本文關(guān)鍵詞：KLF17在食管鱗癌中的蛋白表達及其對Eca109細胞遷移、侵襲能力的影響

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【摘要】：目的研究Kruppel樣轉(zhuǎn)錄及其調(diào)控家族的成員KLF17蛋白在不同和食管鱗癌組織中的表達及與其患者臨床病理特征間的關(guān)系；慢病毒介導(dǎo)過表達KLF17對Eca109細胞遷移、侵襲的能力的影響及作用的機制。為KLF17在食管鱗癌的臨床運用中打下一定基礎(chǔ)。方法蛋白免疫組化驗證KLF17在44例食管鱗癌及37例癌旁正常食管上皮中的表達；構(gòu)建KLF17慢病毒過表達載體,慢病毒以不同的感染復(fù)數(shù)(MOI)感染Eca109細胞,根據(jù)綠色熒光蛋白的表達量選取最適合的MOI值；實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real—time PCR)檢測KLF17mRNA的表達、免疫蛋白印跡(western blotting)法檢測KLF17、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表達；過表達KLF17的Eca109細胞遷移和侵襲能力的改變通過細胞劃痕實驗及體外transwell實驗證明。結(jié)果KLF17在食管鱗癌中的蛋白表達明顯低于食管正常上皮中的表達(P0.05)；KLF17蛋白表達與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期顯著相關(guān)(P0.05)；MOI值為50轉(zhuǎn)染Eca109細胞,轉(zhuǎn)染效率可達95%以上；QRT-PCR及western blotting結(jié)果顯示Ad-KLF17組KLF17及上皮標志物E-cadherin表達明顯高于Ad-GFP組及CON組,而間質(zhì)標志物N-cadherin表達明顯低于Ad-GFP組及CON組；劃痕實驗結(jié)果顯示Ad-KLF17組細胞48h遷移距離為(137.2±8.24)um,明顯短于Ad-GFP組(228.6±22.48)um和CON組(221.4±25.92)um(P0.05)；體外transwell實驗結(jié)果顯示Ad-KLF17組細胞24小時穿過小孔數(shù)量為(27±3.2)個,明顯少于Ad-GFP組(54.2±4.3)個及CON組(58±4.5)個(P0.05)。結(jié)論食管鱗癌在發(fā)生發(fā)展中可能會伴隨KLF17的表達改變起重要作用,在食管鱗癌組織中KLF17蛋白質(zhì)水平的表達癌旁正常組織相比明顯降低,其與臨床病理資料關(guān)聯(lián)密切,過表達基因KLF17能抑制Eca109細胞遷移及侵襲能力,機制可能與其抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：KLF17 食管鱗癌 Eca109細胞
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.1
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照6-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-23
• 1.1 材料13-15
• 1.1.1 臨床病理資料13
• 1.1.2 細胞與慢病毒13
• 1.1.3 主要試劑13-14
• 1.1.4 主要儀器14
• 1.1.5 主要溶液配制14-15
• 1.2 方法15-23
• 1.2.1 食管鱗癌標本的收集與臨床病理資料歸類16
• 1.2.2 食管鱗癌Eca109細胞的培養(yǎng)16-17
• 1.2.3 實時熒光定量PCR檢測17-19
• 1.2.4 蛋白免疫印跡實驗(western-blotting)19-21
• 1.2.5 過表達KLF17慢病毒的轉(zhuǎn)染與實驗分組21
• 1.2.6 組織免疫組化實驗21-22
• 1.2.7 細胞劃痕實驗22
• 1.2.8 體外Transwell實驗22-23
• 1.2.9 統(tǒng)計學分類處理23
• 2 結(jié)果23-26
• 2.1 KLF17蛋白表達與臨床病理特征的關(guān)系23-25
• 2.2 過表達KLF17基因慢病毒對Eca109細胞轉(zhuǎn)染效率25
• 2.3 慢病毒對Eca109細胞中KLF17mRNA、蛋白表達的影響25
• 2.4 過表達KLF17能抑制Eca109細胞的遷移能力25
• 2.5 KLF17抑制Eca109細胞的侵襲能力25-26
• 2.6 KLF17對Eca109細胞中EMT相關(guān)蛋白表達的影響26
• 3 討論26-30
• 4 附圖30-35
• 全文總結(jié)35-36
• 參考文獻36-38
• 文獻綜述38-46
• 參考文獻43-46
• 致謝46-47
• 學位期間發(fā)裹的學術(shù)論文目錄47

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1 楊建斌,王庸晉,董偉華,孔天翰,楊紅艷,宋紅霞,劉桂亭;東亞鉗蝎毒抗癌多肽對Eca109 細胞和HeLa 細胞的毒性作用[J];中國病理生理雜志;1999年12期

2 張玉軍,齊鳳英,劉淑霞,左連富,郭建文,劉江惠;戊地昔布對人食管癌Eca109細胞系的抑制作用及其調(diào)控[J];中國腫瘤臨床;2005年09期

3 安玉會,孫含笑,祝慶番,徐霞,鄭惠良,楊瑩;蘆筍口服液和飲料對食管癌ECa109細胞抑制作用的初步觀察[J];癌癥;1989年04期

4 劉玲玲;劉浩;王迪生;邢亞群;李子廣;孫國平;;褪黑素聯(lián)合順鉑對人食管癌Eca109細胞株的增殖抑制作用研究[J];蚌埠醫(yī)學院學報;2013年12期

5 張玉軍;劉淑霞;齊鳳英;左連富;郭建文;;戊地昔布誘導(dǎo)人食管癌Eca109細胞凋亡的機制研究[J];中國藥理學通報;2006年05期

6 韓忠敏;董衛(wèi)華;;白藜蘆醇對食管癌Eca109細胞的抑制作用研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學;2011年04期

7 趙生霞;黃燕燕;慕曉玲;;食管癌Eca109單克隆細胞株的干細胞特性研究[J];石河子大學學報(自然科學版);2013年02期

8 馬麗萍;趙培榮;田愛琴;張書紅;;夏枯草對Eca109細胞的影響[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2006年03期

9 侯俊民,束永前,趙志泉;紫杉醇對人食管癌Eca109細胞株生長的影響[J];南京醫(yī)科大學學報;2001年03期

10 李永軍;孫曉慧;時東彥;劉志華;;白藜蘆醇抑制食管癌Eca109細胞增殖的初步研究[J];河北醫(yī)科大學學報;2008年06期

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7 王靜;新城疫病毒誘導(dǎo)人食管癌ECA109細胞凋亡及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究[D];河北北方學院;2011年

8 張紅;P162通過抑制CHK1/2表達來增加食管癌細胞株Eca109放射敏感性的研究[D];武漢科技大學;2013年

9 馮若;應(yīng)激活化的P38MAPK在DTT與順鉑誘導(dǎo)食管癌Eca109細胞凋亡中的作用[D];鄭州大學;2003年

10 朱應(yīng)超;CHFR基因CpG島甲基化對Eca109細胞增殖凋亡的影響[D];山東大學;2011年

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本文編號：963587