發(fā)布時(shí)間：2019-03-27 07:01

【摘要】：目的:通過不結(jié)扎輸尿管直接膀胱注射大腸桿菌的方法制作大鼠APN(急性腎盂腎炎)模型,觀察各組大鼠腎臟組織以及體溫、尿量、腎重系數(shù)、血常規(guī)、尿常規(guī)、尿細(xì)菌培養(yǎng)、血清白介素-2(IL-2)、血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和分泌型免疫球蛋白(SIg A)各項(xiàng)指標(biāo)的變化,從而以實(shí)驗(yàn)的方法探討導(dǎo)赤承氣湯對APN的影響及其作用機(jī)制,以期為中醫(yī)臨床應(yīng)用和教學(xué)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。急性腎盂腎炎(APN)是由各種病原微生物感染直接引起腎小管、腎間質(zhì)和腎實(shí)質(zhì)的炎癥。臨床常見畏寒發(fā)熱、惡心嘔吐、尿頻、尿急、尿痛,小腹部的脹痛,腰部疼痛,肋脊角壓痛及叩痛等。其基本的病理特點(diǎn)在于腎盂腎盞黏膜充血水腫,表面膿性分泌物,腎皮質(zhì)有炎癥病灶,腎小管上皮腫脹、脫落壞死,間有白細(xì)胞浸潤等,炎癥愈后有瘢痕形成等,但腎小球一般較少受損[1]。在古醫(yī)籍中雖未見明確的關(guān)于APN的記載,但根據(jù)其臨床有身熱,腹?jié)M,便秘、口干、唇裂,伴見小便涓滴不暢,溺時(shí)疼痛,尿色紅赤,時(shí)煩渴,舌紅脈數(shù)等癥候,將其歸屬于中醫(yī)“淋證”、“癃閉”、“虛勞腰痛”等范疇[2]。并中醫(yī)從“腎與膀胱相表里”這一體現(xiàn)臟腑相關(guān)整體觀的理論出發(fā),將其病機(jī)特點(diǎn)概括為“腎虛膀胱熱”[3]。本研究根據(jù)APN的中醫(yī)病機(jī)特點(diǎn),依據(jù)“腎與膀胱相表里”的理論及中醫(yī)藥的現(xiàn)代藥理研究,選用導(dǎo)赤承氣湯對大腸桿菌所致APN大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。導(dǎo)赤承氣湯出自吳鞠通《溫病條辨·中焦篇》第17條:“左脈牢堅(jiān),小便赤痛,時(shí)煩渴甚,導(dǎo)赤承氣湯主之�！北痉郊茨芡a大便,又能通利小便,可兩解大腸與小腸之邪熱,為“二腸同治”之法。臨床用于陽明腑實(shí)兼小腸熱盛證。而小腸熱盛,下注膀胱,小便必涓滴不暢[4]。因此,對于APN可以采用導(dǎo)赤承氣湯甘苦化陰利小便與攻下合法而起到清熱瀉火、利濕通淋的作用[5]。本研究通過觀察大鼠腎臟組織以及體溫、尿量、腎重系數(shù)、血常規(guī)、尿常規(guī)、尿細(xì)菌培養(yǎng)、血清白介素-2(IL-2)、血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和分泌型免疫球蛋白(SIg A)各項(xiàng)指標(biāo)的變化,明確導(dǎo)赤承氣湯治療APN的作用機(jī)制,為臨床治療APN和中醫(yī)教學(xué)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1選用健康清潔級雄性SD大鼠28只,體重250±20g,適應(yīng)性喂養(yǎng)3天,試驗(yàn)期間自由飲水,進(jìn)食普通飼料,按照隨機(jī)分配原則分為4組:空白組(Normal control group,K=n6)、模型組(Model group,M=n6)、導(dǎo)赤承氣湯組(Daochichengqi Decoction group,D=n8)、左氧氟沙星組(Levofloxacin Hydrochloride group,L=n8),其中除空白組外,其余各組均采用不結(jié)扎輸尿管直接膀胱注射大腸桿菌(0.6ml)的方法制作APN大鼠模型,于實(shí)驗(yàn)造模后第5天處死。2實(shí)驗(yàn)給藥:四組均在造模后連續(xù)給藥5天,給藥劑量按人與大鼠間藥物折算比例系數(shù)計(jì)算得出,D組以4.9g/kg/d導(dǎo)赤承氣湯灌胃,L組以0.06g/kg/d左氧氟沙星灌胃,K組和M組分別給予等量生理鹽水灌胃,每天灌胃給藥一次,給藥容積為8ml/kg/d。3指標(biāo)檢測:每日上午九點(diǎn),用電子體溫計(jì)測量大鼠的肛溫;第4天將老鼠放置于代謝籠中,收集24小時(shí)尿量,觀察各組間尿量的變化;處死時(shí)稱體重、腎重,用于計(jì)算腎重系數(shù);從腹主動脈取血,檢測大鼠血常規(guī)、血清白介素-2(IL-2)、血清C反應(yīng)蛋白(CRP)各項(xiàng)指標(biāo)的變化;無菌狀況下從膀胱抽取尿液,檢測尿細(xì)菌培養(yǎng)、尿常規(guī)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和分泌型免疫球蛋白(SIg A)各項(xiàng)指標(biāo)的變化;將縱行切開的左側(cè)大部分腎臟組織置于10%多聚甲醛液中固定,脫水,石蠟包埋,行HE染色,用于光鏡下觀察腎臟結(jié)構(gòu)和變化。結(jié)果:1各組大鼠指標(biāo)檢測結(jié)果體溫的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組、導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組造模后體溫都呈上升趨勢,模型組體溫升高最明顯,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組體溫呈下降趨勢,且左氧氟沙星組體溫下降較明顯,但與導(dǎo)赤承氣湯組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。24小時(shí)尿量的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組、導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組尿量都增加,模型組增加的較為顯著,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組尿量減少,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。腎重系數(shù)的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組的左腎重系數(shù)明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組左/右腎重系數(shù)降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),左氧氟沙星組左/右腎重系數(shù)降低,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。但導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。血常規(guī)的測定結(jié)果,白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組白細(xì)胞水平明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,左氧氟沙星組白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞水平下降,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01),導(dǎo)赤承氣湯組白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞水平下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與導(dǎo)赤承氣湯組相比,左氧氟沙星組白細(xì)胞水平下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。