本文關(guān)鍵詞：人喉癌移植瘤成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)來源分析

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【摘要】：研究背景腫瘤的發(fā)生、生長和侵襲轉(zhuǎn)移已不能簡單歸因于腫瘤細(xì)胞的基因突變和腫瘤細(xì)胞的失控生長,腫瘤微環(huán)境中的多種細(xì)胞成分,尤其是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer-associated fibroblasts, CAFs)對腫瘤的生長、侵襲甚至癌變起到至關(guān)重要的調(diào)控作用,針對CAFs的靶向治療已經(jīng)成為當(dāng)前抗腫瘤研究新的熱點(diǎn)。弄清CAFs的起源有利于我們更好的設(shè)計靶向治療策略,但是CAFs的起源至今尚未明確。文獻(xiàn)報道的CAFs可能的重要起源之一便是腫瘤細(xì)胞能夠通過上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)形成促進(jìn)自身生長的CAFs,而關(guān)于喉癌組織中的CAFs的起源目前尚未見報道,至于喉癌細(xì)胞能否通過EMT這條重要途徑形成CAFs也不明確。研究目的驗證喉癌裸鼠移植瘤模型中的喉癌細(xì)胞能否通過EMT生成促進(jìn)自身生長的CAFs。研究方法1、將喉癌HEp-2細(xì)胞系注射到免疫缺陷的BALB/c裸鼠皮下建立喉癌小鼠移植瘤模型；2、將所生長的小鼠皮下瘤體取出病理檢查,并對瘤體中的CAFs進(jìn)行原代培養(yǎng)、純化及相差顯微鏡觀察；3、對純化出的CAFs進(jìn)行體外免疫熒光、增殖、遷移、侵襲試驗及體內(nèi)促腫瘤生長功能學(xué)鑒定；4、對鑒定后的CAFs、NFs及喉癌細(xì)胞進(jìn)行核型分析,即上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)來源分析；5、原代培養(yǎng)的癌旁正常成纖維細(xì)胞(Normal fibroblasts, NFs)作為實驗對照。研究結(jié)果1、喉癌HEp-2細(xì)胞系在BALB/c裸鼠皮下成功建立喉癌移植瘤模型；2、所生長的瘤體為典型的喉鱗狀上皮癌,瘤體中的CAFs被成功原代培養(yǎng)及純化；3、免疫熒光檢查發(fā)現(xiàn)CAFs及NFs均為波形蛋白(vimentin) (?)日性而廣譜角蛋白(pan-CK)陰性,CAFs還進(jìn)一步為α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和成纖維細(xì)胞活化蛋白(Fap)兩種CAFs特異性蛋白陽性；與NFs相比,CAFs對喉癌細(xì)胞系具有更強(qiáng)的促進(jìn)增殖、遷移、侵襲及成瘤能力(P0.05)；4、核型分析檢查發(fā)現(xiàn),CAFs及NFs均為典型的小鼠染色體核型特征(38+XY),與喉癌HEp-2細(xì)胞的腫瘤核型截然不同。研究結(jié)論喉癌裸鼠移植瘤模型中的CAFs不是喉癌細(xì)胞通過EMT生成的,而是小鼠來源的,具體來源尚待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞 起源 喉腫瘤 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.65
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 縮略詞表11-14
• 1 引言14-16
• 2 第一部分人喉癌移植瘤成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)、純化及鑒定16-50
• 2.1 材料與方法16-23
• 2.2 結(jié)果23-43
• 2.3 討論43-49
• 2.4 結(jié)論49-50
• 3 第二部分人喉癌移植瘤成纖維細(xì)胞的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)來源分析50-63
• 3.1 材料與方法50-53
• 3.2 結(jié)果53-60
• 3.3 討論60-62
• 3.4 結(jié)論62-63
• 4 全文總結(jié)63-64
• 5 全文創(chuàng)新點(diǎn)64-65
• 參考文獻(xiàn)65-71
• 綜述71-84
• 參考文獻(xiàn)77-84
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果84

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：953612