【摘要】：目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立因動(dòng)脈粥樣硬化引發(fā)的輕度認(rèn)知障礙小鼠模型,檢測(cè)小鼠乙酰膽堿酯酶(Ach E)、乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(Ch AT)、白介素1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、β-淀粉樣蛋白(Aβ)等指標(biāo)的變化,探究針?biāo)幹委熌Ｐ托∈竽憠A能系統(tǒng)和炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)基于“心腦合病”理論探討動(dòng)脈粥樣硬化對(duì)認(rèn)知功能的影響及機(jī)制,旨在為臨床開(kāi)展因動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致的輕度認(rèn)知障礙的防治工作,提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo)。材料與方法:選取10只C57BL/6J小鼠給予普通小鼠飼料喂養(yǎng),作為空白對(duì)照組。選取40只Apo E-/-小鼠給予高脂飼料喂養(yǎng),作為模型對(duì)照組。喂養(yǎng)12周后,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)小鼠血脂水平,HE染色檢測(cè)小鼠動(dòng)脈病理形態(tài),水迷宮檢測(cè)小鼠認(rèn)知能力,其中定位航行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的學(xué)習(xí)能力,空間探索實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠的記憶能力。確定模型成功建立后,空白對(duì)照組小鼠仍作為空白組,模型對(duì)照組小鼠隨機(jī)分為模型組、中藥組、針刺組、針?biāo)幗M。中藥組給予二陳湯合桃紅四物湯灌胃治療,0.2m L/次,1次/d;針刺組選穴百會(huì)、關(guān)元、雙側(cè)豐隆,加以電針,留針15min,左右兩側(cè)交替進(jìn)行,1次/d;針?biāo)幗M同時(shí)給予中藥組和針刺組的治療方式;空白組和模型組給予同等程度的抓取與固定并給予蒸餾水灌胃,0.2m L/次,1次/d,連續(xù)治療28天。治療期間,按照各組小鼠既定的喂養(yǎng)方式,繼續(xù)喂養(yǎng)。治療結(jié)束后,采用Morris水迷宮檢測(cè)行為學(xué),采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)Ch AT、Ach E的表達(dá),采用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定IL-1β、TNF-α、Aβ的含量。結(jié)果:1.造模后,血脂水平檢測(cè)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠血清中TC水平、TG水平、LDL水平均顯著升高(P0.01),HDL水平顯著降低(P0.01)。2.造模后,HE染色結(jié)果表明:與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠的動(dòng)脈形成了較大斑塊。3.造模后,Morris水迷宮檢測(cè)結(jié)果表明:定位航行實(shí)驗(yàn)中,隨著訓(xùn)練時(shí)間的增加,各組小鼠的逃避潛伏期均有減少。與空白組對(duì)照相比,模型對(duì)照組小鼠的逃避潛伏期和游泳路程顯著增加(P0.05)�？臻g探索實(shí)驗(yàn)中,與空白對(duì)照組相比,模型對(duì)照組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)顯著減少(P0.05)。4.治療后,Morris水迷宮檢測(cè)結(jié)果表明:定位航行實(shí)驗(yàn)中,隨著訓(xùn)練時(shí)間的增加,各組小鼠的逃避潛伏期均有減少,與空白組相比,模型組小鼠的逃避潛伏期和游泳路程均顯著增加(P0.05);與模型組相比,中藥組、針刺組、針?biāo)幗M小鼠的逃避潛伏期和游泳路程均顯著減少(P0.05),以針?biāo)幗M的變化更為明顯�？臻g探索實(shí)驗(yàn)中,與空白組相比,模型組小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)顯著減少(P0.05);與模型組相比,中藥組、針刺組、針?biāo)幗M小鼠穿越平臺(tái)次數(shù)顯著增加(P0.05),針?biāo)幗M小鼠穿越次數(shù)增加更為明顯。5.治療后,免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明:與空白組相比,模型組小鼠Ch AT表達(dá)顯著減少(P0.05);與模型組相比,中藥組、針刺組、針?biāo)幗M小鼠Ch AT表達(dá)顯著增加(P0.05),針?biāo)幗M小鼠Ch AT表達(dá)增加更為明顯。與空白組相比,模型組小鼠Ach E表達(dá)顯著增加(P0.05);與模型組相比,中藥組、針刺組、針?biāo)幗M小鼠Ach E表達(dá)顯著減少(P0.05),針?biāo)幗M小鼠Ach E表達(dá)減少更為明顯。6.治療后,酶聯(lián)免疫吸附劑檢測(cè)結(jié)果表明:與空白組相比,模型組小鼠Aβ含量、IL-1β含量、TNF-α含量均顯著升高(P0.05);與模型組相比,中藥組、針刺組、針?biāo)幗M小鼠Aβ含量、IL-1β含量、TNF-α含量均顯著降低(P0.05),以針?biāo)幗M小鼠降低更為明顯。結(jié)論:1.采用針?biāo)幉⑴e的治療方法,可以很好改善因動(dòng)脈硬化導(dǎo)致的輕度認(rèn)知障礙小鼠的習(xí)及記憶能力;2.采用針?biāo)幉⑴e的治療方法,能夠明顯降低因動(dòng)脈硬化導(dǎo)致的輕度認(rèn)知障礙小鼠的炎性細(xì)胞因子含量,增加Ch AT表達(dá),降低Ach E表達(dá);3.采用針?biāo)幉⑴e的治療方法,對(duì)因動(dòng)脈硬化導(dǎo)致輕度認(rèn)知障礙小鼠的影響可能與膽堿能系統(tǒng)和炎癥反應(yīng)有關(guān)。
【圖文】：

針?biāo)幉⑴e對(duì)動(dòng)脈硬化引發(fā)的輕度 知障礙小鼠模型膽堿能抗炎通路的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 血脂水平檢測(cè)小鼠血脂水平檢測(cè)結(jié)果顯示：與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組小鼠血清中 TC、TG、LDL 的水平明顯增加（P<0.01），HDL 水平明顯減少（P<0.01）。結(jié)果見(jiàn)表 1、圖 1。表 1 小鼠血脂水平變化情況（mmol/L，， x s）組別 TC TG HDL LDL空白對(duì)照組 2.69 0.36 0.79 0.11 1.21 0.10 0.19 0.05模型對(duì)照組 20.46 3.09** 2.50 0.24** 0.36 0.12** 2.23 0.15**注：與空白對(duì)照組相比，**P＜0.01。

圖 2 不同組別小鼠動(dòng)脈病理切片圖（HE， 100）3 行為學(xué)檢測(cè)3.1 造模后3.1.1 定位航行實(shí)驗(yàn)小鼠定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：隨著訓(xùn)練時(shí)間的增加，小鼠的訓(xùn)練潛伏期均有所減少。與空白對(duì)照組相比，模型對(duì)照組小鼠逃避潛伏期時(shí)間顯著增加（P<0.05），游泳路程顯著增加（P<0.05）。結(jié)果見(jiàn)表 3-1、圖 3-1、3-2。表 3-1 小鼠定位航行實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期變化情況（s， x s）組別 第一天 第二天 第三天 第四天 第五天空白對(duì)照組 47.64 4.52 41.4 4.12 38.65 4.12 32.78 4.52 29.53 3.21模型對(duì)照組 58.41 2.01 55.23 3.85 53.34 4.40 50.63 4.78 45.23 4.23*注：與空白對(duì)照組相比，**P＜0.05。
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R245

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本文編號(hào)：2704620