本文關(guān)鍵詞：Med19基因敲除對不同P53背景乳腺癌細(xì)胞紫杉醇化療敏感性的影響

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【摘要】：目的:探討Med19基因敲除是否增加不同P53背景乳腺癌細(xì)胞對紫杉醇化療的敏感性。方法:以不同P53背景的乳腺癌細(xì)胞MCF-7(P53野生型)和MDA-MB-231(P53突變型)為研究對象,分別進(jìn)行Med19 RNA干擾(RNAi)慢病毒感染(Med19基因敲除組,即KD組),并設(shè)置空載體感染對照組(NC組)和陰性對照組(CON組)組。熒光顯微鏡觀察慢病毒感染效率,Western Blot檢測Med19、P53、磷酸化P53(p P53)、P21蛋白的表達(dá)水平變化;MTT法檢測敲除Med19基因前后不同劑量紫杉醇對癌細(xì)胞的增殖抑制率,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期,觀察Med19基因表達(dá)水平對不同P53背景乳腺癌細(xì)胞的紫杉醇化療敏感性的影響。結(jié)果:與CON組和空載體組NC組相比,兩種乳腺癌細(xì)胞KD組的Med19蛋白表達(dá)水平顯著下降(P0.05);MCF-7細(xì)胞的P53、p P53、P21蛋白表達(dá)上調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MDA-MB-231細(xì)胞的P53、p P53、P21蛋白表達(dá)組間比較差異無顯著性(P0.05)。MTT實(shí)驗(yàn)顯示,紫杉醇抑制兩種乳腺癌細(xì)胞的生長增殖,在濃度為(0.01~50)μg/ml范圍內(nèi),隨著藥物濃度的增加,MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞增殖抑制率增加,呈濃度依賴性,不同濃度之間的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);在MCF-7細(xì)胞中紫杉醇對KD組的抑制率顯著高于CON組及NC組(P0.05),同時(shí)計(jì)算KD組IC50(6.32±1.31)顯著低于CON(14.1±3.67)及NC組(13.5±3.23)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MDA-MB-231細(xì)胞紫杉醇對KD組細(xì)胞組的抑制率雖高于CON組及NC組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),KD組IC50(9.58±2.38)較CON(13.13±3.48)及NC組(11.02±3.54)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。10μg/ml的紫杉醇作用于兩種乳腺癌細(xì)胞48h后,流式細(xì)胞術(shù)檢測到紫杉醇作用于MCF-7細(xì)胞KD組細(xì)胞的凋亡率為(59.77±2.31)%顯著高于NC組(36.42±4.27)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),表明敲除Med19基因后促進(jìn)紫杉醇對MCF-7細(xì)胞的凋亡作用;作用于MDA-MB-231細(xì)胞KD組的凋亡率為(40.07±2.21)%,較作用于NC組的凋亡率(35.42±4.16)%雖有增加,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。細(xì)胞周期的檢測結(jié)果顯示,紫杉醇導(dǎo)致兩種乳腺癌細(xì)胞的KD組和NC組均出現(xiàn)G2/M期阻滯;紫杉醇作用于MCF-7細(xì)胞的KD組在導(dǎo)致G2/M期阻滯的[(70.14±1.22)%]同時(shí),G0/G1期細(xì)胞[(10.12±0.95)%]較紫杉醇作用于NC組[(5.52±0.78)%]顯著增加,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:Med19基因敲除增強(qiáng)野生型P53乳腺癌MCF-7細(xì)胞對紫杉醇化療的敏感性,其機(jī)制可能為Med19基因表達(dá)下調(diào),可增強(qiáng)P53基因的表達(dá)活化,通過其下游基因P21,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：Med19 P53 乳腺癌 紫杉醇 藥物敏感性
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-11
• 材料和方法11-20
• 結(jié)果20-29
• 討論29-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 綜述39-48
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表論文48-49
• 中英文縮寫詞表49-50
• 致謝50-51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號(hào)：990286