常壓直接質(zhì)譜分析技術(shù)快速診斷肺癌的分子基礎(chǔ)研究
本文關(guān)鍵詞:常壓直接質(zhì)譜分析技術(shù)快速診斷肺癌的分子基礎(chǔ)研究
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【摘要】:目的:常壓直接質(zhì)譜分析(ambient mass spectrometry,AMS)是近年來迅速發(fā)展的基于樣品中分子組成或含量的不同而實(shí)現(xiàn)樣品檢測(cè)的一種快速分析測(cè)試方法,較之以前的方法只需要對(duì)臨床樣品進(jìn)行簡(jiǎn)單的處理或者不對(duì)樣品進(jìn)行任何處理就可以檢測(cè)。尖端電噴霧離子源(Tip-spray ionization,TSI)是AMS的一種離子源,本研究采用TSI-MS分析肺癌組織及肺癌旁組織,探索潛在的肺癌分子標(biāo)志物,從而達(dá)到對(duì)肺癌早期的快速診斷。方法:對(duì)留取的肺組織不進(jìn)行任何的預(yù)處理,采用自制的甲醇萃取輔助的尖端放電噴霧離子源對(duì)20例肺癌患者的肺癌組織、癌旁組織和9例肺部良性疾病組織進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè),選取甲醇為萃取劑,調(diào)節(jié)流速為4ul/min,設(shè)置在正離子模式下,設(shè)定一級(jí)質(zhì)譜、多級(jí)質(zhì)譜的掃描范圍為均為m/z 50-1000,離子傳輸管溫度150℃,噴霧電壓3.5 KV,透鏡電壓65.0 V,選定離子的隔離寬度為1.6 Da,碰撞能量為13%。用主成分分析(principal component analysis,PCA)方法對(duì)肺癌組織與癌旁組織和肺部良性疾病組織的質(zhì)譜指紋譜圖進(jìn)行快速分類和鑒別;對(duì)11例肺癌患者的肺癌和癌旁組織的差異性m/z 756.7、782.7、808.7、832.7及標(biāo)準(zhǔn)品[DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)。結(jié)果:通過TSI-MS檢測(cè)及運(yùn)用PCA可以有效的區(qū)分肺癌組織和癌旁組織及肺癌組織和肺部良性疾病組織,癌旁組織和肺部良性疾病組織不能區(qū)分;肺癌組織和癌旁組織的差異性物質(zhì)為m/z 756.7、782.7、808.7、832.7;m/z 756.7、782.7、808.7、832.7的多級(jí)譜圖均與標(biāo)準(zhǔn)品[DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]的多級(jí)譜圖相符,即肺癌的差異性物質(zhì)為二棕櫚;蚜字珼PPC、1-棕櫚;-2-油;蚜字琍OPC、二油酰磷脂酰膽堿DOPC、花生四烯酰-硬脂酰磷脂酰膽堿SAPC。結(jié)論:AMS耦合PCA能夠有效地將肺癌組織與肺癌旁組織及肺部良性疾病組織的質(zhì)譜指紋信息區(qū)分,從而快速鑒別出肺癌組織,TSI-MS利用多級(jí)質(zhì)譜分析可以很好的對(duì)肺癌和癌旁組織的差異性磷脂進(jìn)行定性,DPPC、POPC、DOPC、SAPC可能成為潛在的肺癌分子標(biāo)志物,為開發(fā)新的肺癌診斷方法提供新的思路以及為研究肺癌的發(fā)生機(jī)制提供新的思路。
【關(guān)鍵詞】:肺癌 多級(jí)質(zhì)譜分析 常壓直接質(zhì)譜
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R734.2
【目錄】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-9
- 中英文對(duì)照表9-10
- 第1章 前言10-12
- 第2章 材料和方法12-18
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
- 2.1.1 樣品及收集方法12-13
- 2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備、試劑及材料13-14
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14-16
- 2.2.1 樣品準(zhǔn)備14
- 2.2.2 樣品準(zhǔn)備14-15
- 2.2.3 TSI—MS離子源的參數(shù)設(shè)置15
- 2.2.4 實(shí)驗(yàn)步驟15-16
- 2.3 數(shù)據(jù)分析16-18
- 第3章 結(jié)果18-23
- 3.1 指紋譜圖及PCA分析18-20
- 3.2 差異性物質(zhì)的鑒定20-23
- 第4章 討論23-32
- 4.1 常壓直接質(zhì)譜分析技術(shù)(AMS)的主要組成23-24
- 4.2 尖端電噴霧電離質(zhì)譜技術(shù)(TSI-MS)聯(lián)合PCA對(duì)肺癌的快速鑒別24-25
- 4.3 多級(jí)質(zhì)譜(MS~n)分析25-27
- 4.3.1 多級(jí)質(zhì)譜分析在m/z 756.7、782.7、808.7、832.7 的應(yīng)用25-27
- 4.3.2 [DPPC+Na+]、[POPC+Na+]、[DOPC+Na+]、[SAPC+Na+]的多級(jí)質(zhì)譜分析27
- 4.4 代謝組學(xué)與疾病的關(guān)系27-32
- 4.4.1 DPPC與肺癌的關(guān)系28-29
- 4.4.2 POPC、DOPC、SAPC與肺癌的關(guān)系29-32
- 第5章 結(jié)論32-33
- 致謝33-34
- 參考文獻(xiàn)34-37
- 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果37-38
- 綜述38-42
- 參考文獻(xiàn)41-42
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):963092
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