發(fā)布時(shí)間：2017-10-02 15:21

  本文關(guān)鍵詞：血小板型十二脂氧合酶抑制劑在胃癌細(xì)胞增殖與遷移中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 胃癌 p12-LOX Ezrin BAI EMT 遷移 TGF-β/Smad信號(hào)通路 MAPK/ERK信號(hào)通路

【摘要】：目的：探討血小板型12-脂氧合酶(platelet type 12-lipoxygenase, p12-LOX)選擇性抑制劑黃芩素(baicalein, BAI)對(duì)胃癌MKN-28細(xì)胞增殖和遷移的影響及其機(jī)制。方法：應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)胃癌MKN-28細(xì)胞和正常胃黏膜GES-1細(xì)胞中p12-LOX的mRNA表達(dá)；不同濃度的BAI處理MKN-28細(xì)胞后,應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況;劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力;Hoechst染色觀察細(xì)胞凋亡；免疫熒光染色法檢測(cè)E-cadherin和Snail蛋白的表達(dá)；Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)p12-LOX和Ezrin蛋白、凋亡相關(guān)蛋白、EMT標(biāo)志物蛋白及TGF-β/Smad和MAPK/ERK信號(hào)通路的相關(guān)蛋白表達(dá)的影響；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：1.胃癌MKN-28細(xì)胞中p12-LOX和Ezrin基因表達(dá)水平明顯高于正常胃粘膜GES-1細(xì)胞(P0.01); 2.MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,BAI顯著抑制MKN-28細(xì)胞的增殖,并呈時(shí)間和劑量依懶性(P0.05),但對(duì)GES-1細(xì)胞增殖能力的影響不明顯；3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,10μM BAI處理MKN-28細(xì)胞,可將細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期,并誘導(dǎo)發(fā)生細(xì)胞凋亡(P0.05)；Hoechst33342染色及流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,BAI可誘導(dǎo)MKN-28細(xì)胞凋亡(P0.01)；4.劃痕愈合實(shí)驗(yàn)及Transwell室遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,BAI處理可使MKN-28細(xì)胞的遷移能力明顯下降(P0.05)；免疫熒光染色結(jié)果亦表明,BAI處理可上調(diào)MKN-28細(xì)胞的E-cadherin蛋白表達(dá)(P0.05),下調(diào)Snail蛋白表達(dá)(P0.01)；5. Western blot結(jié)果顯示,BAI處理MKN-28細(xì)胞顯著抑制p12-LOX. Ezrin, GSK-3β、 Vimentin、 Snail、 p-MEKK1, p-Erk1/2、 TGF-β1和p-Smad3蛋白表達(dá)水平(P0.01)；上調(diào)Cleaved-Caspases-3和E-cadherin表達(dá)水平(P0.05或P0.01)。結(jié)論：1.胃癌MKN-28細(xì)胞中p12-LOX和Ezrin基因的呈高表達(dá)；2.p12-LOX抑制劑BAI可有效抑制MKN-28細(xì)胞的增殖、遷移和EMT的發(fā)生,并誘導(dǎo)胞凋亡；3.MAPK/ERK及TGF-β/Smad信號(hào)通路可能參與了BAI抗胃癌MKN-28細(xì)胞增殖和遷移的分子機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 p12-LOX Ezrin BAI EMT 遷移 TGF-β/Smad信號(hào)通路 MAPK/ERK信號(hào)通路
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 縮略詞9-11
• 第一章 前言11-16
• 第二章 材料與方法16-37
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器16-17
• 2.3 試劑及藥品配制17-20
• 2.4 實(shí)驗(yàn)耗材20-21
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法21-36
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理36-37
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-48
• 3.1 胃正常粘膜上皮GES-1細(xì)胞及胃癌MKN-28細(xì)胞中p12-LOX、Ezrin的表達(dá)37-38
• 3.2 體外培養(yǎng)的胃癌MKN-28細(xì)胞株增殖狀態(tài)的形態(tài)學(xué)觀察38-40
• 3.3 BAI通過下調(diào)p12-LOX基因的表達(dá)抑制胃癌MKN-28細(xì)胞的增殖能力40-41
• 3.4 BAI通過阻滯MKN-28細(xì)胞周期于G0/G1期,抑制細(xì)胞增殖41-42
• 3.5 BAI誘導(dǎo)MKN-28細(xì)胞凋亡42-46
• 3.6 BAI抑制MKN-28細(xì)胞遷移能力和EMT的發(fā)生46-47
• 3.8 BAI通過抑制TGF-β/Smad信號(hào)通路蛋白表達(dá)抑制EMT的發(fā)生和遷移、侵襲47-48
• 第四章 討論48-52
• 4.1 BAI通過下調(diào)p12-LOX、Ezrin基因表達(dá),影響胃癌MKN-28細(xì)胞的增殖與遷移能力48-49
• 4.2 BAI通過影響細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,抑制胃癌MKN-28細(xì)胞的增殖能力49
• 4.3 BAI通過誘導(dǎo)細(xì)胞EMT形成,抑制胃癌MKN-28細(xì)胞的遷移能力49-50
• 4.4 BAI通過TGF-β/Smad、MAPK/ERK信號(hào)通路,抑制胃癌MKN-28細(xì)胞的增殖與遷移能力50-51
• 4.5 總結(jié)51-52
• 第五章 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研業(yè)績(jī)59-60
• 致謝60

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1 趙海恩;郭明君;范清宇;裘秀春;;Ezrin在腫瘤組織中的表達(dá)及意義[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2013年05期

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3 彭淑平;李桂源;;膜-細(xì)胞骨架連接分子Ezrin與腫瘤轉(zhuǎn)移[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2006年03期