紅細(xì)胞及血紅蛋白的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組紅細(xì)胞及血紅蛋白水平下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。但導(dǎo)赤承氣湯組、模型組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。血小板的測定結(jié)果,各組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。尿常規(guī)的測定結(jié)果,尿白細(xì)胞:與空白組相比,模型組尿白細(xì)胞增多,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組尿白細(xì)胞減少,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),左氧氟沙星組尿白細(xì)胞減少,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。尿潛血:與空白組相比,模型組尿潛血增多,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。但模型組、導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。尿細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果,與空白組相比,模型組尿培養(yǎng)陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,左氧氟沙星組尿培養(yǎng)陽性率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),導(dǎo)赤承氣湯組尿培養(yǎng)陽性率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。尿SIg A的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組尿SIg A水平降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組尿SIg A水平增高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。與導(dǎo)赤承氣湯組相比,左氧氟沙星組尿SIg A水平較高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。尿NAG酶的測定結(jié)果,各組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。血清IL-2的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組IL-2水平增高,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。與模型組相比,中藥組IL-2水平降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。CRP的測定結(jié)果,與空白組相比,模型組CRP水平增高,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。與模型組相比,導(dǎo)赤承氣湯組CRP水平降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),左氧氟沙星組CRP水平也降低,有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。但導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組之間無顯著差異(P0.05)。2光鏡下腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察空白組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)完整,未見病理改變;模型組大鼠腎盂粘膜下及間質(zhì)區(qū)可見到大量淋巴細(xì)胞灶性浸潤,間質(zhì)區(qū)毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,腎小管壞死;導(dǎo)赤承氣湯組和左氧氟沙星組腎組織病理變化較模型組明顯改善,大鼠腎盂粘膜下及間質(zhì)區(qū)少量淋巴細(xì)胞灶性浸潤,間質(zhì)區(qū)毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張,腎小管輕度壞死,血管輕度充血。結(jié)論:1導(dǎo)赤承氣湯能升高APN大鼠分泌型免疫球蛋白A(SIg A)水平,降低血中白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞(WBC、N)、血清白介素-2(IL-2)、血清C反應(yīng)蛋白(CRP)、尿白細(xì)胞水平,且減輕腎盂粘膜下及間質(zhì)區(qū)中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤、毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血及間質(zhì)水腫,有一定的腎保護(hù)作用,短期治療效果與左氧氟沙星無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。證明導(dǎo)赤承氣湯對APN具有一定的治療作用。2導(dǎo)赤承氣湯對APN的作用機(jī)制可能與其清熱利小便通腑而起到抑菌抗炎,增強(qiáng)尿道局部免疫功能的作用有關(guān)。3實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)導(dǎo)赤承氣湯是通過抑菌抗炎、增強(qiáng)尿道局部免疫功能發(fā)揮其甘苦化陰利小便和攻下瀉熱作用,從而達(dá)到清熱利濕通淋的目的。為中醫(yī)教學(xué)及臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。4實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)在提高尿SIg A水平及抑菌抗炎方面,左氧氟沙星的療效要優(yōu)于導(dǎo)赤承氣湯,提示在臨證時(shí)應(yīng)根據(jù)患者病情實(shí)際情況,分別選擇適合的中西醫(yī)治療方法。但導(dǎo)赤承氣湯以其整體治療優(yōu)勢,以及毒副作用小、較少出現(xiàn)耐藥性或其他不良反應(yīng)等優(yōu)勢,臨床可以作為治療APN的輔助療法,以提高臨床治愈率、減少復(fù)發(fā)率。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R277.5

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1 陳潔;導(dǎo)赤承氣湯治療大腸桿菌致的大鼠急性腎盂腎炎的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號：2447970