【摘要】：研究背景:多裂肌是位于脊柱最內(nèi)側(cè)且附著面積最大的椎旁肌,也是維持脊柱生物力學(xué)平衡,穩(wěn)定椎間關(guān)節(jié)的重要節(jié)段性支柱。腰骶段的多裂肌尤為發(fā)達(dá),尤其是L4-5節(jié)段的多裂肌對腰椎的動力性穩(wěn)定起到80%以上的重要作用。一旦腰多裂肌發(fā)生損傷、萎縮及功能紊亂,就有可能導(dǎo)致腰椎失穩(wěn)引發(fā)腰痛。針刺治療腰痛由來已久且療效肯定。委中是治療腰痛的經(jīng)典效穴。之前的研究已發(fā)現(xiàn)電針委中穴可改善骨骼肌損傷后的微循環(huán),而炎癥反應(yīng)是骨骼肌損傷后影響微循環(huán)的重要節(jié)點,它對損傷微環(huán)境的內(nèi)穩(wěn)態(tài)有重要作用。而炎癥反應(yīng)的程度是影響細(xì)胞損傷、自噬、凋亡、壞死及修復(fù)的重要因素,它影響著肌肉損傷后的病理走向及發(fā)展趨勢,對肌肉損傷的修復(fù)至關(guān)重要。本實驗一方面從解剖學(xué)、組織形態(tài)學(xué)對多裂肌進行形態(tài)學(xué)觀察;另一方面從炎癥反應(yīng)與損傷微環(huán)境內(nèi)穩(wěn)態(tài)的關(guān)系角度探討電針"委中"穴對腰多裂肌損傷后的部分修復(fù)機制。研究目的:1.從解剖學(xué)角度觀察多裂肌的形態(tài)特點,并從組織形態(tài)學(xué)方面觀察局部定點注射布比卡因溶液后大鼠腰多裂肌損傷的程度及恢復(fù)的時程。2.從IL-17和LIF的定量表達(dá)方面觀察電針"委中"穴和電針"腎俞"穴對大鼠腰多裂肌損傷后炎癥反應(yīng)及修復(fù)過程的影響。研究方法:實驗一:SD大鼠多裂肌形態(tài)學(xué)解剖觀察。體重為320-350g的雄性SD大鼠2只,10%水合氯醛(350mg/kg,ip.)注射麻醉大鼠后,進行心臟灌注固定,固定滿意后暴露解剖區(qū)域,剝離腰背筋膜,鈍性分離相鄰肌間隙,然后沿肌肉起止點及纖維走行方向進行鈍性剝離,暴露多裂肌解剖形態(tài),并用高清照相機追蹤獲取各節(jié)段多裂肌解剖圖,以備形態(tài)學(xué)觀察。實驗二:大鼠腰多裂肌定點注射損傷模型觀察。雄性SD大鼠18只,隨機分為:空白組、生理鹽水組、布比卡因組,每組6只。布比卡因組大鼠,10%水合氯醛(350mg/kg,ip.)麻醉,選擇L4、L5脊柱水平兩旁的4個點,使用一次性注射器(4號針頭)抽取0.5%布比卡因溶液,針頭呈45°緊貼棘突向多裂肌進入,接觸到關(guān)節(jié)突和棘突所在的骨面后回抽無血,每點注射布比卡因溶液100μl,注射時間在3s以上,以利于藥物的吸收。單次注射布比卡因完成造模。生理鹽水組注射方法同布比卡因組�？瞻捉M不采取任何措施。造模完成后從一般行為學(xué)、運動功能分析及HE、Masson染色的角度進行造模后觀察。實驗三:體重為320-350g的雄性SD大鼠96只,隨機分為:空白組(24只)、模型組(24只)、電針委中組(24只)、電針腎俞組(24只),每組再隨機分為1d、3d、7d各三個亞組,每個亞組各8只大鼠。10%水合氯醛(350mg/kg,ip.)麻醉后,將0.5%的布比卡因鹽酸鹽溶液(BPVC)按100μl/點注射于模型組、電針委中組、電針腎俞組大鼠雙側(cè)L4、L5水平(4點)的腰部多裂肌上�？瞻捉M不作任何處理。造模完成后,電針委中穴、電針腎俞穴組進行電針治療。分別通過光學(xué)顯微鏡觀察HE染色后各組大鼠損傷多裂肌第1d、3d、7d的組織形態(tài)學(xué)變化;采用免疫組化法及Elisa檢測各組大鼠多裂肌IL-17和LIF在損傷后第1d、3d、7d的表達(dá),比較電針委中穴和電針腎俞穴對模型大鼠損傷后的炎癥反應(yīng)及損傷微環(huán)境內(nèi)穩(wěn)態(tài)的作用,初步探討電針委中穴和電針腎俞穴對大鼠腰多裂肌損傷后修復(fù)過程的影響。