本文關(guān)鍵詞：硫利達(dá)嗪對(duì)類肝癌干細(xì)胞的殺傷作用研究

  更多相關(guān)文章： THO 肝癌干細(xì)胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡

【摘要】：硫利達(dá)嗪（Thioridazine，THO）在臨床上通常被用于治療精神類疾��；近年來(lái)，，研究發(fā)現(xiàn)THO對(duì)腫瘤細(xì)胞具有殺傷效果，但其對(duì)肝癌干細(xì)胞的殺傷作用還未曾有報(bào)道。腫瘤干細(xì)胞在腫瘤的轉(zhuǎn)移，復(fù)發(fā)及耐藥性方面起著十分重要的作用。本文利用體外懸浮培養(yǎng)富集類腫瘤干細(xì)胞并檢測(cè)藥物THO對(duì)其殺傷效果來(lái)評(píng)價(jià)THO對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的體外抑制效應(yīng)及基礎(chǔ)機(jī)制研究。 通過(guò)檢測(cè)體外懸浮培養(yǎng)類肝癌干細(xì)胞在腫瘤干細(xì)胞相關(guān)因子表達(dá)、耐藥性及細(xì)胞周期等方面因素，顯示在一定程度上其具備腫瘤干細(xì)胞樣特征，磷酸化STAT3，NANOG和XIAP表達(dá)顯著上調(diào)，而Albumin表達(dá)下調(diào)；進(jìn)一步運(yùn)用MTT、Western blotting和細(xì)胞流式等實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了THO對(duì)類肝癌干細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷效果并能誘導(dǎo)caspase依賴的細(xì)胞凋亡，而對(duì)分化的肝癌細(xì)胞影響較弱；此外，THO和化療藥物鹽酸阿霉素(DOX)的聯(lián)合使用顯著增強(qiáng)了其對(duì)肝癌干細(xì)胞和分化的肝癌細(xì)胞的殺傷作用。 本課題實(shí)驗(yàn)結(jié)果首次顯示THO對(duì)體外懸浮培養(yǎng)的類肝癌干細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷能力，可能為今后肝癌的臨床治療帶來(lái)新的希望。
【關(guān)鍵詞】：THO 肝癌干細(xì)胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡
【學(xué)位授予單位】：浙江理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 縮略詞表6-7
• 目錄7-9
• 第一部分 硫利達(dá)嗪對(duì)類肝癌干細(xì)胞的殺傷作用研究9-23
• 1 引言9-10
• 2 材料與方法10-13
• 2.1 材料10
• 2.2 方法10-13
• 2.2.1 肝癌干細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)10-11
• 2.2.2 MTT 檢測(cè)藥物對(duì)肝癌細(xì)胞的殺傷作用11
• 2.2.3 流式檢測(cè)細(xì)胞周期11
• 2.2.4 克隆形成實(shí)驗(yàn)11
• 2.2.5 結(jié)晶紫染色觀察細(xì)胞活性11-12
• 2.2.6 Hoechst33342 染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡12
• 2.2.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡12
• 2.2.8 Western blot 檢測(cè)相關(guān)目的蛋白及細(xì)胞凋亡蛋白12
• 2.2.9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析12-13
• 3 結(jié)果13-21
• 3.1 體外懸浮培養(yǎng)富集肝癌干細(xì)胞13
• 3.2 Western blot 檢測(cè)肝癌干細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)的變化13-14
• 3.3 肝癌干細(xì)胞對(duì)傳統(tǒng)化療藥物具有耐藥性14-15
• 3.4 懸浮培養(yǎng)富集的肝癌干細(xì)胞生長(zhǎng)速率遲緩15
• 3.5 MTT 檢測(cè)硫利達(dá)嗪(Thioridazine)對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制效果15-16
• 3.6 結(jié)晶紫染色檢測(cè) THO 對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制效果16-17
• 3.7 Hoechst33342 染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè) THO 誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞凋亡17
• 3.8 細(xì)胞流式檢測(cè) THO 誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象17-18
• 3.9 Western blot 檢測(cè) THO 誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白18-19
• 3.10 THO 聯(lián)合 DOX 對(duì)肝癌細(xì)胞的增強(qiáng)殺傷作用19-21
• 4 結(jié)論與討論21-23
• 第二部分 重組抑制肝癌單純皰疹病毒相關(guān)質(zhì)粒 tkBAC-fr 的構(gòu)建23-48
• 1 引言23-28
• 1.1 肝癌研究進(jìn)展23-25
• 1.2 溶瘤單純皰疹病毒（HSV）治療腫瘤的現(xiàn)狀25-27
• 1.3 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)27-28
• 2 實(shí)驗(yàn)材料與方法28-42
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料28-31
• 2.1.1 生化試劑28-29
• 2.1.2 菌株與質(zhì)粒29
• 2.1.3 主要儀器29-30
• 2.1.4 主要溶液配制30
• 2.1.5 引物合成30-31
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法31-42
• 2.2.1 分子克隆31-40
• 2.2.2 皰疹病毒的構(gòu)建40-42
• 2.2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)40-41
• 2.2.2.2 病毒的包裝41-42
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-47
• 3.1 tkBAC-fr 重組質(zhì)粒的構(gòu)建42-46
• 3.2 tkBAC-fr 質(zhì)粒與皰疹病毒基因組進(jìn)行同源重組46-47
• 4. 結(jié)論與展望47-48
• 參考文獻(xiàn)48-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 薛開(kāi)先;肝癌發(fā)生的分子遺傳學(xué)和表遺傳學(xué)研究[J];癌癥;2005年06期

2 ;Anti-tumor effect of oncolytic herpes simplex virus G47delta on human nasopharyngeal carcinoma[J];癌癥;2011年12期

3 吳孟超;原發(fā)性肝癌治療的進(jìn)展及展望[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

4 吳孟超,沈鋒;肝癌研究的現(xiàn)狀和展望[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));2000年01期

5 吳孟超;;原發(fā)性肝癌在中國(guó)的治療和研究現(xiàn)狀[J];成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年02期

6 魯明;欽倫秀;;肝癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)機(jī)制的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];肝膽外科雜志;2014年04期

本文編號(hào)：966986