發(fā)布時(shí)間：2017-10-04 16:43

  本文關(guān)鍵詞：DR5mAb-載替加氟高分子材料微球體外靶向肝癌細(xì)胞能力

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【摘要】：原發(fā)性肝癌是全球最常見的惡性腫瘤之一,我國肝癌發(fā)病率和死亡率居全球之首,目前治療手段療效欠佳、毒副作用大,因此,尋求高效、靶向性強(qiáng)的治療手段迫在眉睫。替加氟為常用的抗腫瘤藥,主要適用于消化道腫瘤,如胃癌、肝癌、直腸癌、胰腺癌等,在體內(nèi)經(jīng)肝臟轉(zhuǎn)化為氟尿嘧啶而發(fā)揮抗腫瘤活性,能干擾、拮抗DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成。其毒性只有氟尿嘧啶的1/4-1/7,化療指數(shù)為氟尿嘧啶的2倍；其仍有骨髓抑制等毒副作用,且對(duì)腫瘤組織和正常組織缺乏特異靶向性。近年來,超聲微泡造影劑作為藥物遞送體,在腫瘤治療方面的應(yīng)用受到廣泛關(guān)注。超聲通過定位輻照,靶向擊破載藥微泡,可使藥物得到局部釋放。高分子材料微泡具有較好的穩(wěn)定性,可以延長(zhǎng)載藥微泡在體內(nèi)存留的時(shí)間。腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)是Wiley等發(fā)現(xiàn)的TNF超家族成員,其通過與腫瘤細(xì)胞膜上的相應(yīng)受體結(jié)合來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。目前發(fā)現(xiàn)TRAIL有5種類型受體,其中TRAIL受體1(死亡受體4,DR4)和TRAIL受體2(死亡受體5,DR5)含有細(xì)胞內(nèi)死亡結(jié)構(gòu)域,能夠傳遞細(xì)胞凋亡信號(hào),其他3種受體缺乏胞內(nèi)死亡結(jié)構(gòu)域并能阻斷TRAIL誘導(dǎo)的凋亡。TRAIL與DR5的親和力明顯大于DR4,并可選擇性地介導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡。DR5在大多數(shù)實(shí)體腫瘤中高表達(dá),如肝癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌等,在正常組織幾乎無表達(dá),這為DR5mAb靶向載替加氟探針應(yīng)用于肝癌的治療領(lǐng)域提供了可行的理論基礎(chǔ)。本研究采用親和素-生物素結(jié)合法將DR5mAb與載替加氟高分子材料微球連接,旨在構(gòu)建一種新型、高效的靶向-載藥微球,并觀察其體外靶向結(jié)合肝癌SMMC-7721細(xì)胞株的能力。本課題主要包括以下兩部分內(nèi)容：第一部分DR5mAb-載替加氟高分子材料微球的構(gòu)建及一般特性研究目的構(gòu)建一種DR5mAb-載替加氟主動(dòng)靶向載藥高分子微球,并測(cè)定其一般理化性質(zhì)。方法采用雙乳化法制備替加氟載藥微球,再用碳二亞胺法或生物素-親和素法將DR5mAb與載藥微球連接,構(gòu)建DR5mAb-載替加氟主動(dòng)靶向載藥高分子微球。檢測(cè)載藥微球的一般性質(zhì)；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)抗體連接率,并對(duì)比碳二亞胺法和生物素-親和素法的連接率。結(jié)果DR5mAb-載替加氟高分子材料微球的濃度為2.20×109～3.20×109個(gè)/ml；粒徑分布范圍為457.80nm～955.40nm；平均粒徑為676.38±90.93nm；微球的平均包封率2.54%±0.05%,平均載藥率為63.51%±1.26%；60Coγ射線滅菌前后微泡的特性無顯著性差異；生物素-親和素法的載藥微球抗體連接率高于碳二亞胺法(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建了DR5MAb-載替加氟主動(dòng)靶向載藥高分子微球,其載藥率較高、粒徑均勻、性質(zhì)較穩(wěn)定。第二部分DR5mAb-載替加氟高分子材料微球體外細(xì)胞靶向性的實(shí)驗(yàn)研究目的探索人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721和正常肝細(xì)胞株L02的體外培養(yǎng)條件。以人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721和正常肝細(xì)胞株L02為實(shí)驗(yàn)對(duì)象驗(yàn)證DR5mAb-載替加氟高分子材料微球體外細(xì)胞靶向性。方法體外培養(yǎng)SMMC-7721細(xì)胞,觀察其生長(zhǎng)情況,并確定最佳接種密度。實(shí)驗(yàn)分為3組：非靶向載藥微球-7721組(TLM-7721組)、靶向載藥微球-L02組(TDPM-L02組)、靶向載藥微球-7721組(TDPM-7721組),在普通光鏡及熒光顯微鏡下分別觀察載藥微球與細(xì)胞的結(jié)合情況。結(jié)果在SMMC-7721細(xì)胞和L02細(xì)胞培養(yǎng)過程中,確定均以1×105個(gè)/ml細(xì)胞密度接種。靶向載藥微球-7721組：熒光顯微鏡下SMMC-7721細(xì)胞周圍可見大量紅色微球聚集；非靶向載藥微球-7721組：熒光顯微鏡下SMMC-7721細(xì)胞周圍和表面未見紅色微球聚集；靶向載藥微球-L02組：熒光顯微鏡下正常肝細(xì)胞L02周圍和表面無紅色微球的聚集。結(jié)論DR5mAb-載替加氟主動(dòng)靶向載藥高分子微球可與肝癌細(xì)胞SMCC-7721主動(dòng)靶向結(jié)合,有望為肝癌靶向治療提供一種新的手段和思路。
【關(guān)鍵詞】：載藥微球 替加氟 主動(dòng)靶向 肝癌
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-14
• 前言14-16
• 第一部分 DR5mAb-載替加氟高分子材料微球的構(gòu)建及一般特性研究16-24
• 1 材料與方法16-21
• 2 結(jié)果21-23
• 3 討論23-24
• 第二部分 DR5mAb-載替加氟高分子材料微球體外細(xì)胞靶向性的實(shí)驗(yàn)研究24-31
• 1 材料與方法24-27
• 2 結(jié)果27-29
• 3 討論29-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 全文總結(jié)34-35
• 文獻(xiàn)綜述35-41
• 參考文獻(xiàn)39-41
• 致謝41-42
• 攻讀碩士學(xué)位期間所取得成果42

