【摘要】：目的:通過(guò)文獻(xiàn)研究及流行病學(xué)調(diào)查等方式探究非創(chuàng)傷性股骨頭壞死(non-traumatic osteonecrosis of femoral head,NONFH)患者中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型情況,深入分析該病中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型分布特點(diǎn),獲得隴原地區(qū)NONFH高發(fā)中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型;同時(shí)結(jié)合生物芯片技術(shù)篩選出高發(fā)中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型NONFH患者血漿中特異性表達(dá)microRNA(miRNA),采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并進(jìn)一步對(duì)其生物信息學(xué)內(nèi)容進(jìn)行分析,尋找具有診斷價(jià)值的潛在分子生物學(xué)標(biāo)志物,為后續(xù)NONFH的中藥調(diào)體干預(yù)及防治提供理論依據(jù)和治療靶點(diǎn)。方法:1.文獻(xiàn)研究:通過(guò)檢索PubMed、Cochrane、Embase、CNKI、Wanfang、VIP(重慶維普)和CBM(中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn))這七大數(shù)據(jù)庫(kù),全面收集自各數(shù)據(jù)庫(kù)創(chuàng)建至2018年8月24日間國(guó)內(nèi)外發(fā)表與NONFH中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型分布有關(guān)的臨床研究(包括橫斷面研究、病例對(duì)照研究和隊(duì)列研究)文獻(xiàn),深入分析NONFH中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型分布特點(diǎn)。2.臨床研究:通過(guò)對(duì)2016年8月~2018年5月于甘肅省中醫(yī)院骨科門(mén)診及隴中正骨樓住院部就診的符合納入排除標(biāo)準(zhǔn)的確診為NONFH的患者進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查,建立隴原地區(qū)NONFH中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型數(shù)據(jù)庫(kù),分析隴原地區(qū)NONFH高發(fā)中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型及易罹原因。3.實(shí)驗(yàn)研究:運(yùn)用生物芯片技術(shù)篩選出隴原地區(qū)高發(fā)的血瘀質(zhì)NONFH患者血漿中特異性表達(dá)miRNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并進(jìn)一步對(duì)其生物信息學(xué)內(nèi)容進(jìn)行分析。結(jié)果:1.各數(shù)據(jù)庫(kù)共檢索到國(guó)內(nèi)外發(fā)表與NONFH中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型分布有關(guān)的文獻(xiàn)340篇,根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn),最終納入文獻(xiàn)5篇(均為中文文獻(xiàn)),研究均為橫斷面研究,共納入研究對(duì)象516例。在全國(guó)范圍內(nèi)來(lái)看,痰濕質(zhì)、陽(yáng)虛質(zhì)、濕熱質(zhì)為NONFH患者分布前三的中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型,分別為23%[95%CI(11%~36%),Q=134.43,Z=3.68,P=0.000]、20%[95%CI(6%~33%),Q=88.25,Z=2.76,P=0.006]、15%[95%CI(12%~18%),Q=7.46,Z=9.51,P=0.000],差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但異質(zhì)性較高。2.本次研究共納入NONFH病例112例,男性74例,女性38例,男女性別比例約為1.95:1。NONFH單一體質(zhì)發(fā)病98例,兼夾體質(zhì)發(fā)病14例。單一體質(zhì)病例中以血瘀質(zhì)(占32.65%)、痰濕質(zhì)(占13.27%)、氣虛質(zhì)(占12.24%)所占比例較高。氣虛主兼夾質(zhì)與陽(yáng)虛主兼夾質(zhì)為兼夾體質(zhì)中分布前兩位的中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型,分別為50.00%、21.43%。通過(guò)對(duì)兼夾體質(zhì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)合并后發(fā)現(xiàn):有四種中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型在NONFH患者中分布較多,其占比達(dá)到全部中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型的74.05%,分別是血瘀質(zhì)、氣虛質(zhì)、陽(yáng)虛質(zhì)及痰濕質(zhì),占比分別為34.35%、15.27%、12.98%、11.45%。3.has-miR-4270、hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p為血瘀質(zhì)NONFH特異性表達(dá)miRNA,其中has-miR-4270表達(dá)上調(diào),hsa-miR-129-1-3p、hsa-miR-365a-3p、hsa-miR-483-3p、hsa-miR-6731-3p表達(dá)下調(diào)。Real-time PCR結(jié)果表明:hsa-miR-365a-3p在NONFH組中的表達(dá)水平較正常組下調(diào);血瘀質(zhì)NONFH組中hsa-miR-365a-3p表達(dá)水平較非血瘀質(zhì)NONFH組下調(diào),這與miRNA芯片檢測(cè)結(jié)果基本一致。用三個(gè)在線數(shù)據(jù)庫(kù)(PITA、TargetScan、microRNAorg)對(duì)血瘀質(zhì)NONFH特異性表達(dá)miRNA進(jìn)行靶基因預(yù)測(cè),結(jié)果顯示hsa-miR-365a-3p檢出交集靶基因11個(gè),余未檢測(cè)出交集靶基因。GO分析結(jié)果顯示與生物學(xué)過(guò)程相關(guān)描述共65條,與分子功能相關(guān)及細(xì)胞組分相關(guān)各23條,共111條。進(jìn)一步針對(duì)分子功能分析,發(fā)現(xiàn)血瘀質(zhì)NONFH特異性表達(dá)miRNA主要與受體結(jié)合、蛋白與酶的活性有關(guān)。Pathway分析顯示,靶基因主要富集于軸突導(dǎo)向、Rap1、賴(lài)氨酸降解、Fc epsilon RI、甘油磷脂代謝、T細(xì)胞受體、血小板活化、成骨細(xì)胞分化等多個(gè)信號(hào)通路。結(jié)論:1.NONFH患者中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型具有一定分布特點(diǎn),但不同地域的NONFH高發(fā)中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型及其分布特征,會(huì)受到飲食環(huán)境等諸多因素的影響。2.血瘀質(zhì)、氣虛質(zhì)、陽(yáng)虛質(zhì)、痰濕質(zhì)為隴原地區(qū)NONFH易罹體質(zhì)類(lèi)型,血瘀質(zhì)則為隴原地區(qū)NONFH最高發(fā)體質(zhì)類(lèi)型。3.血瘀質(zhì)NONFH存在5條特異性表達(dá)miRNA,這些miRNA可能通過(guò)調(diào)控Rap1、賴(lài)氨酸降解、甘油磷脂代謝、血小板活化、成骨細(xì)胞分化、Ras、PI3K/Akt等信號(hào)通路參與NONFH的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R274.9
【圖文】：

根據(jù)納排標(biāo)準(zhǔn)，最終納入 5 篇與 NONFH 中醫(yī)體質(zhì)類(lèi)型分布有關(guān)文獻(xiàn)[5-9]，過(guò)程和結(jié)果如圖1 所示。所有文獻(xiàn)均為中文文獻(xiàn)，研究均為橫斷面研究，共納入研究對(duì)象 516 例。表 2為納入研究的基本特征。圖 1 檢索流程與結(jié)果

圖5 NONFH患者病程分布圖者學(xué)歷情況結(jié)果（見(jiàn)圖6）顯示：學(xué)歷為小學(xué)及以下者40例，學(xué)歷為中學(xué)者54例，學(xué)歷為大專(zhuān)及以上者18例，依次占35.71%、48.21%、16.07%。生示：有1年以上吸煙史患者56例（占50.00%）、有1年以上飲酒史患者4）、喜飲茶患者36例（占32.14%）、喜食豆制品患者30例（占26.79%）

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本文編號(hào)：2727372