【摘要】：紅牛膝,為四川涼山彝族自治州、云南楚雄彝族自治州、貴州等彝族地區(qū)的彝醫(yī)臨床常用藥材,在涼山彝族自治州,稱為勒補(bǔ)或乃補(bǔ)(),為莧科植物頭花杯莧Cyathula capitata(Wall.)Moq.的根,用于治療跌打損傷、風(fēng)濕、類風(fēng)濕等疾病。同時(shí),紅牛膝是彝醫(yī)經(jīng)典驗(yàn)方“我思”中的主要藥材之一,“我思”為四川省非物質(zhì)文化遺產(chǎn)“彝醫(yī)藥”傳承人——阿子阿越(郝應(yīng)芬),根據(jù)阿子家族傳承經(jīng)驗(yàn),結(jié)合自己三十余年的彝醫(yī)臨床經(jīng)驗(yàn),精心研制成的彝醫(yī)經(jīng)典驗(yàn)方,彝藥“我思”在治療彝醫(yī)臨床上“斯色”病(痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎)治愈率高、復(fù)發(fā)性小,并且具有標(biāo)本兼治的療效。國內(nèi)外對牛膝類藥材的研究主要集中在中醫(yī)臨床上常用的牛膝Achyranthes bidentata Blume與川牛膝Cyathula officinalis Kuan;紅牛膝的相關(guān)研究較少。紅牛膝作為四川涼山彝族自治州、云南楚雄彝族自治州、貴州等彝族地區(qū)的彝醫(yī)臨床常用藥材,目前尚未建立藥材和成方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),影響紅牛膝藥材臨床應(yīng)用的安全、有效和質(zhì)量可控。因此,本課題擬從彝醫(yī)藥典籍考證、生藥學(xué)、抗氧化活性、藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)制定等方面進(jìn)行研究,以期為紅牛膝彝藥材資源的保護(hù)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑開發(fā)和質(zhì)量控制提供科學(xué)參考和依據(jù),主要研究內(nèi)容如下:(1)根據(jù)彝藥材名稱“紅牛膝”在各彝醫(yī)醫(yī)療機(jī)構(gòu)收集藥材樣品、采集原植物標(biāo)本和文獻(xiàn)查閱,開展了彝藥材“紅牛膝”的原植物定種和彝醫(yī)臨床使用情況調(diào)查研究,試驗(yàn)結(jié)果表明:1)西昌市彝醫(yī)藥研究所提供的藥材勒補(bǔ),原植物為頭花杯莧(麻牛膝)Cyathula capitata(Wall.)Moq.,以根入藥,彝醫(yī)臨床配伍其他藥材使用,治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、寒濕性骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕類關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。2)貴州地區(qū)所用紅牛膝為莧科植物柳葉牛膝Achyranthes longifolia(Makino)Makino,以根入藥,生用,破血利濕,用于治療經(jīng)閉、月經(jīng)不通等;熟用,補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)壯筋骨,用于治療肝腎虛損、腰膝疼痛等。3)云南彝區(qū)所用紅牛膝來源廣泛,包括牛膝、牛膝野生種、粗毛牛膝、鈍葉土牛膝和柳葉牛膝等,鮮用或炮制后使用,具有活血祛瘀、清火解毒、除濕止痛的功效,治跌打淤痛、月經(jīng)不調(diào)、咽喉腫痛、手足麻木等。4)紅牛膝主要應(yīng)用于少數(shù)民族地區(qū),暫未查閱到有關(guān)紅牛膝配伍入藥的成方制劑收載品種。5)涼山彝族地區(qū)用紅牛膝配伍的彝藥“我思”在涼山彝族地區(qū)具有較長的用藥歷史,具有治愈率高、復(fù)發(fā)性小,并且具有標(biāo)本兼治的療效,紅牛膝作為方中主要藥材之一,有必要進(jìn)行更加深入的研究。