【摘要】：目的:佛甲草(Sedum lineare Thunb)是為景天科(Crassulaceae)佛甲草屬多年生草本植物,是一種常用的民族民間用藥。本文旨在對佛甲草全草進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分分離與鑒定,并對其進(jìn)行抗肺癌活性的研究。方法:1、用液-液萃取、硅膠柱色譜、C18反相柱色譜、SephadexTMLH-20凝膠柱色譜、快速制備色譜及半制備HPLC等方法對佛甲草總提物進(jìn)行系統(tǒng)的分離、純化,用UV、ESI-MS、NMR等數(shù)據(jù)對所分離的單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。2、用CCK-8法檢測佛甲草總提物及各萃取部位對非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的增殖抑制作用,計算半數(shù)抑制濃度IC50值,篩選出抗肺癌活性較好的萃取部位進(jìn)行單體化合物的分離。3、用CCK-8法檢測各單體化合物對非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞的增殖抑制活性,計算半數(shù)抑制濃度IC50值,比較各單體化合物與陽性對照藥人參皂苷Rg3對A549細(xì)胞增殖的抑制作用。4、通過劃痕實驗檢測各單體化合物對A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)移影響。比較各單體化合物與空白對照組對A549細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響。結(jié)果:1、從佛甲草80%乙醇提取物中分離純化得到8個單體化合物,并根據(jù)其理化常數(shù)及波普解析對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。鑒定出其分別是化合物1芹菜素(Apigenin)、化合物2 3-0-甲基槲皮素(3-O-Methylquercetin)、化合物3木犀草素-4'-O-β-D-(6"-E-咖啡酰)-吡喃葡萄糖苷(Luteolin 4'-O-β-D-(6"-E-caffeoyl)-glucopyranoside)、化合物4槲皮素(Quercetin)、化合物5 木犀草素(Luteolin)、化合物6木犀草素-4'-葡萄糖苷(Luteolin-4'-glucoside)、化合物7繡線菊苷(Spiraea)、化合物8腺苷(Adenosine),其中化合物1、2、3、6、7、8是從該植物中首次分離得到的。2、佛甲草總提物對A549細(xì)胞具有較強的抑制作用,乙酸乙酯部位、正丁醇部位能夠很強的抑制A549細(xì)胞增殖的活性,半數(shù)抑制率分別是78.23μg/mL、89.45μg/mL,與對照組相比,具有非常顯著地差異。而石油醚部位、二氯甲烷部位、水部位表現(xiàn)出來一定的抑制活性,但半數(shù)抑制濃度已經(jīng)超過500μg/mL,抑制活性相對較弱。3、化合物6對A549細(xì)胞有一定的抑制作用,且與給藥劑量成相關(guān)性,隨著藥物濃度的增加,其抑制率逐漸增大,半數(shù)抑制濃度為70.47 μmol/L�；衔�4在濃度高于31.25 μmol/L時,抑制率基本不變�；衔�5、化合物7、化合物8當(dāng)濃度達(dá)到250 μmol/L時,其抑制率沒達(dá)到50%,且隨著藥物濃度的增加,這四種化合物的抑制率變化不大,與陽性對照Rg3相比,抑制作用相對較弱。4、劃痕實驗表明,六種單體化合物對A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)移具有一定的抑制作用。其中化合物6的劃痕面積改變率最低為3.16%,說明化合物6對A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)移具有較強的抑制作用。與空白對照組相比,化合物4、化合物7的劃痕面積改變率相對較小,化合物8的劃痕面積改變率較大,表明化合物4、化合物7能較強的抑制A549細(xì)胞的遷移,化合物8的作用則相對較弱�；衔�4、化合物7能夠較強的抑制A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)移,而化合物5、化合物8的抑制作用較弱。結(jié)論:從佛甲草提取物中分離純化得到8個單體化合物,鑒定出其分別是化合物1芹菜素(Apigenin)、化合物2 3-O-甲基槲皮素(3-O-Methylquercetin)、化合物3木犀草素-4'-O-β-D-(6"-E-咖啡酰)-吡喃葡萄糖苷(Luteolin 4'-O-β-D-(6"-E-caffeoyl)-glucopyranoside)、化合物4槲皮素(Quercetin)、化合物5木犀草素(Luteolin)、化合物6木犀草素-4'-葡萄糖苷(Luteolin-4'-glucoside)、化合物7繡線菊苷(Spiraea)、化合物8腺苷(Adenosine),其中化合物1、2、3、6、7、8是從該植物中首次分離得到的。佛甲草各萃取部位中,乙酸乙酯部位和正丁醇部位對A549細(xì)胞的抑制作用較強,推測佛甲草抗肺癌活性成分可能集中在這兩個萃取部位�；衔�6對A549細(xì)胞有一定的抑制活性,其抑制率與給藥濃度呈正相關(guān),而化物4、化合物5、化合物7、化合物8的抗肺癌活性則相對較弱。本文初步研究了佛甲草各部位及其化學(xué)成分對A549細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移作用的影響,為進(jìn)一步研究佛甲草治療肺癌及其他腫瘤提供一定實驗依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：中央民族大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R29
【圖文】：

圖２．１－１佛f癲葑芴崳锏姆擲脲義希疲椋紓澹玻保卞澹櫻澹穡幔潁幔簦椋錚鑠澹錚駑澹簦錚簦幔戾澹澹簦潁幔悖翦澹錚駑澹櫻澹洌酰礤義希撤鵂撞莼С煞值姆擲胗氪炕義轄鞲黽圓課瘓粒擔(dān)矗瓜赴鮒騁種蘋钚緣納稈�，选择二氯甲蜋澧胰~〈頰餿霾課喚謝С煞值慕徊椒擲氪炕�。辶x隙燃淄椴課瘓杞海ǎ保埃埃玻埃澳浚┲追擲�，硅胶与样屏P保海卑柩�，石醋（�(dān)埃海停海保┨荻認(rèn)賜眩ü〔悴鬮觶ǎ裕瑁椋鑠澹蹋幔澹蟈澹茫瑁潁錚恚幔簦錚紓潁幔穡瑁�，邋ＴＬＣ）分并相同的流粪崿得缔I甯霾糠鄭疲潁歟疲潁擔(dān)∪〉諶糠鄭疲潁辰泄杞海ǎ玻埃埃常捌追擲耄兔眩閡宜嵋陰ィǎ保玻賀擼矗海保┨荻認(rèn)賜�，通过ＴＬＣ和高效液相色ｅ}媯錚潁恚幔睿悖邋澹蹋椋瘢酰椋溴澹茫瑁潁錚恚幔簦錚紓潁幔穡瑁�，邋｝x校蹋茫┓治黿峁喜⑾嗤牧鞣鄭玫劍潁常保疲潁常擔(dān)疲潁常從冒脛票福齲校蹋蒙字寫炕�，流动限\狀跡ǎ保海保

本文編號：2802170