本文關(guān)鍵詞：穴位電針對(duì)面神經(jīng)損傷后面神經(jīng)核中N-cad、E-cad及P-cad mRNA表達(dá)的影響　出處：《西南醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:通過(guò)建立家兔面神經(jīng)上頰支壓榨性損傷模型,并予以穴位電針治療,采用原位雜交法檢測(cè)家兔面神經(jīng)損傷后面神經(jīng)核中粘附分子N-cad、E-cad及P-cad mRNA的表達(dá)情況,探討穴位電針對(duì)面神經(jīng)受損后面神經(jīng)核中N-cad、E-cad及P-cad mRNA表達(dá)的影響。方法:選用52只家兔,將其分為正常對(duì)照組、手術(shù)組、電針治療組三個(gè)實(shí)驗(yàn)組;其中正常對(duì)照組4只,手術(shù)組(24只)和電針治療組(24只)按術(shù)后六個(gè)時(shí)間點(diǎn)(術(shù)后1天、4天、7天、14天、21天、28天),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別選取4只。正常對(duì)照組不作任何處理,直接經(jīng)經(jīng)心灌注、固定,取腦橋中下段腦組織制作石蠟切片;手術(shù)組、電針治療組建立右側(cè)面神經(jīng)的上頰支壓榨性損傷模型,且損傷程度符合SunderlandⅣ度。術(shù)后兩小時(shí),電針治療組電針刺激頰車、地倉(cāng)、翳風(fēng)、顴繆、陽(yáng)白及四白穴30分鐘,合谷穴僅埋針不予電刺激,每天1次;手術(shù)組術(shù)后不作任何處理。電針治療組和手術(shù)組于術(shù)后六個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)取家兔腦橋中下部的腦組織,并制作石蠟切片。三個(gè)實(shí)驗(yàn)組均行H-E染色,在光學(xué)顯微鏡下確認(rèn)面神經(jīng)核位置,并觀察面神經(jīng)受損后面神經(jīng)核中運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)變化;然后用原位雜交法檢測(cè)面神經(jīng)核運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中N-cad、E-cad及P-cad mRNA的表達(dá)情況,光鏡下計(jì)數(shù)有陽(yáng)性表達(dá)的鈣粘附分子細(xì)胞數(shù),使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:在光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組面神經(jīng)核均位于腦橋腹外側(cè),展神經(jīng)核的前外側(cè)。正常對(duì)照組粘附分子N-cad、E-cad和P-cad均無(wú)陽(yáng)性表達(dá),且E-cad、P-cad無(wú)論在電針治療組還是手術(shù)組術(shù)后1、4、7、14、21、28天均無(wú)陽(yáng)性表達(dá)。表現(xiàn)為面神經(jīng)核運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元經(jīng)dab染色后,細(xì)胞漿及軸突內(nèi)均無(wú)棕黃色顆粒出現(xiàn),細(xì)胞呈藍(lán)色。經(jīng)h e染色后,正常對(duì)照組面神經(jīng)核運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元細(xì)胞呈不規(guī)則的多角形,細(xì)胞核圓,居中,核仁明顯,似“魚(yú)眼狀”,胞漿內(nèi)可見(jiàn)散在的藍(lán)色尼氏體。n-cad在電針治療組和手術(shù)組的術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)(手術(shù)組術(shù)后28天除外)均有陽(yáng)性表達(dá),表現(xiàn)為面神經(jīng)核運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的細(xì)胞漿和(或)軸突內(nèi)可見(jiàn)棕黃色顆粒(dab顯色)。手術(shù)后1天,手術(shù)組出現(xiàn)了n-cad陽(yáng)性細(xì)胞(n-cad14.67±1.52),電針治療組在同一時(shí)間點(diǎn),n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(n-cad21.67±3.51)較手術(shù)組增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05)。手術(shù)組和電針治療組神經(jīng)元形態(tài)較正常對(duì)照組無(wú)明顯變化,手術(shù)后4天,手術(shù)組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(n-cad29.67±3.51)有所增加,電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)(n-cad37.00±1.00)較術(shù)后1天亦增加,電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較手術(shù)組多,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05)。