抑癌基因TCF21對肺癌細(xì)胞A549增殖和遷移的影響
本文關(guān)鍵詞:抑癌基因TCF21對肺癌細(xì)胞A549增殖和遷移的影響
更多相關(guān)文章: TCF21 非小細(xì)胞肺癌 抑癌基因 腺病毒載體
【摘要】:目的:通過檢測非小細(xì)胞肺癌組織中(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)抑癌基因TCF21的表達(dá)情況,探討其與NSCLC發(fā)生、發(fā)展及臨床特征間的相互關(guān)系。進而運用基因重組等分子生物學(xué)手段,探討抑癌基因TCF21治療肺癌的可行性、有效性。方法:非選擇性入組肺癌患者206例作為實驗組,正常肺組織60例作為對照組;通過免疫組化(SP法)檢測各組織TCF21表達(dá)情況,分析其與NSCLC患者臨床特征間的相互關(guān)系;采用細(xì)菌內(nèi)同源重組法構(gòu)建重組TCF21腺病毒載體,并通過腺病毒包裝實驗制備出重組TCF21腺病毒;將重組TCF21腺病毒轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,采用熒光倒置顯微鏡及Real-Time PCR檢測重組腺病毒TCF21基因在A549細(xì)胞中的表達(dá)情況;通過MTT及細(xì)胞遷移實驗分別檢測細(xì)胞增殖及細(xì)胞遷移能力。結(jié)果:1)NSCLC組織中TCF21表達(dá)明顯低于正常肺組織(P0.05)。TCF21的低表達(dá)、與腫瘤的臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P0.05);2)經(jīng)基因測序鑒定證實重組TCF21腺病毒載體(p Ad-TCF21)構(gòu)建成功。并成功制備出重組TCF21腺病毒,病毒滴度為5.6×1010pfu/ml,符合實驗的要求;3)重組TCF21腺病毒(Ad-TCF21)感染A549細(xì)胞后通過Real-Time PCR檢測表明目的基因蛋白在A549細(xì)胞中成功表達(dá),且表達(dá)TCF21基因后A549細(xì)胞的增殖及侵襲能力受到抑制。結(jié)論:TCF21基因在NSCLC的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用,它的功能缺失可能是肺癌發(fā)生發(fā)展的重要機制之一;本實驗成功制備了重組TCF21腺病毒,并證明其對肺癌細(xì)胞的增殖及遷移能力有明顯抑制作用,為進一步探索肺癌的基因治療方法奠定一定的基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:TCF21 非小細(xì)胞肺癌 抑癌基因 腺病毒載體
【學(xué)位授予單位】:貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R734.2
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- 英文摘要5-8
- 略縮詞表8-9
- 引言9-10
- 材料與方法10-28
- 結(jié)果28-38
- 討論38-42
- 結(jié)論42-43
- 參考文獻43-47
- 綜述47-57
- 參考文獻54-57
- 作者簡歷57-58
- 致謝58-59
- 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集59
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條
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,本文編號:999130
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