發(fā)布時間：2017-10-03 22:10

  本文關鍵詞：硫利達嗪對類肝癌干細胞的殺傷作用研究

  更多相關文章： THO 肝癌干細胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡

【摘要】：硫利達嗪（Thioridazine，THO）在臨床上通常被用于治療精神類疾��；近年來，，研究發(fā)現(xiàn)THO對腫瘤細胞具有殺傷效果，但其對肝癌干細胞的殺傷作用還未曾有報道。腫瘤干細胞在腫瘤的轉移，復發(fā)及耐藥性方面起著十分重要的作用。本文利用體外懸浮培養(yǎng)富集類腫瘤干細胞并檢測藥物THO對其殺傷效果來評價THO對腫瘤生長的體外抑制效應及基礎機制研究。 通過檢測體外懸浮培養(yǎng)類肝癌干細胞在腫瘤干細胞相關因子表達、耐藥性及細胞周期等方面因素，顯示在一定程度上其具備腫瘤干細胞樣特征，磷酸化STAT3，NANOG和XIAP表達顯著上調，而Albumin表達下調；進一步運用MTT、Western blotting和細胞流式等實驗驗證了THO對類肝癌干細胞具有較強的殺傷效果并能誘導caspase依賴的細胞凋亡，而對分化的肝癌細胞影響較弱；此外，THO和化療藥物鹽酸阿霉素(DOX)的聯(lián)合使用顯著增強了其對肝癌干細胞和分化的肝癌細胞的殺傷作用。 本課題實驗結果首次顯示THO對體外懸浮培養(yǎng)的類肝癌干細胞具有較強的殺傷能力，可能為今后肝癌的臨床治療帶來新的希望。
【關鍵詞】：THO 肝癌干細胞 磷酸化STAT3 caspase 凋亡
【學位授予單位】：浙江理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-6
• 縮略詞表6-7
• 目錄7-9
• 第一部分 硫利達嗪對類肝癌干細胞的殺傷作用研究9-23
• 1 引言9-10
• 2 材料與方法10-13
• 2.1 材料10
• 2.2 方法10-13
• 2.2.1 肝癌干細胞的懸浮培養(yǎng)10-11
• 2.2.2 MTT 檢測藥物對肝癌細胞的殺傷作用11
• 2.2.3 流式檢測細胞周期11
• 2.2.4 克隆形成實驗11
• 2.2.5 結晶紫染色觀察細胞活性11-12
• 2.2.6 Hoechst33342 染色法檢測細胞凋亡12
• 2.2.7 流式細胞術檢測細胞凋亡12
• 2.2.8 Western blot 檢測相關目的蛋白及細胞凋亡蛋白12
• 2.2.9 實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學分析12-13
• 3 結果13-21
• 3.1 體外懸浮培養(yǎng)富集肝癌干細胞13
• 3.2 Western blot 檢測肝癌干細胞相關蛋白表達的變化13-14
• 3.3 肝癌干細胞對傳統(tǒng)化療藥物具有耐藥性14-15
• 3.4 懸浮培養(yǎng)富集的肝癌干細胞生長速率遲緩15
• 3.5 MTT 檢測硫利達嗪(Thioridazine)對肝癌細胞生長的抑制效果15-16
• 3.6 結晶紫染色檢測 THO 對肝癌細胞的生長抑制效果16-17
• 3.7 Hoechst33342 染色實驗檢測 THO 誘導的肝癌細胞凋亡17
• 3.8 細胞流式檢測 THO 誘導肝癌細胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象17-18
• 3.9 Western blot 檢測 THO 誘導肝癌細胞凋亡相關蛋白18-19
• 3.10 THO 聯(lián)合 DOX 對肝癌細胞的增強殺傷作用19-21
• 4 結論與討論21-23
• 第二部分 重組抑制肝癌單純皰疹病毒相關質粒 tkBAC-fr 的構建23-48
• 1 引言23-28
• 1.1 肝癌研究進展23-25
• 1.2 溶瘤單純皰疹病毒（HSV）治療腫瘤的現(xiàn)狀25-27
• 1.3 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)27-28
• 2 實驗材料與方法28-42
• 2.1 實驗材料28-31
• 2.1.1 生化試劑28-29
• 2.1.2 菌株與質粒29
• 2.1.3 主要儀器29-30
• 2.1.4 主要溶液配制30
• 2.1.5 引物合成30-31
• 2.2 實驗方法31-42
• 2.2.1 分子克隆31-40
• 2.2.2 皰疹病毒的構建40-42
• 2.2.2.1 細胞培養(yǎng)40-41
• 2.2.2.2 病毒的包裝41-42
• 3. 實驗結果42-47
• 3.1 tkBAC-fr 重組質粒的構建42-46
• 3.2 tkBAC-fr 質粒與皰疹病毒基因組進行同源重組46-47
• 4. 結論與展望47-48
• 參考文獻48-53
• 致謝53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 薛開先;肝癌發(fā)生的分子遺傳學和表遺傳學研究[J];癌癥;2005年06期

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5 吳孟超;;原發(fā)性肝癌在中國的治療和研究現(xiàn)狀[J];成都醫(yī)學院學報;2012年02期

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本文編號：966986