(2)紅牛膝原植物、性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別、水分、灰分、浸出物等含量測定研究,試驗(yàn)結(jié)果表明:1)新鮮根表皮紅色或斷面紅色或黃色特征明顯,根顯微特征中有異形維管束;6批紅牛膝藥材的水分在7.70-9.69%之間,平均為8.82%;2)總灰分在6.33-7.34%之間,平均值為6.79%;酸不溶性灰分0.40-0.63%之間,平均值為0.51%;3)水溶性浸出物含量在48.52-59.58%之間,平均為53.39%。(3)采用系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)法,初步確定紅牛膝中所含的大類成分,試驗(yàn)結(jié)果表明:紅牛膝可能含有糖類、苷類、蛋白質(zhì)、皂苷、酚類、有機(jī)酸、黃酮類、生物堿、甾體、三萜類。(4)通過單因素試驗(yàn)考察乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、提取時(shí)間、液料比對紅牛膝總皂苷提取率的影響,并采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化總皂苷的提取條件,試驗(yàn)結(jié)果表明:紅牛膝中總皂苷最佳提取工藝為80%乙醇為溶劑,90℃提取60 min,液料比為20:1;比較紅牛膝藥材中總皂苷含量,雅安天全縣采集樣品含量最低,為7.98±0.34 mg.g-1,其余5批樣品含量較為接近,均在17-22 mg.g-1之間;樣品中總皂苷含量隨儲存年限增長而有所降低;天全縣所采集得樣品總皂苷含量與其它批次樣品差別較大,因此,該品種可能是川牛膝與麻牛膝的雜交品。(5)通過單因素試驗(yàn)考察超聲時(shí)間、浸提溫度、液料比和醇沉濃度等因素對紅牛膝總多糖得率的影響,并通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化總多糖的超聲輔助提取工藝,紅牛膝粗多糖的最佳提取工藝為:液料比為40:1,50℃條件下超聲提取80 min,最優(yōu)條件下,紅牛膝中粗多糖得率為10.51%,純度為56.9%。(6)對紅牛膝粗提物的體外抗氧化能力進(jìn)行了評價(jià),試驗(yàn)結(jié)果表明:紅牛膝粗多糖和粗皂苷均具有一定的抗氧化能力,其清除DPPH自由基及ABTS+自由基的IC50值分別為0.468 mg.mL-1、0.288 mg.mL-1和0.231 mg.mL-1、0.163mg.mL-1;在測定濃度范圍內(nèi),二者均表現(xiàn)出一定的總還原能力。(7)采用硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠色譜等方法對紅牛膝80%乙醇(mL·mL-1)提取物進(jìn)行分離純化,分離并鑒定4個(gè)化合物,分別為β-谷甾醇、3-O-[α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]-齊墩果酸、牛膝皂苷Ⅰ和牛膝皂苷Ⅱ,均為首次在紅牛膝中分離得到。(8)建立同時(shí)測定紅牛膝中兩種皂苷類成分的UPLC方法,比較了不同批次紅牛膝藥材中兩種皂苷的含量。色譜柱:ACQUITY UPLC HSS C18(2.1×50mm,1.7μm);流動相組成:乙腈-0.1%磷酸水,流速:0.2 mL.min-1;線性梯度洗脫;檢測波長:210 nm;柱溫:40℃,試驗(yàn)結(jié)果表明:3-O-[α-L-吡喃鼠李糖(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖醛酸]-齊墩果酸和牛膝皂苷Ⅰ在0.1005~1.206 mg.mL-1和0.101~1.212 mg.mL-1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好,牛膝皂苷Ⅰ能很好地反應(yīng)紅牛膝藥材中總皂苷的含量。(9)根據(jù)以上試驗(yàn)結(jié)果,擬定紅牛膝藥材標(biāo)準(zhǔn)(草案),對紅牛膝藥材質(zhì)量進(jìn)行了規(guī)范和控制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南民族大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R29

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2339093