手術(shù)組神經(jīng)元出現(xiàn)胞體腫脹、核邊置、尼氏體數(shù)量減少等細(xì)胞變性改變;電針治療組細(xì)胞變性改變不明顯。手術(shù)后7天,手術(shù)組和電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)進(jìn)一步增加(手術(shù)組n-cad44.67±3.06、電針治療組n-cad120.00±8.71),其中,電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)達(dá)最大值,多于手術(shù)組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.01)。此時(shí),手術(shù)組變性的神經(jīng)元增多,出現(xiàn)核仁消失的神經(jīng)元死亡表現(xiàn);電針治療組未見(jiàn)神經(jīng)元死亡現(xiàn)象。手術(shù)后14天,手術(shù)組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量達(dá)到高峰(n-cad58.00±7.21),而電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較前一個(gè)時(shí)間點(diǎn)有所減少(n-cad76.00±4.00),但該時(shí)間點(diǎn)電針治療組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)仍比手術(shù)組多,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05)。此時(shí),手術(shù)組神經(jīng)元出現(xiàn)核膜破裂,胞核溶解,核仁消失等神經(jīng)元死亡改變;電針治療組僅有數(shù)個(gè)神經(jīng)元出現(xiàn)神經(jīng)元死亡表現(xiàn),可見(jiàn)神經(jīng)元核仁及尼氏體重現(xiàn)等神經(jīng)元恢復(fù)現(xiàn)象。手術(shù)后21天,手術(shù)組n-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較前一個(gè)時(shí)間點(diǎn)減少(N-cad 31.67±4.73),電針治療組N-cad陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少不明顯(N-cad 70.33±9.07),電針治療組N-cad標(biāo)記的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)仍然較手術(shù)組多,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.01)。該時(shí)間點(diǎn)手術(shù)組神經(jīng)元失去正常形態(tài)結(jié)構(gòu),但胞漿內(nèi)尼氏體有增多的趨勢(shì),說(shuō)明神經(jīng)元形態(tài)開(kāi)始恢復(fù);電針治療組可見(jiàn)核仁回歸中位,呈“魚(yú)眼狀”的恢復(fù)的神經(jīng)元增多。手術(shù)后第28天,手術(shù)組N-cad無(wú)陽(yáng)性表達(dá),而電針治療組N-cad有陽(yáng)性表達(dá)(N-cad 52.33±2.52)。電針治療組與手術(shù)組相比較,差異有顯著的意義(p㩳0.01)。此時(shí),手術(shù)組和電針治療組神經(jīng)元形態(tài)基本恢復(fù)。結(jié)論:1.面神經(jīng)損傷后1天即出現(xiàn)N-cad的陽(yáng)性表達(dá),術(shù)后每個(gè)時(shí)間點(diǎn)(手術(shù)組術(shù)后28天除外)N-cad的陽(yáng)性表達(dá)一直存在,而正常對(duì)照組無(wú)N-cad的陽(yáng)性表達(dá)�？梢哉J(rèn)為,N-cad參與了面神經(jīng)損傷修復(fù)的過(guò)程。2.穴位電針能促進(jìn)N-cad的持續(xù)高表達(dá),使高表達(dá)高峰提前及持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng),且這種高表達(dá)表現(xiàn)在H-E染色切片上對(duì)應(yīng)的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的改變上,這種形態(tài)學(xué)上的積極變化提示神經(jīng)元的功能狀態(tài),說(shuō)明穴位電針對(duì)面神經(jīng)再生的促進(jìn)作用可能是通過(guò)維持粘附分子的高表達(dá),從而影響信息分子的傳導(dǎo)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。3.本實(shí)驗(yàn)中E-cad和P-cad未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá),說(shuō)明這兩個(gè)粘附分子未參與面神經(jīng)損傷修復(fù)的過(guò)程。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of N - cad , E - cad and P - cad mRNA in the nucleus of facial nerve after facial nerve injury in rabbits . 璁哄湪鐢?shù)閽堟踩潠椌l勮繕鏄墜鏈粍鏈悗1,4,7,14,21,28澶╁潎鏃犻槼鎬ц〃杈，

本文編號(hào)：1411230