本文關(guān)鍵詞：氨基菁類熒光染料用于腫瘤細(xì)胞的光學(xué)成像

  更多相關(guān)文章： 整合素ανβ 3 腫瘤成像與治療 近紅外 大斯托克斯位移

【摘要】：雖然近些年來人們對腫瘤的產(chǎn)生、轉(zhuǎn)移等機(jī)理的研究取得了許多進(jìn)展,但因為早期診斷不夠靈敏、特異性好的靶向藥物的缺乏以及無法進(jìn)行實時有效的治療監(jiān)測,惡性腫瘤仍然嚴(yán)重威脅著人類的健康與生命。腫瘤診斷治療學(xué)(Tumor theranostics)是最近提出來的一種用于腫瘤診斷與治療的新方法,其核心是將腫瘤治療與實時顯影有效結(jié)合,指導(dǎo)醫(yī)生不斷選擇合適的治療方案,提高腫瘤患者的生存率和生活質(zhì)量,為腫瘤個體化治療提供一種新思路。因此合成既具有腫瘤特異顯影又能用于靶向治療作用的診斷治療劑具有十分重要的意義。本文設(shè)計合成了一種基于環(huán)肽cycclo(-RGDyK-)的氨基菁類熒光染料的腫瘤探針分子Cy7-RGD,結(jié)構(gòu)未見報道。環(huán)肽cyclo(-RGDyK-)被公認(rèn)為是細(xì)胞粘附分子整合素αvβ3的拮抗劑,整合素αvβ3在幾種實體腫瘤細(xì)胞表面及幾乎所有腫瘤新生血管中特異性表達(dá),目前基于環(huán)肽cyclo(-RGDyK-)的靶向整合素αvβ3的診療分子的研究已經(jīng)成為腫瘤診斷治療研究方向的熱點(diǎn)。本文首先采用Fmoc固相多肽合成法,以2-氯三苯甲基氯樹脂為載體,合成了環(huán)肽cyclo(-RGDyK-),并在乙醚中重結(jié)晶,產(chǎn)率可達(dá)84%。然后我們基于課題組大斯托克斯位移氨基菁染料的前期研究成果,合成了一種基于環(huán)肽cyclo(-RGDyK-)的氨基菁類熒光染料Cy7-RGD。其次對Cy7-RGD的光譜性質(zhì)進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)其在PBS(PH=7.4)中的最大激發(fā)波長為617 nm,最大發(fā)射波長為754 nm,熒光信號處于近紅外區(qū),并且保持大斯托克斯位移(137 nnm)。這種光譜性能表明其非常適合生物活體熒光成像研究。然后,用Cy7-RGD分別培養(yǎng)了兩種腫瘤細(xì)胞U87MG及MCF-7,其中神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87MG是已知可以過度表達(dá)整合素αvβ3,而乳腺癌細(xì)胞MCF-7已知是幾乎不表達(dá)整合素αvβ3的。熒光共聚焦實驗表明,Cy7-RGD在U87MG中聚集,但在MCF-7卻幾乎不聚集。通過加入未耦合的cyclo(-RGDyK-)來拮抗整合素αvβ3發(fā)現(xiàn)可以抑制Cy7-RGD在U87MG中的聚集。上述結(jié)果說明Cy7-RGD與整合素αvβ3的結(jié)合是非常特異性,表明Cy7-RGD具有特異性診斷神經(jīng)膠質(zhì)瘤的應(yīng)用潛力。最后,MTT實驗表明探針Cy7-RGD能特異性地抑制表達(dá)整合素αvβ3的U87MG細(xì)胞的繁殖,ICso值為8076 nM。但其對不表達(dá)整合素αvβ3的肝癌細(xì)胞以及正常肝細(xì)胞的生長卻只有很小的影響。表明Cy7-RGD具有靶向治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的應(yīng)用潛力,這在文獻(xiàn)中還從未被報道過。
【關(guān)鍵詞】：整合素ανβ 3 腫瘤成像與治療 近紅外 大斯托克斯位移
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R730.4;TQ617.3
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 文獻(xiàn)綜述10-31
• 1.1 引言10
• 1.2 多肽的固相合成10-14
• 1.2.1 多肽的固相合成簡介10-11