4 李濤;蘇炳光;;Ezrin蛋白及其在腫瘤中的意義[J];腫瘤研究與臨床;2006年09期

5 張巖;劉康達(dá);;膜-細(xì)胞骨架聯(lián)接分子ezrin在腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中的作用[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年01期

6 江忠清;連成瑛;鄭秀;;Ezrin分子生物學(xué)特性及其與婦科惡性腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中華腫瘤防治雜志;2007年11期

7 王紅建;史成章;;Ezrin的生物學(xué)功能及其與腫瘤的關(guān)系[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2007年04期

8 張肖肖;辛彥;;Ezrin蛋白與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展[J];中國腫瘤臨床;2007年23期

9 趙清石;江新梅;胡靜;鞠浩;袁軍輝;;Ezrin蛋白在肌病患者骨骼肌中的表達(dá)及意義[J];臨床神經(jīng)病學(xué)雜志;2008年01期

10 鄒科見;周海蘭;;Ezrin與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年04期

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1 ;MicroRNA-183 regulates Ezrin expression in lung cancer cell[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸系病分會(huì)成立三十周年慶典活動(dòng)暨2008年呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

2 鄭淑慧;黃靜和;向秋玲;周科文;付曉東;王庭槐;;Ezrin蛋白在雌激素促乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲中的作用研究[A];中國生理學(xué)會(huì)第23屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

3 ;Expression of Ezrin Protein in Renal Cell Carcinoma[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

4 范婕;史威;張林西;李海軍;金春亭;武欣;郭穎;;乳腺癌中Ezrin表達(dá)特點(diǎn)及臨床病理意義[A];2009年“臨床診斷和治療新進(jìn)展研究”暨“全國腫瘤病理診斷交流”研討會(huì)論文集[C];2009年

5 彭婷婷;王慧;石亞偉;;Analysis of the Interaction between L-Periaxin and Ezrin[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告一[C];2014年

6 陳宇;華建江;王雷;王巍巍;謝春蕾;孟菁菁;黃大毛;伍斌;唐發(fā)清;;小檗堿通過Ezrin蛋白抑制鼻咽癌細(xì)胞遷移和偽足形成[A];藥用植物化學(xué)與中藥有效成分分析研討會(huì)論文集（上）[C];2008年

7 ;17β-estradiol enhances breast cancer cell motility and invasion via extra-nuclear activation of actin-binding protein ezrin N[A];中國生理學(xué)會(huì)第十一屆張錫鈞基金全國青年優(yōu)秀生理學(xué)學(xué)術(shù)論文交流及評(píng)獎(jiǎng)會(huì)議綜合摘要[C];2011年

8 曹新旺;繆勇;郭振;姚雪彪;;PKA介導(dǎo)的Ezrin磷酸化在上皮細(xì)胞分泌中的功能研究[A];中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

9 ;Expression of ezrin and phosphorylated ezrin (pEzrin) in pancreatic ductal adenocarcinoma[A];山東生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

10 鄭淑慧;付曉東;黃靜和;張亞星;王庭槐;;Ezrin蛋白在雌激素促乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲中的作用[A];全國第十二屆心臟學(xué)會(huì)第十五屆心功能學(xué)會(huì)和《心臟雜志》編委會(huì)聯(lián)合學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

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1 孔界男;Ezrin基因在子宮頸癌遷移浸潤(rùn)中的作用及機(jī)制[D];延邊大學(xué);2015年

2 高飛;紫杉醇對(duì)肝癌細(xì)胞中ezrin表達(dá)的調(diào)控及其與肝癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

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4 蘭嵐;Ezrin蛋白在肺癌中表達(dá)的臨床意義及其對(duì)肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

5 鄧輝;Ezrin的分子可塑性在細(xì)胞動(dòng)力學(xué)調(diào)控中的機(jī)制研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2010年

6 周琳;Ezrin在肝細(xì)胞癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及吳茱萸堿對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2 Ezrin生物學(xué)行為的影響[D];中南大學(xué);2013年

7 張巖;膜—細(xì)胞骨架聯(lián)接分子ezrin對(duì)肝細(xì)胞肝癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

8 李娜;Ezrin在慢性氣道炎癥黏液分泌中的作用及其分子機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

9 張健;Ezrin蛋白在骨肉瘤侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及黃芩素對(duì)其表達(dá)的影響[D];中南大學(xué);2014年

10 王峰松;Ezrin-ACAP4蛋白復(fù)合物在胞吐動(dòng)力學(xué)調(diào)控中的功能研究[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

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1 王玲嬋;艾瑞昔布聯(lián)合洛鉑抑制肺腺癌A549細(xì)胞裸鼠移植瘤侵襲和轉(zhuǎn)移及其作用機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 唐思慧;埃茲蛋白在TNF-α致大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞炎性損傷中表達(dá)變化及Rac1的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 彭婷婷;L-periaxin與Ezrin相互作用模式分析[D];山西大學(xué);2015年

4 郝丹;E-cadherin、Ezrin在宮頸癌組織中的表達(dá)及意義[D];河南科技大學(xué);2015年

5 王慧;L-periaxin蛋白與Ezrin蛋白相互作用初步分析[D];山西大學(xué);2014年

6 何菁;Ezrin對(duì)轉(zhuǎn)移性乳腺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的調(diào)控研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

7 王曉嬌;Ezrin和P21在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

8 劉亞莉;Ezrin在小鼠睪丸中的表達(dá)規(guī)律及在精子獲能中的功能研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

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10 李巧丹;Ezrin在小鼠附植前胚胎中的表達(dá)規(guī)律及功能[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

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