本文關鍵詞：7-二氟甲氧基-5,4’-二—正辛烷氧基異黃酮對SGC-7901胃癌干樣細胞EMT和侵襲的影響

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【摘要】：目的：研究7-二氟甲氧基-5,4'-二-正辛烷氧基異黃酮(7-difluoromhoxyl-5,4'-di-n-octylgenistein, DFOG)抑制人胃癌SGC-7901細胞系干樣細胞(gastric cancer stem-like cells, GCSLCs)特性和逆轉上皮-間充質轉化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)作用及其機制。方法：采用國家發(fā)明專利申請書(國家發(fā)明專利申請?zhí)枮?01210591131.2)中的方法合成DFOG,并行1H和13C核磁共振確證化學結構。體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細胞系細胞。應用干細胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)法富集和擴增球形成細胞(sphere forming cells, SFCs)。與親本細胞對照,應用腫瘤球形成試驗、劃痕法、Transwell侵襲試驗和western blot分別檢測球形成率、細胞遷移率、細胞侵襲率和CD133、CD44和ALDH1蛋白表達水平,鑒別SFCs是否具有GCSLCs特性以及測定不同濃度DFOG(1.0、3.0、10.0μmol/mL)對GCSLCs特性的影響。Western blot分析上皮細胞標志物(E-cadherin)和問充質細胞標志物(N-cadherin)蛋白表達評估EMT表型和DFOG逆轉EMT表型作用。對比分析GCSLCs和親本細胞致癌性轉錄因子Foxml和EMT相關轉錄因子Twistl蛋白表達狀態(tài),通過檢測DFOG、 FoxMl siRNA轉染及兩者聯合處理對FoxMl和Twistl蛋白表達以及GCSLCs特性和EMT表型的影響,探討DFOG作用機制。結果：1.利用專利申請書中的方法合成并得到DFOG 500.0 mg,并利用核磁共振確證其化學結構；2.人胃癌SGC-7901細胞系SFCs較親本細胞具有更高球形成率(P0.05)、更強細胞遷移和侵襲能力(P0.05)和更高CD133、CD44和ALDH1蛋白表達水平P0.05)。3.與親本細胞相比,SFCs N-cadherin表達上調(P0.05)、E-cadherin蛋白表達下調(P0.05)。4.DFOG(1.0、3.0、10.0μmol/mL)以劑量依賴方式抑制GCSLCs球形成(P0.05)、體外遷移和侵襲能力P0.05),并下調CD133、CD44和ALDH1蛋白表達(P0.05)。5.DFOG(1.0、3.0、10.0μmol/mL)降低GCSLCs N-cadherin蛋白表達水平(P0.05),并上調E-cadherin蛋白表達(p0.05)。6.與親本細胞相比, GCSLCs高表達FoxM1蛋白和Twist1蛋白(P0.05)。7.DFOG(1.0、3.0、10.0μmol/mL)抑制GCSLCs FoxMl蛋白和Twist1蛋白表達(P0.05)。8. FoxM1 siRNA轉染與DFOG協作降低GCSLCs FoxMl和Twist1蛋白表達水平P0.05)。9. FoxM1 siRNA增強DFOG抑制GCSLCs球形成能力(P0.05)、遷移和侵襲能力(P0.05)、降低CD133、CD44和ALDH1蛋白表達水平(P0.05)和調節(jié)N-cadherin和E-cadherin蛋白表達作用(P0.05)。結論：1.使用專利申請書方法得到了DFOG,并確證其化學結構。2.人胃癌SGC-7901細胞系SFCs具有GCSLCs特性和EMT表型。3. DFOG具有抑制GCSLCs特性和逆轉EMT表型作用。4. DFOG抑制GCSLCs特性作用涉及其降低GCSLCs FoxMl蛋白表達水平。5. DFOG逆轉EMT表型作用與其抑制Twist1蛋白表達相關。
【關鍵詞】：胃癌 胃癌干細胞 胃癌干樣細胞 7-二氟甲氧基-5 4'-二-正辛烷氧基異黃酮 FoxM1
【學位授予單位】：湖南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-11
• 1 引言11-14
• 2 材料與方法14-19
• 2.1 材料14-16
• 2.2 實驗方法16-19
• 3 結果19-56
• 3.1 DFOG的合成及結構確證19-21
• 3.2 GCSLCs的富集、擴增與鑒別21-31
• 3.3 DFOG對GCSLCs功能及特性的影響31-39
• 3.4 FoxM1下調參與DFOG抑制GCSLCs特性39-56
• 4 討論56-61
• 5 結論61-62
• 參考文獻62-70
• 附錄1：英文縮略詞索引70-71
• 附錄2：綜述71-80
• 參考文獻75-80
• 攻讀碩士學位期間的主要成果80-81
• 致謝81-82

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10 ;[J];;年期

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本文編號：973063