• 1.2.2 固相載體11-13
• 1.2.3 反應(yīng)溶劑13
• 1.2.4 微波輔助多肽的合成13-14
• 1.2.5 環(huán)肽14
• 1.3 近紅外熒光技術(shù)14-18
• 1.3.1 近紅外檢測方法介紹15-17
• 1.3.2 近紅外熒光成像17
• 1.3.3 在近紅外區(qū)進(jìn)行生物樣品檢測的優(yōu)勢17-18
• 1.4 用于腫瘤成像的近紅外熒光染料18-21
• 1.4.1 菁染料18-19
• 1.4.2 方酸菁衍生物19-20
• 1.4.3 酞菁和卟啉衍生物20-21
• 1.4.4 BODIPY類似物21
• 1.5 具有腫瘤靶向性質(zhì)的多功能近紅外染料的發(fā)展21-24
• 1.5.1 與靶向配體連接的近紅外染料用于腫瘤靶向成像21-22
• 1.5.2 近紅外染料包覆的納米顆粒用于腫瘤靶向和成像22-23
• 1.5.3 用于腫瘤靶向及成像的可激活的近紅外染料23-24
• 1.6 整合素αvβ3用于靶點(diǎn)在腫瘤檢測方面的應(yīng)用24-29
• 1.6.1 整合素αvβ3簡介24
• 1.6.2 靶向整合素的光學(xué)探針的基本組成24-25
• 1.6.3 靶向αvβ3整合素的熒光探針的進(jìn)展25-29
• 1.7 論文選題背景及研究內(nèi)容29-31
• 2 cyclo(-RGDyK-)的固相合成31-39
• 2.1 引言31-32
• 2.2 多肽的固相合成方法的過程及原理32-33
• 2.3 實驗材料與儀器33-35
• 2.4 固相合成cyclo(-RGDyK-)的步驟和方法35-37
• 2.5 固相合成過程中脫掉Fmoc保護(hù)后氨基的監(jiān)測方法37
• 2.6 結(jié)果與討論37-39
• 2.6.1 cyclo(-RGDyK-)的產(chǎn)率37
• 2.6.2 cyclo(-RGDyK-)的表征37-39
• 3 RGD介導(dǎo)的大斯托克斯位移菁染料熒光探針用于腫瘤成像與治療39-58
• 3.1 引言39-40
• 3.2 實驗部分40-41
• 3.2.1 儀器與試劑40-41
• 3.3 中間體及探針的合成41-43
• 3.4 Cy7-RGD與Cy7-Hex的提純43
• 3.5 探針及其參比化合物的光譜測試43-44
• 3.6 探針及其參比化合物的光穩(wěn)定性測試44-45
• 3.7 細(xì)胞培養(yǎng)45
• 3.8 細(xì)胞成像實驗45-46
• 3.9 MTT檢測46-47
• 3.10 結(jié)果與討論47-57
• 3.10.1 Cy7-RGD的表征47
• 3.10.2 Cy7-RGD與Cy7-Hex的光譜測試結(jié)果47-50
• 3.10.3 細(xì)胞成像實驗50-53
• 3.10.4 MTT檢測53-57
• 3.11 本章小結(jié)57-58
• 結(jié)論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-70
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況70-71
• 致謝71-72

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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7 賀偉杰;新型有機(jī)染料在染料敏化太陽能電池和離子熒光識別中的應(yīng)用[D];中南大學(xué);2013年

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10 周夢嬌;高載藥量且具有協(xié)同治療效果的組合納米藥物的制備及其在癌癥治療中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2014年

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本文編號：942667