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1 木拉提·克扎衣別克,高曉黎,郭玉;替加氟脂質(zhì)體在大鼠結(jié)腸中的分布[J];新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年01期

2 曾昭武;王小麗;周偉華;張陽德;;替加氟磁性長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備與質(zhì)量評(píng)價(jià)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2008年45期

3 梁桂媛,方華豐,呂新強(qiáng);替加氟緩釋片的制備[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2000年11期

4 高曉黎,木拉提·克扎衣別克,溫浩;新型替加氟前體脂質(zhì)體大鼠灌胃給藥后的體內(nèi)分布[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2005年12期

5 葉敏;朱珠;付強(qiáng);孫強(qiáng);茅楓;;替加氟乳腺組織穿透及向氟尿嘧啶轉(zhuǎn)化的藥動(dòng)學(xué)研究[J];中國藥學(xué)雜志;2007年01期

6 陸振榮;劉少瓊;臧中林;張秋林;李言杰;許新華;;含硒的替加氟硫代磷酯合成[J];中國新藥雜志;2007年10期

7 曾昭武;王小麗;周偉華;張陽德;;替加氟磁性長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體的制備及在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2008年10期

8 武鳳蘭,李金璽,李海淑;替加氟口服乳劑的二階導(dǎo)數(shù)分光光度測(cè)定[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;1999年09期

9 臧中林;劉少瓊;陳雄;李言杰;周冰;許新華;;替加氟的硒代卵磷脂類化合物的合成與抗癌活性[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2006年12期

10 黃子桐;張迪;吳波;史秋菊;傅鑫;;高效液相色譜法測(cè)定替加氟膠囊中替加氟的含量[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2009年33期

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1 李小菊;於海情;田Z赯，

本文編號(hào)：971745