發(fā)布時(shí)間：2020-06-04 20:00

【摘要】：目的:通過(guò)觀察電針預(yù)處理對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積情況的影響,揭示病理狀態(tài)下指標(biāo)的變化及針刺后的變化情況,觀察針刺對(duì)AS兔巨噬細(xì)胞泡沫化的影響,探究針刺在預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化中所發(fā)揮的作用機(jī)制。材料與方法:選取32只體重在2.5-3kg之間,成年健康雄性新西蘭大耳白兔。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,隨機(jī)分為空白組7只(正常飼料喂養(yǎng));造模組19只(高脂飼料喂養(yǎng));電針預(yù)處理組6只(正常飼料+高脂飼料喂養(yǎng))。空白組不施加干預(yù)因素,普通飼料喂養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。造模組高脂飼料喂養(yǎng)4周后,行頸動(dòng)脈球囊損傷術(shù)造模,術(shù)后繼續(xù)以高脂飼料喂養(yǎng)4周后,空白組與造模組每組隨機(jī)選取一只兔處死,取頸動(dòng)脈切片,HE染色觀察確認(rèn)造模是否成功。確認(rèn)造模成功后,造模組隨機(jī)分組并進(jìn)行干預(yù):模型組不予任何治療;藥物組給予阿托伐他丁鈣片混懸液喂服,1mg/kg/d;電針組給予電針刺激“關(guān)元”、雙側(cè)“內(nèi)關(guān)”、雙側(cè)“足三里”,每日20min/次,每周針刺6天,休息1天,共治療4周;電針預(yù)處理組適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,預(yù)先治療3周,取穴及治療方法與電針組相同,預(yù)先干預(yù)結(jié)束后由普通飼料轉(zhuǎn)為高脂飼料喂養(yǎng),采用與造模組相同的方法復(fù)制模型,HE染色確認(rèn)模型復(fù)制成功后電針治療4周。于實(shí)驗(yàn)取材前3天,兔腹腔注射無(wú)菌淀粉。電針治療結(jié)束后,耳緣靜脈注入水合氯醛麻醉,取心臟血,處死后取頸總動(dòng)脈組織,腹腔注射PBS輕柔腹部,收集腹腔液,離心收集腹腔巨噬細(xì)胞。檢測(cè)血脂TC/TG/LDL/HDL水平,HE染色評(píng)估兔動(dòng)脈粥樣硬化血管內(nèi)壁斑塊形成及變化情況,油紅O染色觀察巨噬細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化及脂質(zhì)蓄積情況,酶法檢測(cè)腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)總膽固醇(TC)、游離膽固醇(FC)、膽固醇酯(CE)含量并計(jì)算CE含量占TC含量的百分比,判斷巨噬細(xì)胞泡沫化程度。結(jié)果:1.血脂水平:與空白組相比,模型組兔血清TC、TG及LDL含量明顯升高,HDL含量有所下降,有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與模型組比較,電針治療組及電針預(yù)處理組兔血清TC、TG、LDL含量均有所降低,HDL含量升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與藥物組相比,電針組和電針預(yù)處理組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.頸動(dòng)脈病理切片組織形態(tài)學(xué)HE染色結(jié)果:與空白組相比,模型組血管內(nèi)皮厚度增加,內(nèi)膜結(jié)構(gòu)損壞,組織纖維化,大量大小不一的泡沫細(xì)胞聚集出現(xiàn),大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),斑塊明顯;與模型組相比,電針組、電針預(yù)處理組內(nèi)膜略顯粗糙,增厚不明顯;與電針組相比,電針預(yù)處理組頸動(dòng)脈內(nèi)膜雖然也表現(xiàn)出略有增厚且粗糙,但增厚度較小,泡沫細(xì)胞相對(duì)更為少量,斑塊面積縮小。3.巨噬細(xì)胞形態(tài)學(xué)油紅O染色結(jié)果:與空白組相比,模型組巨噬細(xì)胞內(nèi)染色較深,顏色明顯,可見(jiàn)染成紅色的大量的脂質(zhì)小顆粒的存在,胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,符合泡沫細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征;與模型組相比,電針預(yù)處理組、電針組巨噬細(xì)胞內(nèi)的紅色小顆粒減少,含有脂滴的細(xì)胞數(shù)量減少;與電針組相比,電針預(yù)處理組含有紅色脂滴的細(xì)胞數(shù)更為少量。4.酶法檢測(cè)巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量:與空白組相比,模型組膽固醇酯(CE)含量明顯增加,巨噬細(xì)胞泡沫化,二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,電針治療組、電針預(yù)處理組膽固醇酯(CE)的含量有所降低,泡沫細(xì)胞的形成率降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與電針組相比,電針預(yù)處理組膽固醇酯(CE)含量與總膽固醇(TC)含量比值降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.電針預(yù)處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效調(diào)節(jié)動(dòng)脈粥樣硬化兔血脂水平,減緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。2.電針預(yù)處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效保護(hù)血管內(nèi)皮,減少泡沫細(xì)胞的堆積,有效減少兔動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成。3.電針預(yù)處理關(guān)元、內(nèi)關(guān)、足三里穴能有效降低動(dòng)脈粥樣硬化兔腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯的含量,減少細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,抑制巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化,對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化具有預(yù)防和治療的作用。
【圖文】：

厚度明顯增加，可見(jiàn)大量泡沫細(xì)胞及紊亂排列的平滑肌細(xì)胞（圖 1.2），說(shuō)明 AS 模型復(fù)制成功。根據(jù)圖1.3-1.6的治療后頸動(dòng)脈HE染色結(jié)果顯示, 模型組鏡下可見(jiàn)內(nèi)膜嚴(yán)重?fù)p傷，動(dòng)脈壁增厚, 尤以內(nèi)膜增厚為主, 可見(jiàn)大量積聚的泡沫細(xì)胞及紊亂排列的平滑肌細(xì)胞，有明顯粥樣斑塊（圖 1.3）;與模型組相比，，電針預(yù)處理組、電針組及藥物組，形態(tài)學(xué)上變化明顯，管壁增厚情況有所改善，可見(jiàn)泡沫細(xì)胞浸潤(rùn)減少, 斑塊面積有所減��；與電針組相比，電針預(yù)處理組斑塊面積縮小。說(shuō)明電針有抑制動(dòng)脈粥樣斑塊形成的作用，且有一定預(yù)防作用。圖 1.3 模型組 圖 1.4 藥物組HE 染色（×400 倍）圖 1.1 空白組 圖 1.2 造模組HE 染色（×400 倍）

根據(jù)圖1.3-1.6的治療后頸動(dòng)脈HE染色結(jié)果顯示, 模型組鏡下可見(jiàn)內(nèi)膜嚴(yán)重?fù)p傷，動(dòng)脈壁增厚, 尤以內(nèi)膜增厚為主, 可見(jiàn)大量積聚的泡沫細(xì)胞及紊亂排列的平滑肌細(xì)胞，有明顯粥樣斑塊（圖 1.3）;與模型組相比，電針預(yù)處理組、電針組及藥物組，形態(tài)學(xué)上變化明顯，管壁增厚情況有所改善，可見(jiàn)泡沫細(xì)胞浸潤(rùn)減少, 斑塊面積有所減小；與電針組相比，電針預(yù)處理組斑塊面積縮小。說(shuō)明電針有抑制動(dòng)脈粥樣斑塊形成的作用，且有一定預(yù)防作用。圖 1.1 空白組 圖 1.2 造模組HE 染色（×400 倍）
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R245

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本文編號(hào)：2696902