【摘要】：目的觀察刺血療法對急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠造模關(guān)節(jié)局部白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)基因的相對表達(dá)及啟動子區(qū)甲基化水平的影響,探討刺血療法治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)表觀遺傳調(diào)控機(jī)制。方法 36只SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、藥物組、刺血組。右踝關(guān)節(jié)腔注射尿酸鈉建立急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。刺血組在右側(cè)昆侖穴點(diǎn)刺放血,藥物組以布洛芬灌胃治療。評價(jià)造模關(guān)節(jié)腫脹程度,光鏡下觀察關(guān)節(jié)腔組織形態(tài)學(xué)改變,qPCR和焦磷酸測序檢測大鼠造模關(guān)節(jié)局部軟骨及其周圍軟組織IL-1β、IL-10的mRNA表達(dá)水平及基因啟動子區(qū)甲基化水平。結(jié)果與模型組、藥物組比較,刺血組關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)明顯降低(P0.01)。刺血療法能減少關(guān)節(jié)腔內(nèi)尿酸鹽結(jié)晶沉積,抑制炎性細(xì)胞的侵潤,改善關(guān)節(jié)滑膜的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。與模型組比較,刺血組IL-1βmRNA的相對表達(dá)量明顯降低(P0.01)。但I(xiàn)L-1β基因啟動子區(qū)甲基化水平與其mRNA表達(dá)不呈負(fù)相關(guān)。與正常組、模型組、藥物組比較,刺血組IL-10 mRNA的相對表達(dá)量升高(P0.01),IL-10平均甲基化率降低(P0.05~0.01)。IL-10基因啟動子甲基化水平與其mRNA表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.899,P0.01)。結(jié)論刺血療法通過DNA甲基化的表觀遺傳修飾調(diào)控IL-10基因表達(dá)可能是刺血療法發(fā)揮抗炎效應(yīng)的重要機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective to observe the effect of blood pricking therapy on the relative expression of interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and interleukin-10 (IL-10) gene and the methylation level of promoter region in rat models of acute gouty arthritis. To explore the epigenetic regulation mechanism of blood pricking therapy for acute gouty arthritis. Methods 36 SD rats were randomly divided into normal group, model group, drug group and blood prick group. The rat model of acute gouty arthritis was established by injecting sodium uric acid into right ankle joint. The blood pricking group was punctured at right Kunlun point and the drug group was treated by intragastric administration of ibuprofen. To evaluate the degree of joint swelling, observe the morphologic changes of articular cavity under light microscope, and detect the IL-1 尾 of articular cartilage and its surrounding soft tissue in rats by qPCR and pyrosequencing. MRNA expression level and methylation level of gene promoter in IL-10. Results compared with model group and drug group, the joint swelling index of blood pricking group was significantly lower (P 0.01). Blood pricking therapy can reduce the deposition of uric acid crystal in articular cavity, inhibit the infiltration of inflammatory cells, and improve the morphology of synovium. Compared with the model group, the relative expression of IL-1 尾 mRNA was significantly decreased in the blood pricking group (P0.01). However, the methylation level of IL-1 尾 gene promoter was not negatively correlated with its mRNA expression. Compared with normal group, model group and drug group, the relative expression of IL-10 mRNA in blood pricking group increased (P0.01). The average methylation rate of IL-10 decreased (P0.05 / 0. 01), and the methylation level of IL-10 gene promoter was negatively correlated with its mRNA expression (r-0.899P0.01). Conclusion the regulation of IL-10 gene expression by epigenetic modification of DNA methylation in blood pricking therapy may be one of the important mechanisms of anti-inflammatory effect of blood pricking therapy.
【作者單位】： 浙江醫(yī)院推拿科;南京中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院;湖南醫(yī)藥學(xué)院針灸教研室;第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院南京分院針灸科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81273840)
【分類號】：R245

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