發(fā)布時(shí)間：2020-03-24 10:43

【摘要】：一、臨床研究早期糖尿病腎病中醫(yī)證候、證素分布特點(diǎn)研究目的研究早期糖尿病腎病中醫(yī)證候、證素分布特點(diǎn),進(jìn)一步闡釋本病的病因病機(jī),為早期糖尿病腎病的診療提供依據(jù),以及時(shí)干預(yù)早期階段。方法本研究建立155例早期糖尿病腎病臨床資料信息庫(kù)。主要運(yùn)用描述性分析、系統(tǒng)聚類分析的統(tǒng)計(jì)方法,研究早期糖尿病腎病臨床一般資料及中醫(yī)證侯、證素分布特點(diǎn)。結(jié)果1.一般資料分析:本研究共納入155例早期DKD患者,其中男性90例,女性65例。男性比例大于女性,男性占58.1%,女性占41.9%。平均年齡為58.65±10.61歲,其中51-60歲和61-70歲兩個(gè)年齡段人數(shù)最多,占59%。超重人數(shù)最多,占41%,肥胖和正常體重比例接近,分別是27%、30%。糖尿病平均病程為14.39±7.26年。合并高血壓、血脂異常的患者較多分別占78.1%68.5%。2.男女性別BMI、年齡、病程相比:男女性別在年齡、病程存在著差異,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。男女性別之間BMI的比較不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3.中醫(yī)四診資料中出現(xiàn)頻率較高的有口渴多飲(78.2%)、神疲乏力(70.5%)、眼睛干澀(68.6%)、多食易饑(59.6%)、肢體麻木(56.4%)。早期DKD虛證以氣陰兩虛(62.6%)、陰虛燥熱(19.3%)為主。實(shí)證以風(fēng)證(29.6%)、痰瘀(29%)為主。4.基于聚類分析得到本病的病位證素是肝、腎、脾、胃,病性證素有氣虛、陰虛、陽(yáng)虛、風(fēng)、瘀血、痰、濕、熱。結(jié)論1.年齡、病程是早期糖尿病腎病不可控的危險(xiǎn)因素,應(yīng)早期發(fā)現(xiàn),及時(shí)治療。2.早期糖尿病腎病中醫(yī)證候本虛標(biāo)實(shí)。通過(guò)聚類分析得出早期糖尿病腎病病位證素主要在肝、腎、脾、胃。病性證素中虛者分氣虛、陽(yáng)虛、陰虛。實(shí)者分為痰、濕、熱、風(fēng)、瘀。將早期糖尿病腎病病因病機(jī)概括為以虛為本兼夾痰、濕、熱、風(fēng)、瘀血。風(fēng)邪證候要素出現(xiàn)于早期糖尿病腎病階段,因此,祛風(fēng)法可用于治療早期糖尿病腎病微量白蛋白尿。二、實(shí)驗(yàn)研究益氣滋腎祛風(fēng)法對(duì)高糖誘導(dǎo)系膜細(xì)胞增殖和自噬的干預(yù)機(jī)制研究目的探討益氣滋腎祛風(fēng)法對(duì)高糖誘導(dǎo)下系膜細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)積聚的抑制作用,并從自噬闡述其可能的作用機(jī)制。方法制備益氣滋腎祛風(fēng)中藥及替米沙坦含藥血清。高糖刺激系膜細(xì)胞,分別在24h、48h、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)下,CCK-8法檢測(cè)系膜細(xì)胞增殖情況。采用ELISA法檢測(cè)上清液中細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FN、LN的表達(dá)情況。應(yīng)用Western blot法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白p62、Beclin-1、LC3-Ⅱ,自噬信號(hào)通路蛋白AMPK、p-AMPK,細(xì)胞因子TGF-β1蛋白的表達(dá)。透射電鏡下觀察自噬小體的形成。探討益氣滋腎祛風(fēng)法對(duì)系膜細(xì)胞增殖及自噬的作用。結(jié)果1.48h時(shí)高糖(30mmol/L)誘導(dǎo)下系膜細(xì)胞增殖的情況最佳。益氣滋腎祛風(fēng)法可抑制高糖誘導(dǎo)下系膜細(xì)胞的增殖,與高糖組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。2.ELISA法結(jié)果顯示:高糖組FN、LN細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的表達(dá)上調(diào),與正常對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。益氣滋腎祛風(fēng)法及替米沙坦組下調(diào)FN、LN的表達(dá),與高糖組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。3.Western blot結(jié)果顯示:高糖下調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1的表達(dá),上調(diào)p62的表達(dá),與正常對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。同時(shí)高糖下調(diào)自噬營(yíng)養(yǎng)信號(hào)通路AMPK、p-AMPK蛋白的表達(dá),與正常對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。益氣滋腎祛風(fēng)法及替米沙坦組則能上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ、Beclin-1的表達(dá),下調(diào)p62的表達(dá),與高糖組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且AMPK、p-AMPK蛋白表達(dá)增加,與高糖組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。高糖培養(yǎng)的系膜細(xì)胞TGF-β1蛋白表達(dá)上調(diào),與正常對(duì)照組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),益氣滋腎祛風(fēng)法及替米沙坦組則能下調(diào)TGF-β1蛋白表達(dá),與高糖組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4.透射電鏡結(jié)果顯示:正常對(duì)照組系膜細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好,核膜、核仁清晰,細(xì)胞器結(jié)構(gòu)正常,存在少量雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬體。高糖組可見(jiàn)雙層膜結(jié)構(gòu)的自噬體數(shù)量減少。益氣滋腎祛風(fēng)法及替米沙坦含藥血清干預(yù)后,可見(jiàn)系膜細(xì)胞內(nèi)自噬體數(shù)量增多,自噬體內(nèi)包裹有細(xì)胞器。結(jié)論1.益氣滋腎祛風(fēng)法可抑制高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞增殖及TGF-β1蛋白表達(dá),從而減少細(xì)胞外基質(zhì)蛋白積聚,延緩腎小球硬化。2.益氣滋腎祛風(fēng)法通過(guò)活化AMPK自噬營(yíng)養(yǎng)信號(hào)通路從而提高系膜細(xì)胞自噬的水平,自噬水平上調(diào)可能會(huì)延緩糖尿病腎病腎小球硬化的進(jìn)展。
【圖文】：

圖１早期ＤＫＤ與年齡逡逑邋２早期ＤＫＤ與性別逡逑本研宄納入的１５５例早期ＤＫＤ中其中男性患者９０例，占總?cè)藬?shù)５８．邋１％，女性患者６５例總?cè)藬?shù)４１．邋９％。由圖２可知，男性比例大于女性。男性年齡最大７６歲，．最小３３歲，

１．邋２早期ＤＫＤ與性別逡逑本研宄納入的１５５例早期ＤＫＤ中其中男性患者９０例，占總?cè)藬?shù)５８．邋１％，，女性患者６５例，逡逑占總?cè)藬?shù)４１．邋９％。由圖２可知，男性比例大于女性。男性年齡最大７６歲，．最小３３歲，平逡逑３４逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R259;R277.5

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