【摘要】：目的:通過建立脊神經(jīng)結(jié)扎(Spinal nerve ligation,SNL)大鼠模型模擬神經(jīng)病理性疼痛,觀察樞經(jīng)推拿干預(yù)后大鼠的機(jī)械痛閾和熱痛閾變化以明確樞經(jīng)推拿鎮(zhèn)痛效果。檢測(cè)干預(yù)后大鼠背根神經(jīng)節(jié)的MiRNA-146a以及TLR4信號(hào)通路表達(dá)水平,以及上調(diào)MiRNA-146a后TLR4信號(hào)通路表達(dá)水平,探索樞經(jīng)推拿鎮(zhèn)痛機(jī)制。本次研究從分子生物學(xué)層面闡述樞經(jīng)推拿鎮(zhèn)痛機(jī)制,以期為樞經(jīng)推拿鎮(zhèn)痛提供科學(xué)理論依據(jù)。方法:對(duì)56只雌性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組、MiRNA-146a過表達(dá)組和陰性對(duì)照組(NC組),每組各8只。MiRNA-146a過表達(dá)組和陰性對(duì)照組大鼠鞘內(nèi)置管成功后與模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組一起建立SNL大鼠模型,假手術(shù)組暴露脊神經(jīng)不予結(jié)扎,空白對(duì)照組不作任何處理。建模成功后MiRNA-146a過表達(dá)組鞘內(nèi)給予10μl可以靶向上調(diào)MiRNA-146a表達(dá)水平的慢病毒agoMiRNA-146a;NC組則給予等劑量的陰性對(duì)照試劑agoMiRNA-146a negative control。樞經(jīng)推拿組采用按摩推拿手法模擬儀每天推拿一次,連續(xù)干預(yù)14d;假推拿組大鼠每天采用布袋束縛并輕輕撫摸大鼠雙后肢,連續(xù)干預(yù)14d�？瞻讓�(duì)照組、假手術(shù)組和模型組不進(jìn)行干預(yù),觀察14d。在造模前及造模后的1,3,7,14天檢測(cè)各組大鼠的熱痛閾值和機(jī)械痛閾值。于造模后第14天檢測(cè)空白對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組大鼠的MiRNA-146a、TLR4、IRAK1、TRAF6、TNF-α和IL-6表達(dá)水平,檢測(cè)MiRNA-146a過表達(dá)組和NC組MiRNA-146a、IRAK1、TRAF6表達(dá)水平。結(jié)果:1.大鼠體重變化:各組大鼠在造模前及造模后第1、3天體重差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。造模第7、14天,空白對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),空白對(duì)照組、假手術(shù)組大鼠體重與模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組大鼠體重比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組與假推拿組大鼠體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),樞經(jīng)推拿組與模型組、假推拿組大鼠體重比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),MiRNA-146a過表達(dá)組和NC組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值變化:各組大鼠在造模前的機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),造模后第1、3、7、14天,空白對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組與假推拿組大鼠機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),空白對(duì)照組、假手術(shù)組與模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組大鼠之間機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。造模后第1、3天,樞經(jīng)推拿組大鼠與模型組、假推拿組大鼠之間機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),MiRNA-146a過表達(dá)組和NC組之間機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。造模后第7、14天,樞經(jīng)推拿組大鼠與模型組、假推拿組大鼠之間機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),MiRNA-146a過表達(dá)組和NC組之間機(jī)械痛閾值和熱痛閾值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.QPCR結(jié)果:造模后第14天,空白對(duì)照組與假手術(shù)組的MiRNA-146a、TLR4、IRAK1、TRAF6表達(dá)水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);模型組和假推拿組的MiRNA-146a、TLR4、IRAK1、TRAF6表達(dá)水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);空白對(duì)照組、假手術(shù)組MiRNA-146a表達(dá)水平高于模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組(P0.05);空白對(duì)照組、假手術(shù)組TLR4、IRAK1、TRAF6表達(dá)水平低于模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組(P0.05);模型組、假推拿組MiRNA-146a表達(dá)水平低于樞經(jīng)推拿組(P0.05);模型組、假推拿組TLR4、IRAK1、TRAF6表達(dá)水平高于樞經(jīng)推拿組(P0.05);MiRNA-146a過表達(dá)組MiRNA-146a表達(dá)水平高于NC組(P0.05);MiRNA-146a過表達(dá)組IRAK1和TRAF6表達(dá)水平低于NC組(P0.05)。4.ELISA結(jié)果:造模后第14天,空白對(duì)照組與假手術(shù)組TNF-α和IL-6表達(dá)水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);模型組和假推拿組TNF-α和IL-6表達(dá)水平相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);空白對(duì)照組、假手術(shù)組TNF-α和IL-6表達(dá)水平低于模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組(P0.05);模型組、假推拿組TNF-α和IL-6表達(dá)水平高于樞經(jīng)推拿組(P0.05)。結(jié)論:上調(diào)MiRNA-146a的表達(dá)進(jìn)而下調(diào)TLR4信號(hào)通路的活化情況,減少炎癥因子的釋放,可能是樞經(jīng)推拿治療神經(jīng)病理性疼痛的起效機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R244.1
【圖文】：

圖 3-1 各組大鼠術(shù)前、術(shù)后 1d、3d、7d、14d 體重比較Fig.3-1 Comparison of weight before and after SNL 1d， 3d， 7d and 14d in each group of rats3.1.2 各組大鼠機(jī)械痛閾（PWMT）的變化各組大鼠在造模前的機(jī)械痛閾值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示各組大鼠造模前的機(jī)械痛閾值相當(dāng)，具有可比性。造模后第 1、3、7、14 天，空白對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠機(jī)械痛閾值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示空白對(duì)照組和假手術(shù)組大鼠機(jī)械痛閾值相當(dāng)；模型組與假推拿組大鼠機(jī)械痛閾值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示模型組與假推拿組大鼠機(jī)械痛閾值相當(dāng)；空白對(duì)照組、假手術(shù)組與模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組大鼠之間機(jī)械痛閾值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（*P＜0.05），提示造模導(dǎo)致模型組、假推拿組、樞經(jīng)推拿組大鼠的機(jī)械痛閾低于空白對(duì)照組、假手術(shù)組。造模

于 MiRNA-146a 調(diào)控 TLR4 信號(hào)通路探討樞經(jīng)推拿對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛機(jī)制 2016 級(jí)碩士學(xué)位論文表 3-2 各組大鼠機(jī)械痛閾值變化比較（ ，g，n=8）組別 術(shù)前 術(shù)后 1 天 術(shù)后 3 天 術(shù)后 7 天 術(shù)后 14 天空白對(duì)照組 55.75±5.87 54.33±6.06 55.29±6.70 51.04±10.84 52.46±11.22假手術(shù)組 54.33±6.06 46.33±10.64 50.08±7.26 49.17±10.91 49.63±13.34模型組 52.92±5.86 38.33±7.14*35.00±8.74*22.33±2.77 #18.33±2.47 #假推拿組 53.88±6.66 39.25±6.03*35.96±9.43*24.25±6.03 #20.50±1.96 #樞經(jīng)推拿組 52.00±6.80 40.17±5.25*35.54±7.99*33.58±6.94 31.71±7.76 注：與空白對(duì)照組、假手術(shù)組比較，*P<0.05，與樞經(jīng)推拿組比較#P<0.05X ± s

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本文編號(hào)：2730364