本文關(guān)鍵詞：IL-37抑制小鼠Lewis肺癌細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： IL-37 T細(xì)胞免疫 Lewis肺癌 重組腺病毒

【摘要】：背景:近年來,肺癌的發(fā)病率和死亡率在所有腫瘤中增長是最快的,它已經(jīng)成為威脅人類健康和生命的最常見的惡性腫瘤之一[1]。肺癌發(fā)病是由多種因素共同作用形成的,其病因至今尚不完全明確。大量研究資料表明:吸煙、職業(yè)和環(huán)境接觸、既往肺部慢性感染及遺傳等因素是肺癌發(fā)生的高危因素[1]。2000年,Kumar等[2]首次發(fā)現(xiàn)了IL-37。IL-37是白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1家族的第7個成員,即前體肽IL-1F7,又稱IL-1H4。絕大多數(shù)經(jīng)典IL-1家族成員的受體、信號傳導(dǎo)和功能已經(jīng)得到了廣泛而深入的研究[2]。然而,對于IL-37,人們?nèi)匀恢跎�。最近研究顯示,IL-37在原發(fā)性肝癌中有較強(qiáng)的抑癌作用[3]。但目前IL-37對肺癌的抑癌作用還不清楚。因此,我們提出假說,IL-37對肺癌細(xì)胞增殖可能有抑制作用,我們的研究就是圍繞這一假說進(jìn)行開展。本研究通過檢測外源性IL-37對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化增殖的影響,探討其對T細(xì)胞免疫應(yīng)答的作用,并通過應(yīng)用重組人IL-37腺病毒(以下簡稱為Adv-IL-37)轉(zhuǎn)染肺腺癌細(xì)胞系Lewis lung cell(以下簡稱為LLC),分別觀測其對于C57BL/6小鼠和裸鼠肺癌模型中肺癌發(fā)病的病理進(jìn)程的影響,探討其影響的可能作用機(jī)制。目的:研究外源性IL-37對肺癌細(xì)胞增殖的抑制作用并探討其可能作用機(jī)制,為肺癌的臨床治療提供新的研究靶點(diǎn)。方法:通過Adv-IL-37轉(zhuǎn)染LLC細(xì)胞后,Elisa和Western檢測轉(zhuǎn)染Adv-IL-37轉(zhuǎn)染后的LLC細(xì)胞IL-37的表達(dá)情況。流式細(xì)胞儀分析轉(zhuǎn)染IL-37后LLC細(xì)胞的增殖能力、細(xì)胞周期及凋亡情況。建立C57BL/6小鼠LLC肺腫瘤模型,通過測量小鼠LLC肺癌的腫瘤體積及體重,評價IL-37對小鼠Lewis肺癌的冶療效果。體外實(shí)驗(yàn)研究外源性IL-37對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化及增殖的影響。建立裸鼠LLC肺腫瘤模型,體內(nèi)驗(yàn)證IL-37對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化及增殖影響,并評價其在小鼠體內(nèi)抑瘤作用。通過對比C57BL/6小鼠與裸鼠結(jié)果差異性,從而進(jìn)一步驗(yàn)證外源性IL-37對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞增殖活化的影響。結(jié)果:Adv-IL-37腺病毒能成功轉(zhuǎn)染LLC細(xì)胞。通過Elisa及Western結(jié)果顯示IL-37能夠在轉(zhuǎn)染了Adv-IL-37的LLC細(xì)胞中高效且穩(wěn)定的表達(dá)。Adv-IL-37轉(zhuǎn)染對LLC細(xì)胞的體外增殖能力無明顯影響。Adv-IL-37轉(zhuǎn)染對LLC細(xì)胞的細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡無明顯影響。在C57BL/6小鼠LLC肺腫瘤治療模型中證實(shí)IL-37對LLC肺癌的發(fā)生發(fā)展有抑制作用。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)IL-37對CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化及增殖有促進(jìn)作用。在裸鼠LLC肺腫瘤治療模型中證實(shí)IL-37對LLC肺癌的發(fā)生發(fā)展未見明顯抑制作用。通過分析C57BL/6小鼠與裸鼠IL-37抑瘤效果的差異性,進(jìn)一步驗(yàn)證了IL-37通過促進(jìn)CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞活化、增殖來抑制腫瘤生長,從而達(dá)到抑制腫瘤生長的作用。結(jié)論:Adv-IL-37轉(zhuǎn)染對LLC細(xì)胞的體外增殖能力無明顯影響。Adv-IL-37轉(zhuǎn)染對LLC細(xì)胞的細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡無明顯影響。IL-37對LLC所致正常小鼠Lewis肺癌有抑制作用,但對其所致缺少T細(xì)胞的裸鼠的Lewis肺癌生長無抑制作用。IL-37通過激活T細(xì)胞觸發(fā)腫瘤免疫,發(fā)揮抗腫瘤的作用。
【關(guān)鍵詞】：IL-37 T細(xì)胞免疫 Lewis肺癌 重組腺病毒
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-11
• 第2章 材料與方法11-24
• 2.1 材料11-15
• 2.1.1 主要儀器11-12
• 2.1.2 主要試劑購買12-13
• 2.1.3 主要試劑的配制13-15
• 2.2 方法15-23
• 2.2.1 IL-37腺病毒載體的構(gòu)建15
• 2.2.2 LLC 腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)(LLC 細(xì)胞系由上海細(xì)胞庫提供)15-16
• 2.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染16-17
• 2.2.4 檢測IL-37在LLC細(xì)胞中的表達(dá)情況17-20
• 2.2.5 CCK8檢測病毒轉(zhuǎn)染后LLC細(xì)胞的增殖能力變化20
• 2.2.6 檢測病毒轉(zhuǎn)染后LLC細(xì)胞周期的變化20-21
• 2.2.7 檢測病毒轉(zhuǎn)染后LLC細(xì)胞凋亡的變化21
• 2.2.8 小鼠T細(xì)胞的分離、純化與培養(yǎng)21-22
• 2.2.9 IL-37刺激T淋巴細(xì)胞增殖及活化22-23
• 2.2.10 建立實(shí)驗(yàn)動物肺癌治療模型23
• 2.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-29
• 3.1 培養(yǎng)中的LLC細(xì)胞形態(tài)24
• 3.2 腺病毒轉(zhuǎn)染LLC細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率24-25
• 3.3 轉(zhuǎn)染后LLC細(xì)胞IL-37基因表達(dá)情況25
• 3.4 病毒轉(zhuǎn)染對LLC細(xì)胞的增殖及周期的影響25-26
• 3.5 病毒轉(zhuǎn)染對各組LLC細(xì)胞凋亡的影響26-27
• 3.6 在C57BL/6 小鼠與裸鼠Lewis肺癌模型中IL-37抑癌作用27-28
• 3.7 IL-37刺激T淋巴細(xì)胞的活化及增殖28-29
• 第4章 討論29-31
• 第5章 結(jié)論與展望31-32
• 5.1 結(jié)論31
• 5.2 不足之處和展望31-32
• 致謝32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-43
• 參考文獻(xiàn)41-43

