【摘要】：目的:研究穴位埋線干預(yù)對(duì)老年性聾小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡因子Bcl-2和Bax表達(dá)的影響,從細(xì)胞凋亡角度探討穴位持久性良性刺激改善老年性聽力損失的可能機(jī)制,并驗(yàn)證腎俞、足三里在保健及延緩衰老方面的重要作用。材料和方法:選擇健康雄性11周齡C57BL/6小鼠30只,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后開始實(shí)驗(yàn)。在小鼠12周齡時(shí)麻醉,進(jìn)行聽性腦干反應(yīng)(ABR)檢測(cè),之后隨機(jī)分為青年組、自然衰老組和埋線組,每組10只。ABR檢測(cè)結(jié)束后,迅速將10只青年組小鼠斷頭,取耳蝸,備用。將自然衰老組小鼠正常喂養(yǎng)16周,埋線組小鼠取雙側(cè)腎俞、足三里進(jìn)行穴位埋線,2周操作一次,共8次。在小鼠28周齡時(shí),對(duì)自然衰老組、埋線組共計(jì)20只小鼠再次進(jìn)行ABR檢測(cè),檢測(cè)結(jié)束后斷頭處死,取耳蝸,觀察耳蝸形態(tài)結(jié)構(gòu),Western blot技術(shù)檢測(cè)耳蝸中Bcl-2和Bax兩種蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1.聽功能(ABR閾值)檢測(cè)結(jié)果顯示:與青年組相比,自然衰老組小鼠ABR閾值在各頻率均出現(xiàn)大幅增高,且高頻段增高更為顯著,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);埋線組與自然衰老組比較,前者ABR閾值在各頻率均低于后者,且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與青年組相比,埋線組小鼠ABR閾值在各頻率雖有增高,但增高幅度小于自然衰老組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.耳蝸形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果顯示:青年組小鼠基底膜形態(tài)正常,細(xì)胞排列整齊,血管紋無(wú)斷裂,形態(tài)正常,無(wú)紅細(xì)胞滲出,螺旋韌帶結(jié)構(gòu)致密,染色均勻,與耳蝸外側(cè)壁相鄰,無(wú)間隙;自然衰老組可見明顯的形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞,血管紋變薄、斷裂,螺旋韌帶部分溶解,結(jié)構(gòu)紊亂、排列稀疏,與耳蝸外側(cè)壁間距增寬;埋線組小鼠基底膜形態(tài)基本正常,血管紋偶有斷裂,螺旋韌帶區(qū)見少量增生,與耳蝸外側(cè)壁間距無(wú)明顯增寬。3.Western Blot結(jié)果顯示:與青年組相比,自然衰老組小鼠耳蝸Bcl-2蛋白表達(dá)量明顯降低,Bax蛋白表達(dá)量明顯增高,兩組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);埋線組與自然衰老組比較,埋線組Bcl-2表達(dá)量高于自然衰老組,而Bax表達(dá)量低于后者,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);埋線組與青年組相比,前者Bcl-2蛋白表達(dá)量雖有所降低,但降低幅度小于自然衰老組,Bax蛋白表達(dá)量雖有所增高,但增高幅度亦小于自然衰老組,兩組對(duì)比差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.C57BL/6小鼠在28周齡時(shí),已出現(xiàn)明顯聽力損失,且高頻聽力損失尤為顯著,符合老年性聾發(fā)病特點(diǎn),可作為老年性聾動(dòng)物模型。2.通過腎俞、足三里穴位埋線干預(yù),可改善老年性聾小鼠聽力損失情況。3.腎俞、足三里穴位埋線法防治老年性聾,其機(jī)制可能是通過上調(diào)耳蝸Bcl-2蛋白表達(dá)量、同時(shí)下調(diào)Bax蛋白表達(dá)量來實(shí)現(xiàn)的。4.驗(yàn)證了腎俞、足三里在保健及延緩老年性聾方面的重要作用。
【圖文】：

小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R245

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本文編號(hào)：2704522