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抑癌基因TCF21對肺癌細(xì)胞A549增殖和遷移的影響

發(fā)布時間:2017-10-09 08:21

  本文關(guān)鍵詞:抑癌基因TCF21對肺癌細(xì)胞A549增殖和遷移的影響


  更多相關(guān)文章: TCF21 非小細(xì)胞肺癌 抑癌基因 腺病毒載體


【摘要】:目的:通過檢測非小細(xì)胞肺癌組織中(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)抑癌基因TCF21的表達(dá)情況,探討其與NSCLC發(fā)生、發(fā)展及臨床特征間的相互關(guān)系。進而運用基因重組等分子生物學(xué)手段,探討抑癌基因TCF21治療肺癌的可行性、有效性。方法:非選擇性入組肺癌患者206例作為實驗組,正常肺組織60例作為對照組;通過免疫組化(SP法)檢測各組織TCF21表達(dá)情況,分析其與NSCLC患者臨床特征間的相互關(guān)系;采用細(xì)菌內(nèi)同源重組法構(gòu)建重組TCF21腺病毒載體,并通過腺病毒包裝實驗制備出重組TCF21腺病毒;將重組TCF21腺病毒轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,采用熒光倒置顯微鏡及Real-Time PCR檢測重組腺病毒TCF21基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)情況;通過MTT及細(xì)胞遷移實驗分別檢測細(xì)胞增殖及細(xì)胞遷移能力。結(jié)果:1)NSCLC組織中TCF21表達(dá)明顯低于正常肺組織(P0.05)。TCF21的低表達(dá)、與腫瘤的臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P0.05);2)經(jīng)基因測序鑒定證實重組TCF21腺病毒載體(p Ad-TCF21)構(gòu)建成功。并成功制備出重組TCF21腺病毒,病毒滴度為5.6×1010pfu/ml,符合實驗的要求;3)重組TCF21腺病毒(Ad-TCF21)感染A549細(xì)胞后通過Real-Time PCR檢測表明目的基因蛋白在A549細(xì)胞中成功表達(dá),且表達(dá)TCF21基因后A549細(xì)胞的增殖及侵襲能力受到抑制。結(jié)論:TCF21基因在NSCLC的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用,它的功能缺失可能是肺癌發(fā)生發(fā)展的重要機制之一;本實驗成功制備了重組TCF21腺病毒,并證明其對肺癌細(xì)胞的增殖及遷移能力有明顯抑制作用,為進一步探索肺癌的基因治療方法奠定一定的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:TCF21 非小細(xì)胞肺癌 抑癌基因 腺病毒載體
【學(xué)位授予單位】:貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R734.2
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • 英文摘要5-8
  • 略縮詞表8-9
  • 引言9-10
  • 材料與方法10-28
  • 結(jié)果28-38
  • 討論38-42
  • 結(jié)論42-43
  • 參考文獻43-47
  • 綜述47-57
  • 參考文獻54-57
  • 作者簡歷57-58
  • 致謝58-59
  • 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 唐俊明;郭凌鄖;孔霞;楊建業(yè);潘國棟;陳龍;黃永章;王家寧;;細(xì)菌內(nèi)同源重組快速構(gòu)建和制備表達(dá)hSDF-1α的重組腺病毒[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2007年05期

2 熊亮;謝富華;趙樹勇;阮杰;馬華謀;林觀平;周克元;;以Ad-Easy載體系統(tǒng)快速構(gòu)建PTEN重組腺病毒表達(dá)載體[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年04期

3 張有為;王銳;宋海珠;黃桂春;易俊;鄭蕓;王靖華;陳龍邦;;非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抑癌基因甲基化譜的研究[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2010年07期

4 吳莪如;肺癌的基因治療研究現(xiàn)狀[J];醫(yī)學(xué)理論與實踐;1999年02期

5 王家寧,黃永章,孔霞,郭凌鄖;細(xì)菌內(nèi)同源重組快速構(gòu)建和制備表達(dá)β-半乳糖苷酶的重組腺病毒[J];鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年01期

6 唐俊明;黃永章;郭凌鄖;潘國棟;孔霞;楊建業(yè);王家寧;;細(xì)菌內(nèi)同源重組法構(gòu)建pAd-EGFP-hSDF-1α腺病毒質(zhì)粒[J];鄖陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年04期

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本文編號:999130

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