本文關(guān)鍵詞：去甲基化藥物地西他濱增強(qiáng)細(xì)胞毒藥物抗髓系白血病的機(jī)制研究

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【摘要】：研究背景及目的:急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一類起源于造血干細(xì)胞遺傳及表觀遺傳學(xué)改變的骨髓細(xì)胞異常克隆增殖性疾病,造成骨髓細(xì)胞的增殖、分化及自我更新過(guò)程紊亂,原始細(xì)胞比例增高,破壞正常造血功能。表觀遺傳學(xué)影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu),并調(diào)節(jié)基因表達(dá)和保證遺傳信息,這對(duì)健康細(xì)胞、組織和器官中的關(guān)鍵調(diào)控基因的正常表達(dá)十分重要。表觀遺傳發(fā)生變異將導(dǎo)致基因表達(dá)的變化,以DNA甲基化最為常見(jiàn)。目前AML的標(biāo)準(zhǔn)治療方案仍為蒽環(huán)類藥物聯(lián)合阿糖胞苷(Cytarabine,Ara-C)。已發(fā)現(xiàn)在AML中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNA methyltransferase1,DNMT 1)表達(dá)上調(diào),去甲基化藥物5-氮雜2’-脫氧胞苷,即地西他濱(Decitabine,DAC)是一種去甲基化劑,具有雙重作用機(jī)制:低濃度時(shí)使沉默失活的抑癌基因激活并促進(jìn)細(xì)胞分化,高濃度時(shí)通過(guò)抑制DNA合成發(fā)揮細(xì)胞毒作用。所以DAC在髓系細(xì)胞腫瘤中的作用受到廣泛關(guān)注,尤其是DAC聯(lián)合其他化療方案(HA、HAG等)誘導(dǎo)治療復(fù)發(fā)、難治性及老年髓系白血病,在臨床上受到重視并獲得較理想的緩解率。本研究旨在比較去甲氧柔紅霉素(Idarubicin,IDA)或高三尖杉酯堿(Homoharringtonine,HHT)聯(lián)合Ara-C 2種化療方案對(duì)初治AML(除外急性早幼粒細(xì)胞,acute promyelocytic leukemia,APL)的療效及不良反應(yīng),并探討DAC增強(qiáng)細(xì)胞毒藥物HHT抗髓系白血病的機(jī)制。方法:(1)收集自2012年01年01日至2015年06年30日至本中心就診,并采用減低劑量的IDA或HHT聯(lián)合Ara-C治療的初治AML(APL除外)患者,分析療效其及不良反應(yīng);(2)采用MTT比色法研究去甲基化藥物DAC、細(xì)胞毒藥物HHT單藥或兩藥序貫聯(lián)合處理后對(duì)髓系HL-60細(xì)胞株增殖的影響;(3)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物作用后胞漿β-環(huán)聯(lián)蛋白(β-catenin)的表達(dá)及對(duì)細(xì)胞周期的變化影響;(4)采用Western blot檢測(cè)藥物處理HL-60細(xì)胞后β-catenin在細(xì)胞漿、細(xì)胞核中的表達(dá)水平;(5)采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)藥物作用后β-catenin在胞漿、胞核的定位變化;(6)采用q RT-PCR檢測(cè)藥物對(duì)HL-60細(xì)胞中Wnt通路相關(guān)基因m RNA表達(dá)的影響。結(jié)果:(1)誘導(dǎo)治療2療程后,低劑量IA方案組67例患者中46例達(dá)完全緩解(complete remission,CR),CR率為68.7%,低劑量HA方案組20例患者中8例達(dá)CR,CR率為40%,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.02)。兩組患者總有效率(overall response rate,ORR)分別為77.6%和60%,兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。兩組方案的不良反應(yīng)主要包括血液學(xué)和非血液學(xué)兩方面,其中血液學(xué)方面主要為骨髓抑制,除中性粒細(xì)胞持續(xù)1×109/L的中位時(shí)間差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)外,余均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而兩組非血液學(xué)不良反應(yīng)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)DAC、HHT抑制HL-60細(xì)胞的增殖;(3)DAC阻止β-catenin由胞漿進(jìn)入胞核,聯(lián)合HHT后,胞漿、胞核中的β-catenin表達(dá)量均明顯減少;(4)DAC、HHT使HL-60細(xì)胞阻滯于S期;(5)DAC下調(diào)Wnt通路相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá),聯(lián)合HHT后作用增強(qiáng)。結(jié)論:(1)對(duì)于初治AML(APL除外)患者,低劑量IA方案優(yōu)于低劑量HA方案,差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但其不良反應(yīng)程度較高;(2)DAC可能通過(guò)抑制Wnt通路活性增強(qiáng)HHT的細(xì)胞毒作用。
【關(guān)鍵詞】：急性髓系白血病 去甲氧柔紅霉素 高三尖杉酯堿 阿糖胞苷 HL-60細(xì)胞 地西他濱 β-catenin
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R733.71
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-13
• 文獻(xiàn)回顧13-22
• 1. 急性髓系白血病13-15
• 2. AML與表觀遺傳學(xué)15-16
• 3. 去甲基化藥物治療AML16-19
• 4. 經(jīng)典Wnt通路19-22
• 第一部分 減低劑量的去甲氧柔紅霉素或高三尖杉酯堿聯(lián)合阿糖胞苷對(duì)初治急性髓系白血病的療效觀察22-29
• 引言22
• 1 資料與方法22-25
• 2 結(jié)果25-27
• 3 討論27-29
• 第二部分 去甲基化藥物地西他濱增強(qiáng)細(xì)胞毒藥物抗髓系白血病的機(jī)制研究29-48
• 引言29-30
• 1. 主要材料30-33
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法33-40
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-45
• 4. 討論45-48
• 小結(jié)48-49
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果56-57
• 致謝57

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本文編號(hào)：942737