蒙藥材懸鉤子木的化學(xué)成分及其質(zhì)量控制研究
本文選題:懸鉤子木 + 化學(xué)成分; 參考:《內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:目的研究“促疫熱成熟”蒙藥—懸鉤子木(RUBI RAMULUS)的質(zhì)量控制指標(biāo)性成分,和質(zhì)量控制方法及其對(duì)免疫細(xì)胞增殖的影響。通過(guò)對(duì)化學(xué)成分系統(tǒng)研究和指紋圖譜結(jié)合HPLC-MS/MS分析鑒定研究,選取質(zhì)量控制指標(biāo)性成分。建立藥材鑒別和含量測(cè)定方法,并對(duì)不同產(chǎn)地、加工方法、商品藥材進(jìn)行質(zhì)量研究。檢測(cè)懸鉤子木水提物和不同極性溶劑萃取部位,對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞的免疫增殖影響。本論文為闡明懸鉤子木的藥效物質(zhì)基礎(chǔ),建立質(zhì)量控制方法,保證臨床用藥的安全可靠提供依據(jù)。方法1)化學(xué)成分分離:利用反相硅膠柱色譜,Sephadex LH-20和制備高效液相等方法,對(duì)懸鉤子木的醇提物進(jìn)行分離純化,并運(yùn)用1D,2D-NMR,HRMS等波譜分析法和文獻(xiàn)對(duì)照法鑒定化合物結(jié)構(gòu)。2)采用HPLC建立藥材指紋圖譜,利用HPLC-MS/MS對(duì)懸鉤子木指紋圖譜中化學(xué)成分進(jìn)行快速鑒定,并通過(guò)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)及部分對(duì)照品的一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)譜信息比較,推測(cè)化合物結(jié)構(gòu)。3)對(duì)指標(biāo)成分表兒茶素與主成分咖啡酸和鞣花酸進(jìn)行TLC鑒別與HPLC含量測(cè)定研究。4)采用CCK-8細(xì)胞染色法檢測(cè)懸鉤子木萃取物石油醚層、氯仿層、乙酸乙酯層、正丁醇層和水層對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增值影響。結(jié)果1)從懸鉤子木乙酸乙酯萃取物中分離得到19個(gè)化合物,其中3個(gè)新化合物,分別為1α,2β,3β,19α-四羥基-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),1,6-二咖啡;-葡萄糖(11),懸鉤子木質(zhì)素A(14);16個(gè)已知化合物,分別為香葉基-1-O-α-D-呋喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),2α,3α,19α,24-四羥基-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),2α,3α,19α-三羥基-23-酮-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),3α,19α,24-三羥基-2-氧-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(4),2α,3β,19α-三羥基-23-酮-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),2α,3β,19α,23-四羥基-烏蘇-12-烯-28-酸-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),2α,3β,19α-三羥基-23,28-二酸-烏蘇-12-烯-28-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),鞣花酸(9),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10),7S,8S-蘇式-3',4,7,9-四羥基-5',3-二甲氧基8-O-4'-新木脂素-9'-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(12),7S,8S-蘇式-3',4,9-三羥基-3-甲氧-7,8-二氫苯并呋喃-1'-丙醇基新木脂素-9'-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(13),對(duì)羥基桂皮酸(15),七葉內(nèi)酯(16),咖啡酸(17),表兒茶素(18),兒茶素(19)。2)建立懸鉤子木HPLC指紋圖譜測(cè)定方法,并對(duì)9批次不同來(lái)源的懸鉤子木藥材進(jìn)行了初步的指紋圖譜研究;HPLC-MS/MS分析鑒定懸鉤子木藥材指紋圖譜中17個(gè)化學(xué)成分,包括5個(gè)黃酮類(lèi)化合物,6個(gè)三萜皂苷,5個(gè)酚酸類(lèi)化合物和1個(gè)香豆素類(lèi)化合物。首次對(duì)懸鉤子木中三萜皂苷化合物的ESI質(zhì)譜裂解規(guī)律進(jìn)行總結(jié)。3)對(duì)7個(gè)不同批次的藥材中表兒茶素,咖啡酸和鞣花酸進(jìn)行準(zhǔn)確的TLC鑒別與HPLC含量測(cè)定。4)活性檢測(cè)表明懸鉤子木水提物提取物具有促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖作用,石油醚層、乙酸乙酯層、氯仿層、正丁醇層和水層均無(wú)明顯的淋巴細(xì)胞增殖促進(jìn)作用。結(jié)論化合物5,11,14為新化合物,化合物1,3,4,5-12,18,19為首次從該植物中得到;首次建立懸鉤子木藥材指紋圖譜及HPLC-MS/MS鑒定方法,為后續(xù)血清藥物化學(xué)研究奠定了基礎(chǔ);首次以表兒茶素為指標(biāo)性成分建立懸鉤子木藥材的質(zhì)量控制方法,為懸鉤子木質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供指導(dǎo)依據(jù);首次以CCK-8細(xì)胞染色法檢測(cè)懸鉤子木水提物促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖作用,推測(cè)可能活性物質(zhì)為其中的水溶性化合物。
[Abstract]:Objective To study the quality control index components and quality control methods and the influence of quality control methods on the proliferation of spleen lymphocytes in mice by HPLC - MS / MS .
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R29
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1918440
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