本文關(guān)鍵詞：血小板型十二脂氧合酶抑制劑在胃癌細胞增殖與遷移中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 胃癌 p12-LOX Ezrin BAI EMT 遷移 TGF-β/Smad信號通路 MAPK/ERK信號通路

【摘要】：目的：探討血小板型12-脂氧合酶(platelet type 12-lipoxygenase, p12-LOX)選擇性抑制劑黃芩素(baicalein, BAI)對胃癌MKN-28細胞增殖和遷移的影響及其機制。方法：應(yīng)用RT-PCR檢測胃癌MKN-28細胞和正常胃黏膜GES-1細胞中p12-LOX的mRNA表達；不同濃度的BAI處理MKN-28細胞后,應(yīng)用MTT法檢測細胞的增殖情況;劃痕愈合實驗和Transwell小室遷移實驗檢測細胞遷移能力;Hoechst染色觀察細胞凋亡；免疫熒光染色法檢測E-cadherin和Snail蛋白的表達；Western blot實驗檢測p12-LOX和Ezrin蛋白、凋亡相關(guān)蛋白、EMT標志物蛋白及TGF-β/Smad和MAPK/ERK信號通路的相關(guān)蛋白表達的影響；流式細胞儀檢測細胞周期及細胞凋亡的影響。結(jié)果：1.胃癌MKN-28細胞中p12-LOX和Ezrin基因表達水平明顯高于正常胃粘膜GES-1細胞(P0.01); 2.MTT實驗結(jié)果顯示,BAI顯著抑制MKN-28細胞的增殖,并呈時間和劑量依懶性(P0.05),但對GES-1細胞增殖能力的影響不明顯；3.流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,10μM BAI處理MKN-28細胞,可將細胞周期阻滯在G0/G1期,并誘導(dǎo)發(fā)生細胞凋亡(P0.05)；Hoechst33342染色及流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,BAI可誘導(dǎo)MKN-28細胞凋亡(P0.01)；4.劃痕愈合實驗及Transwell室遷移實驗結(jié)果顯示,BAI處理可使MKN-28細胞的遷移能力明顯下降(P0.05)；免疫熒光染色結(jié)果亦表明,BAI處理可上調(diào)MKN-28細胞的E-cadherin蛋白表達(P0.05),下調(diào)Snail蛋白表達(P0.01)；5. Western blot結(jié)果顯示,BAI處理MKN-28細胞顯著抑制p12-LOX. Ezrin, GSK-3β、 Vimentin、 Snail、 p-MEKK1, p-Erk1/2、 TGF-β1和p-Smad3蛋白表達水平(P0.01)；上調(diào)Cleaved-Caspases-3和E-cadherin表達水平(P0.05或P0.01)。結(jié)論：1.胃癌MKN-28細胞中p12-LOX和Ezrin基因的呈高表達；2.p12-LOX抑制劑BAI可有效抑制MKN-28細胞的增殖、遷移和EMT的發(fā)生,并誘導(dǎo)胞凋亡；3.MAPK/ERK及TGF-β/Smad信號通路可能參與了BAI抗胃癌MKN-28細胞增殖和遷移的分子機制。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 p12-LOX Ezrin BAI EMT 遷移 TGF-β/Smad信號通路 MAPK/ERK信號通路
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 縮略詞9-11
• 第一章 前言11-16
• 第二章 材料與方法16-37
• 2.1 實驗材料16
• 2.2 實驗儀器16-17
• 2.3 試劑及藥品配制17-20
• 2.4 實驗耗材20-21
• 2.5 實驗方法21-36
• 2.6 統(tǒng)計學(xué)處理36-37
• 第三章 實驗結(jié)果37-48
• 3.1 胃正常粘膜上皮GES-1細胞及胃癌MKN-28細胞中p12-LOX、Ezrin的表達37-38
• 3.2 體外培養(yǎng)的胃癌MKN-28細胞株增殖狀態(tài)的形態(tài)學(xué)觀察38-40
• 3.3 BAI通過下調(diào)p12-LOX基因的表達抑制胃癌MKN-28細胞的增殖能力40-41
• 3.4 BAI通過阻滯MKN-28細胞周期于G0/G1期,抑制細胞增殖41-42
• 3.5 BAI誘導(dǎo)MKN-28細胞凋亡42-46
• 3.6 BAI抑制MKN-28細胞遷移能力和EMT的發(fā)生46-47
• 3.8 BAI通過抑制TGF-β/Smad信號通路蛋白表達抑制EMT的發(fā)生和遷移、侵襲47-48
• 第四章 討論48-52
• 4.1 BAI通過下調(diào)p12-LOX、Ezrin基因表達,影響胃癌MKN-28細胞的增殖與遷移能力48-49
• 4.2 BAI通過影響細胞周期、誘導(dǎo)細胞凋亡,抑制胃癌MKN-28細胞的增殖能力49
• 4.3 BAI通過誘導(dǎo)細胞EMT形成,抑制胃癌MKN-28細胞的遷移能力49-50
• 4.4 BAI通過TGF-β/Smad、MAPK/ERK信號通路,抑制胃癌MKN-28細胞的增殖與遷移能力50-51
• 4.5 總結(jié)51-52
• 第五章 結(jié)論52-53
• 參考文獻53-59
• 攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研業(yè)績59-60
• 致謝60

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本文編號：960334