1 UC的中醫(yī)病名56
• 2.2 中醫(yī)對UC病因的認識56-57
• 2.3 從“脾腎相關(guān)角度”探討脾腎陽虛這一病機57-59
• 2.4 UC的辨證論治59-62
• 參考文獻62-66
• 致謝66-67
• 在校期間研究成果67

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳強;劉明暉;孫然;晉學(xué)飛;王璞;;白頭翁提取液對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠血清TNF-α、IL-10的影響[J];長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2015年05期

2 王q邛

本文編號：368795