目的探索谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2(EAAT2)在電針預(yù)處理減輕小鼠腦缺血中的作用。方法 32只雄性C57BL/6小鼠,隨機(jī)法分4組(n=8):全腦缺血再灌注(BCCAO)組、電針預(yù)處理(EA)+BCCAO組、EAAT2抑制劑二氫卡因酸鹽(DHK)+EA+BCCAO組、EAAT2激動劑頭孢曲松鈉(CXT)+BCCAO組。BCCAO組僅結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈,DHK+EA+BCCAO組和EA+BCCAO組行電針預(yù)處理,30 min/次,1次/d,連續(xù)5 d,其中DHK+EA+BCCAO組缺血前1 h側(cè)腦室注射DHK 200μg/kg。CXT+BCCAO組腹腔注射頭孢曲松鈉600 mg/kg,1次/d,連續(xù)5 d。預(yù)處理后24 h全腦缺血20 min,神經(jīng)行為學(xué)評分和HE染色計算海馬CA1區(qū)凋亡神經(jīng)元。Western blot法檢測EAAT2蛋白表達(dá),免疫熒光雙標(biāo)染色檢測EAAT2和星形膠質(zhì)細(xì)胞活化標(biāo)志物(GFAP)。結(jié)果與BCCAO組比較,EA+BCCAO組和CXT+BCCAO組行為學(xué)評分升高,凋亡神經(jīng)元數(shù)目減少(P0.05);DHK+EA+BCCAO組與EA+BCCAO組比較,神經(jīng)行為學(xué)評分降低,凋亡神經(jīng)元數(shù)目增多(P0.05)。Western blot結(jié)果:與BCCAO組比較,EA+BCCAO組和CXT+BCCAO組EAAT2蛋白表達(dá)水平升高(P0.05);DHK+EA+BCCAO組與EA+BCCAO組比較,EAAT2蛋白表達(dá)水平下降(P0.05)。免疫熒光雙標(biāo)染色:與BCCAO組比較,EA+BCCAO組和CXT+BCCAO組EAAT2和GFAP蛋白表達(dá)增加(P0.05);DHK+EA+BCCAO組與EA+BCCAO組比較,EAAT2和GFAP蛋白表達(dá)降低(P0.05)。結(jié)論電針預(yù)處理通過調(diào)節(jié)星形膠質(zhì)細(xì)胞膜上EAAT2產(chǎn)生腦缺血耐受作用。
【部分圖文】：

與BCCAO組(36.1±3.0)個比較,EA+BCCAO組(15.2±2.0)個和CXT+BCCAO組(12.5±2.0)個凋亡神經(jīng)元數(shù)目減少(t=19.96,t=24.31,P<0.05);與EA+BCCAO組比較,DHK+EA+BCCAO組(38.0±1.0)個凋亡神經(jīng)元數(shù)目增加(t=18.22,P<0.05)。見圖1。2.3 電針預(yù)處理對全腦缺血-再灌注小鼠海馬CA1區(qū)EAAT2表達(dá)的影響

Western blot結(jié)果:與BCCAO組比較,EA+BCCAO組和CXT+BCCAO組EAAT2蛋白表達(dá)增加(t=7.028,t=4.243,P<0.05);與EA+BCCAO組比較,DHK+EA+BCCAO組EAAT2蛋白表達(dá)降低(t=4.692,P<0.05)。見圖2A。免疫熒光雙標(biāo)染色結(jié)果:BCCAO組EAAT2蛋白表達(dá)較少,EA+BCCAO組和CXT+BCCAO組EAAT2表達(dá)增加,而DHK+EA+BCCAO組EAAT2表達(dá)減少。GFAP在EA+BCCAO和CXT+BCCAO組蛋白表達(dá)增加。EAAT2-GFAP熒光染色在EA+BCCAO和CXT+BCCAO組增強(qiáng),說明兩者蛋白表達(dá)增加。見圖2B。3 討論
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