本文關(guān)鍵詞：肝癌細(xì)胞HepG2株線粒體LETM1基因突變研究

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【摘要】：目的：構(gòu)建LETM1基因真核表達(dá)載體,并檢測(cè)肝癌HepG2細(xì)胞株的LETM1基因突變,探討線粒體LETM1基因在肝癌發(fā)生中的意義。方法：從HepG2株細(xì)胞中提取mRNA及合成cDNA,設(shè)計(jì)并合成LETM1基因引物。用PCR方法擴(kuò)增LETM1基因,連接到真核表達(dá)載體pCMV-3Tag-6、 pCMV-3Myc-2A上,構(gòu)建重組質(zhì)粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1。將質(zhì)粒進(jìn)行HindⅢ/Xho Ⅰ雙酶切、測(cè)序和檢測(cè)突變位點(diǎn)。結(jié)果：成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1;測(cè)序LETM1基因序列長(zhǎng)度為5462bp；肝癌HepG2細(xì)胞株的LETM1基因突變發(fā)生于G148A(纈氨酸→異亮氨酸)、G320A(甘氨酸→天冬酰胺)、G344A(精氨酸→組氨酸)、A1760G(賴氨酸→精氨酸)和A1825G(蘇氨酸→丙氨酸)。結(jié)論：1.LETM1基因突變最常發(fā)生于G148A(纈氨酸→異亮氨酸)和A1760G(賴氨酸葉精氨酸)；其次為G344A(精氨酸→組氨酸)。G320A(甘氨酸→天冬酰胺)和A1825G(蘇氨酸→丙氨酸)亦發(fā)生突變。2.線粒體LETM1基因的突變可能與肝癌的發(fā)生有一定的關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：LETM1 線粒體 基因 HepG2細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 英文縮略詞表8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 材料與方法12-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)儀器、試劑和材料12-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料12
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)器材12
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)器材12-13
• 2.1.4 引物的設(shè)計(jì)13
• 2.1.5 常用試劑的配制13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-21
• 2.2.1 HepG2細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)14
• 2.2.2 mRNA提取及cDNA合成14
• 2.2.3 擴(kuò)增LETM1基因14-15
• 2.2.4 基因的克隆15-17
• 2.2.5 基因序列測(cè)序17-21
• 第三章 結(jié)果21-24
• 3.1 PCR擴(kuò)增目的基因21
• 3.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建21-22
• 3.3 基因突變檢測(cè)22-24
• 第四章 討論24-27
• 第五章 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 致謝31-32
• 綜述32-43
• 參考文獻(xiàn)41-43

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 李瑋;白云;李云婷;許素菊;;甲胎蛋白的臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)[J];臨床誤診誤治;2007年08期

2 郭韜;魏強(qiáng);;線粒體DNA突變與腫瘤發(fā)生的關(guān)系[J];生物學(xué)通報(bào);2009年11期

3 張U，

本文編號(hào)：990672