研究結(jié)果:1.大體解剖觀察結(jié)果:SD大鼠的多裂肌與人的多裂肌有許多類似之處,二者多裂肌均位于脊柱最內(nèi)側(cè),且是附著面積最大的椎旁肌,形似一把"鋼索"從上到下鎖住脊柱的骨性結(jié)構(gòu),對于維持脊柱的生物力學(xué)平衡,尤其是對脊椎的節(jié)段性穩(wěn)定有重要作用。而跨越L4、L5節(jié)段的多裂肌長度最長,直徑最粗大,且有較堅韌的筋膜保護,功能強大,對于腰椎的前屈、后伸及旋轉(zhuǎn)運動以及維持腰椎的動態(tài)穩(wěn)定有重要作用。2.HE及Masson染色的結(jié)果:空白組肌纖維排列整齊,大小一致,肌間隙有一個或數(shù)個細(xì)胞核分布。注射生理鹽水后,偶見細(xì)胞間質(zhì)輕微水腫,細(xì)胞間隙可見少量破損細(xì)胞,局部炎細(xì)胞浸潤較少,但肌纖維排列仍較整齊,形態(tài)未見明顯異常。而注射布比卡因24h后,可見肌細(xì)胞有斷裂壞死、萎縮、且大小不一,排列不勻,肌間隙有大量破損的細(xì)胞殘片,膠原纖維散亂分布,并有大量的炎性細(xì)胞呈局灶性分布。3.電針"委中"穴和電針"腎俞"穴對模型大鼠腰多裂肌損傷后不同時段形態(tài)學(xué)變化及IL-17、LIF表達(dá)的影響。模型組第1d、3d、7d多裂肌IL-17的表達(dá)均高于空白組,且有顯著性差異(p0.01);與模型組比較,電針委中組與電針腎俞組IL-17第1d、3d、7d的表達(dá)含量均降低(p0.01);與電針腎俞組比較,第1d、3d電針委中組的IL-17含量降低(p0.05);第7d電針委中組IL-17的表達(dá)與電針腎俞組比較有顯著性差異(p0.01)。空白組LIF表達(dá)含量較低,造模后,模型組、電針委中組、電針腎俞組LIF表達(dá)含量迅速升高;針刺1d:與模型組比較,電針委中組、電針腎俞組LIF表達(dá)含量升高(P0.05,P0.01);與電針腎俞組比較,電針委中組表達(dá)含量升高(P0.05);針刺3d:電針委中組、電針腎俞組LIF表達(dá)含量升高(P0.05,P0.01);與電針腎俞組比較,電針委中組表達(dá)含量升高(P0.01);針刺7d:與模型組比較,電針委中組、電針腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P0.01,P0.05);與電針腎俞組比較,電針委中組表達(dá)含量升高(P0.05)。研究結(jié)論:1.跨越L4-5節(jié)段的多裂肌長度最長,直徑最粗大,且有堅韌的筋膜保護,對腰椎的動力性穩(wěn)定貢獻(xiàn)率較高。2.局部定點注射布比卡因溶液可成功復(fù)制大鼠腰多裂肌損傷模型。造模后局部出現(xiàn)了肌纖維斷裂、變性、壞死等形態(tài)學(xué)改變,而在損傷微環(huán)境中伴有大量的炎細(xì)胞浸潤,炎癥反應(yīng)的程度及時程是影響骨骼肌損傷后病理轉(zhuǎn)歸的重要節(jié)點之一。3.電針委中穴和電針腎俞穴均能促進損傷多裂肌的形態(tài)學(xué)恢復(fù),而電針委中穴起效時間較早,調(diào)節(jié)功能較強,作用時間較長,對多裂肌損傷的早期良性修復(fù)作用更明顯;其機制可能與電針委中穴抑制IL-17的過度表達(dá)與促進LIF的適度表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R245

【參考文獻(xiàn)】

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1 鄒德輝;盧宗孝;晏s，

本文編號：2304243