【摘要】：目的:通過文獻研究及流行病學調查等方式探究非創(chuàng)傷性股骨頭壞死(non-traumatic osteonecrosis of femoral head,NONFH)患者中醫(yī)體質類型情況,深入分析該病中醫(yī)體質類型分布特點,獲得隴原地區(qū)NONFH高發(fā)中醫(yī)體質類型;同時結合生物芯片技術篩選出高發(fā)中醫(yī)體質類型NONFH患者血漿中特異性表達microRNA(miRNA),采用實時熒光定量PCR技術對結果進行驗證,并進一步對其生物信息學內容進行分析,尋找具有診斷價值的潛在分子生物學標志物,為后續(xù)NONFH的中藥調體干預及防治提供理論依據(jù)和治療靶點。方法:1.文獻研究:通過檢索PubMed、Cochrane、Embase、CNKI、Wanfang、VIP(重慶維普)和CBM(中國生物醫(yī)學文獻)這七大數(shù)據(jù)庫,全面收集自各數(shù)據(jù)庫創(chuàng)建至2018年8月24日間國內外發(fā)表與NONFH中醫(yī)體質類型分布有關的臨床研究(包括橫斷面研究、病例對照研究和隊列研究)文獻,深入分析NONFH中醫(yī)體質類型分布特點。2.臨床研究:通過對2016年8月~2018年5月于甘肅省中醫(yī)院骨科門診及隴中正骨樓住院部就診的符合納入排除標準的確診為NONFH的患者進行問卷調查,建立隴原地區(qū)NONFH中醫(yī)體質類型數(shù)據(jù)庫,分析隴原地區(qū)NONFH高發(fā)中醫(yī)體質類型及易罹原因。3.實驗研究:運用生物芯片技術篩選出隴原地區(qū)高發(fā)的血瘀質NONFH患者血漿中特異性表達miRNA,采用實時熒光定量PCR技術對結果進行驗證,并進一步對其生物信息學內容進行分析。結果:1.各數(shù)據(jù)庫共檢索到國內外發(fā)表與NONFH中醫(yī)體質類型分布有關的文獻340篇,根據(jù)納入排除標準,最終納入文獻5篇(均為中文文獻),研究均為橫斷面研究,共納入研究對象516例。在全國范圍內來看,痰濕質、陽虛質、濕熱質為NONFH患者分布前三的中醫(yī)體質類型,分別為23%[95%CI(11%~36%),Q=134.43,Z=3.68,P=0.000]、20%[95%CI(6%~33%),Q=88.25,Z=2.76,P=0.006]、15%[95%CI(12%~18%),Q=7.46,Z=9.51,P=0.000],差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05),但異質性較高。2.本次研究共納入NONFH病例112例,男性74例,女性38例,男女性別比例約為1.95:1。NONFH單一體質發(fā)病98例,兼夾體質發(fā)病14例。單一體質病例中以血瘀質(占32.65%)、痰濕質(占13.27%)、氣虛質(占12.24%)所占比例較高。氣虛主兼夾質與陽虛主兼夾質為兼夾體質中分布前兩位的中醫(yī)體質類型,分別為50.00%、21.43%。通過對兼夾體質數(shù)據(jù)進行相應合并后發(fā)現(xiàn):有四種中醫(yī)體質類型在NONFH患者中分布較多,其占比達到全部中醫(yī)體質類型的74.05%,分別是血瘀質、氣虛質、陽虛質及痰濕質,占比分別為34.35%、15.27%、12.98%、11.45%。3.has-miR-4270、hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p為血瘀質NONFH特異性表達miRNA,其中has-miR-4270表達上調,hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p表達下調。Real-time PCR結果表明:hsa-miR-365a-3p在NONFH組中的表達水平較正常組下調;血瘀質NONFH組中hsa-miR-365a-3p表達水平較非血瘀質NONFH組下調,這與miRNA芯片檢測結果基本一致。用三個在線數(shù)據(jù)庫(PITA、TargetScan、microRNAorg)對血瘀質NONFH特異性表達miRNA進行靶基因預測,結果顯示hsa-miR-365a-3p檢出交集靶基因11個,余未檢測出交集靶基因。GO分析結果顯示與生物學過程相關描述共65條,與分子功能相關及細胞組分相關各23條,共111條。進一步針對分子功能分析,發(fā)現(xiàn)血瘀質NONFH特異性表達miRNA主要與受體結合、蛋白與酶的活性有關。Pathway分析顯示,靶基因主要富集于軸突導向、Rap1、賴氨酸降解、Fc epsilon RI、甘油磷脂代謝、T細胞受體、血小板活化、成骨細胞分化等多個信號通路。結論:1.NONFH患者中醫(yī)體質類型具有一定分布特點,但不同地域的NONFH高發(fā)中醫(yī)體質類型及其分布特征,會受到飲食環(huán)境等諸多因素的影響。2.血瘀質、氣虛質、陽虛質、痰濕質為隴原地區(qū)NONFH易罹體質類型,血瘀質則為隴原地區(qū)NONFH最高發(fā)體質類型。3.血瘀質NONFH存在5條特異性表達miRNA,這些miRNA可能通過調控Rap1、賴氨酸降解、甘油磷脂代謝、血小板活化、成骨細胞分化、Ras、PI3K/Akt等信號通路參與NONFH的發(fā)生發(fā)展過程。
【學位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R274.9
【圖文】：

根據(jù)納排標準，最終納入 5 篇與 NONFH 中醫(yī)體質類型分布有關文獻[5-9]，過程和結果如圖1 所示。所有文獻均為中文文獻，研究均為橫斷面研究，共納入研究對象 516 例。表 2為納入研究的基本特征。圖 1 檢索流程與結果

圖5 NONFH患者病程分布圖者學歷情況結果（見圖6）顯示：學歷為小學及以下者40例，學歷為中學者54例，學歷為大專及以上者18例，依次占35.71%、48.21%、16.07%。生示：有1年以上吸煙史患者56例（占50.00%）、有1年以上飲酒史患者4）、喜飲茶患者36例（占32.14%）、喜食豆制品患者30例（占26.79%）

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本文編號：2727372