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝軍平;龍穎穎;王石生;楊青;;二烯丙基二硫化物對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞增殖的抑制作用[J];山東醫(yī)藥;2013年08期

2 馬海英,崔麗,李艷茹,潘力;拓?fù)涮婵祵ewis肺癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響[J];電子顯微學(xué)報;2004年04期

3 吳萬垠;柴小姝;張海波;劉偉勝;;中藥聯(lián)合長春瑞濱對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖抗原的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年08期

4 成澤東;陳以國;;針刺聯(lián)合紫杉醇對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的影響[J];針刺研究;2007年03期

5 徐志剛;陳立;呂曉艷;李偉;項(xiàng)丹;李志軍;;塞來昔布對Lewis肺癌細(xì)胞的增殖抑制作用及其機(jī)制[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年01期

6 吳天鵬,熊治國;組織胺對Lewis肺癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[J];腫瘤防治研究;1997年06期

7 輦偉奇;敖緒軍;陳芳琳;陳正堂;;CXCR4陽性Lewis肺癌細(xì)胞耐藥實(shí)驗(yàn)研究[J];局解手術(shù)學(xué)雜志;2009年06期

8 張燕,岳婧,蘇長青;放射線誘發(fā)Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[J];實(shí)用癌癥雜志;2001年04期

9 吳萬垠,柴小姝,劉偉勝;華蟾素聯(lián)合長春瑞濱對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞周期的影響[J];中國癌癥雜志;2004年04期

10 張伶,田聆,陳平,張汝,李剛,侯建梅,姚兵,魏于全;反義Cyclin B1提高Lewis肺癌細(xì)胞對健擇化學(xué)敏感性的體內(nèi)外研究[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 吳萬垠;柴小姝;劉偉勝;;中藥聯(lián)合長春瑞濱對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖抗原的影響[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

2 姜輝;房征宇;董矜;田亞平;;不同藥物調(diào)控一氧化氮產(chǎn)生對Lewis肺癌細(xì)胞增殖的影響[A];第十屆全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

3 馬海英;崔麗;李艷茹;潘力;;拓?fù)涮婵祵ewis肺癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響[A];第十三屆全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2004年

4 劉真;田志雄;吳光耀;周軍;黃娟;;化療藥物誘導(dǎo)Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的高分辨魔角旋轉(zhuǎn)磁共振質(zhì)子波譜初步研究(摘要)[A];湖北省抗癌協(xié)會腫瘤影像專業(yè)委員會成立暨第一屆學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 萬榮;IL-37抑制小鼠Lewis肺癌細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[D];南昌大學(xué);2016年

2 李志宏;紫杉醇鍵合膠束對Lewis肺癌細(xì)胞放療增敏效應(yīng)的初步研究[D];吉林大學(xué);2011年

3 李曉麗;照射時間延長對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞殺傷作用的影響[D];青島大學(xué);2008年

4 王菲;Lewis肺癌細(xì)胞與其衍生細(xì)胞系的比較研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 陶新全;~（18）氟—氟代脫氧葡萄糖誘導(dǎo)Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年

6 靳福鵬;益氣養(yǎng)陰解毒方對小鼠Lewis肺癌細(xì)胞增殖及凋亡影響的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

，

本文編號：991420