本文關鍵詞：血清循環(huán)DNA在大腸癌診斷和療效評價方面的應用研究

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【摘要】：背景大腸癌(colorectal cancer,CRC)是常見惡性腫瘤之一,發(fā)病率分別居于男、女性惡性腫瘤的第3位和第2位。新發(fā)病例數(shù)和死亡病例數(shù)呈逐年上升趨勢。據(jù)統(tǒng)計,2012年兩項數(shù)字達到了140萬和69.39萬。由于早期缺乏特異性癥狀,超過半數(shù)患者就診時已屬中晚期,即使接受了手術治療,仍有較高的復發(fā)和轉(zhuǎn)移風險。因此早期診斷和監(jiān)測復發(fā)對大腸癌的治療至關重要。循環(huán)DNA(Circulating DNA)是一種存在于血漿、腦脊液及滑液等體液中的細胞外DNA,主要來源于細胞的凋亡和壞死。據(jù)估算,一個重量100g的腫瘤,每天大約3×1010個細胞的DNA進入血液循環(huán)。血液循環(huán)中的癌細胞和遠處轉(zhuǎn)移的癌細胞同樣釋放循環(huán)DNA。檢測血漿或血清中的循環(huán)DNA猶如“液體活檢(Liquid biopsy)”,不僅可以通過“量”的多少估算腫瘤負荷、評價治療效果,還可以通過檢測遺傳學(如基因突變等)和表觀遺傳學(基因甲基化、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性、雜合性缺失LOH、mi RNAs)的改變判斷良惡性和篩選藥物靶標。更重要的是,循環(huán)DNA的檢測簡便、經(jīng)濟,重復性好。目的本實驗通過比較血清循環(huán)DNA含量及完整性(DNA integrity index)在大腸癌患者、腸道良性病變患者及健康人的區(qū)別的差別來判斷二者是否在大腸癌的診斷方面具有價值,并且研究二者在評估手術大腸癌患者和化療大腸癌患者治療價值方面的價值。方法收集山東省腫瘤醫(yī)院自2014年6月-2015年6月收治的手術大腸癌患者血清標本112例(術前3天,術后7天,術后14天);化療大腸癌患者血清標本36例(第1周期化療前,第3周期化療前);腸道良性疾病患者血清標本46例;健康人血清標本41例。以LINE1基因為擴增引物,檢測血清標本循環(huán)DNA的含量及完整性指數(shù)(完整性的計算按照如下公式計算:完整性指數(shù)=長片段DNA含量/短片段DNA含量)。療效評價按照2009年美國國立癌癥研究所實體瘤客觀療效評定標準修訂版RECIST1.1進行評價。采用SPSS17.0計算機醫(yī)學統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)處理,全部檢驗均為雙側(cè)檢驗,P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1.循環(huán)DNA(Circulating DNA)含量、完整性指數(shù)(DII)與分化程度、分期和有無轉(zhuǎn)移等臨床因素有關(P0.05),與性別、年齡、腫瘤部位和PS評分無關(P0.05)。CEA和CA199與分期和有無轉(zhuǎn)移因素相關(P0.05),和性別、年齡、腫瘤部位、分化程度和PS評分無關(P0.05)。2.循環(huán)DNA(Circulating DNA)含量、CEA和CA199在大腸癌患者、腸道良性疾病患者和健康人之間的差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),三組人群的完整性指數(shù)(DII)則沒有明顯差異(P0.05)。3.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199區(qū)分癌癥患者和非癌癥人群的AUC分別為是0.71、0.67和0.69。4.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199診斷大腸癌的敏感性分別為62.21%、59.46%和43.92%;特異性分別為79.31%、68.97%和96.55%。5.手術大腸癌患者術后7天循環(huán)DNA含量較術前3天增高(P0.05),術后14天較術前3天和術后7天降低(P0.05);術后7天完整性指數(shù)(DII)較術前3天增大(P0.05),術后14天較術后7天降低(P0.05),但高于術前3天(P0.05);術后14天循環(huán)DNA含量和完整性指數(shù)(DII)仍高于健康人水平。6.CR+PR患者化療后循環(huán)DNA含量與化療前相比降低(P0.05),SD患者和PD患者化療后較化療前升高(P均0.05)。3組患者完整性指數(shù)(DII)化療前后的差異無統(tǒng)計學意義(P均0.05)。CR+PR組和SD組患者化療前后CEA、CA199含量的差異無統(tǒng)計學意義(P均0.05);而PD組患者化療后的CEA和CA199含量較化療前升高(P0.05)。結(jié)論1.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)、CEA和CA199與大腸癌患者的分期和轉(zhuǎn)移相關,提示檢測標志物水平有助于評估疾病狀態(tài)。2.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199具有區(qū)分大腸癌患者、腸道良性疾病患者和健康人群的潛在應用價值,完整性指數(shù)(DII)則不具備這種價值。3.循環(huán)DNA含量、CEA和CA199在區(qū)分癌癥患者和非癌癥人群方面具有一定的價值,其中循環(huán)DNA含量的價值最大。4.循環(huán)DNA含量具有最高的診斷敏感性,CA199具有最高的診斷特異性。5.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)在術后呈現(xiàn)出先上升后下降趨勢,可以反應大腸癌瘤體負荷的情況,在觀察期內(nèi)兩個標志物均未恢復健康人水平。6.循環(huán)DNA含量、完整性指數(shù)(DII)、CEA和CA199中,循環(huán)DNA含量的變化可以最好的反應化療療效。
【關鍵詞】：結(jié)直腸癌 循環(huán)DNA 完整性 化療 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應
【學位授予單位】：濟南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 主要符號表11-12
• 第一章 前言12-14
• 第二章 病例和方法14-22
• 2.1 臨床資料14
• 2.2 材料與試劑14-16
• 2.3 檢測方法16-20
• 2.4 療效評價20-21
• 2.5 數(shù)據(jù)處理21-22
• 第三章 結(jié)果22-28
• 3.1 大腸癌患者各腫瘤標志物與臨床病理因素的關系22-23
• 3.2 各腫瘤標志物在健康人、良性腸道疾病和大腸癌患者之間的比較23-24
• 3.3 各標志物臨界值的確定24-25
• 3.4 各標志物的診斷價值25
• 3.5 手術結(jié)直腸癌患者手術前后循環(huán)DNA含量與完整性比較25-26
• 3.6 化療結(jié)直腸癌患者化療前后標志物的變化26-28
• 第四章 討論28-35
• 4.1 大腸癌介紹28-29
• 4.2 腫瘤標志物CEA、CA199介紹29-30
• 4.3 循環(huán)DNA介紹30-32
• 4.4 LINE1基因介紹及本實驗方法優(yōu)勢32
• 4.5 各腫瘤標志物與臨床病理因素關系的分析32-33
• 4.6 各腫瘤標志物診斷價值的比較33
• 4.7 循環(huán)DNA反應腫瘤負荷的價值33-34
• 4.8 循環(huán)DNA反應腫瘤化療療效的價值34
• 4.9 缺點及不足34-35
• 第五章 結(jié)論35-36
• 參考文獻36-40
• 附錄40-44
• 攻讀學位期間取得的研究成果44-45
• 致謝45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李道娟;李倩;賀宇彤;;結(jié)直腸癌流行病學趨勢[J];腫瘤防治研究;2015年03期

2 閆巍;張能維;徐智;阿民布和;朱斌;宮軻;尹剛;孫志鵬;;結(jié)直腸癌患者手術前后循環(huán)DNA水平的變化及其意義[J];中國普通外科雜志;2013年12期

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本文編號：982890