本文關(guān)鍵詞：S0X4在軟骨肉瘤中的表達(dá)及其分子特征分析的研究

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【摘要】：[背景目的]軟骨肉瘤是多相性的原發(fā)性惡性骨腫瘤之一,且具有強(qiáng)烈的放、化療抵抗。目前,外科切除術(shù)仍是唯一有效治療方法。但由于其發(fā)病部位無法切除以及由術(shù)后引起的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等原因所導(dǎo)致的預(yù)后往往很差。在軟骨肉瘤的多種類型中,其傳統(tǒng)的軟骨肉瘤是最常見的類型,且大部分是低級(jí)別的傳統(tǒng)的軟骨肉瘤。而低級(jí)別的軟骨肉瘤通常具有進(jìn)展為惡性的預(yù)后差的高級(jí)別的軟骨肉瘤的能力。因此尋找新穎的預(yù)后因子和治療靶點(diǎn)對(duì)軟骨肉瘤的治療十分迫切。SOX基因家族成員,因其特征性的含有HMG DNA結(jié)合域,參與著多種細(xì)胞發(fā)展過程,例如在軟骨形成中的SOX5,SOX6和SOX9。2002年,Sekiya等人證實(shí)SOX4在軟骨形成過程中的表達(dá)要早于SOX5、SOX6和SOX9。在此之前,Reppe等人也證明了SOX4主要表達(dá)在胚胎生長(zhǎng)板的礦化軟骨區(qū)。綜上這些研究,暗示了SOX4在軟骨形成過程中具有重要的作用。除了作為轉(zhuǎn)錄因子外,SOX4也在多種癌癥中過表達(dá)并促進(jìn)其癌癥進(jìn)展,例如肝癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌等。此外,全基因組啟動(dòng)子分析表明SOX4與一些轉(zhuǎn)錄因子具有共合作的作用,其中包括與軟骨肉瘤形成基因有關(guān)的c-MYC.E2F1和E2F4,暗示著SOX4與軟骨肉瘤的進(jìn)展具有潛在的關(guān)系。然而,到目前為止,有關(guān)SOX4在人類軟骨肉瘤的表達(dá)及活性的檢測(cè),中外卻沒有報(bào)道。MicroRNAs是一群非編碼的、單鏈的、約有22個(gè)核苷酸的小RNA分子。他們通過與特定的基因的mRNAs的3'UTR端序列互補(bǔ)來發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制作用。在多種癌癥形成過程中,miRNA的異常調(diào)節(jié)起到原癌基因或者抑癌基因的作用,當(dāng)然在軟骨肉瘤中亦是如此。盡管是初步研究,miR-30a已證明在子宮內(nèi)膜癌、肝癌和慢性粒細(xì)胞性白血病等多種癌癥發(fā)展過程中具有重要作用。然而有關(guān)miR-30a對(duì)軟骨肉瘤的進(jìn)展卻未知。值得注意的是,miR-129、miR-335和miR-93等多種miRNAs的調(diào)控為SOX4在癌癥中的過表達(dá)機(jī)制研究提供了新的視野。而關(guān)于SOX4在軟骨肉瘤中表達(dá)機(jī)制仍不明確。綜上,本論文將從以下三個(gè)部分進(jìn)行研究：1.SOX4在軟骨肉瘤中的表達(dá)、臨床病理學(xué)特征及其預(yù)后意義；2.SOX4在軟骨肉瘤中的分子特征：3.SOX4在軟骨肉瘤中過表達(dá)機(jī)制的研究。[材料方法]將107例軟骨肉瘤病例和59例軟骨瘤病例的石蠟組織標(biāo)本制作成兩個(gè)組織芯片,并用免疫組化的方法來查看SOX4、c-MYC、P53和Ki67蛋白的表達(dá)情況。實(shí)時(shí)定量PCR和免疫蛋白印記(western blotting)來檢測(cè)轉(zhuǎn)錄mRNA和蛋白的水平。細(xì)胞的功能通過轉(zhuǎn)染、增殖(MTS)、侵襲(Transwell)和遷移(細(xì)胞劃痕)等實(shí)驗(yàn)來完成檢測(cè)。熒光素酶報(bào)告用于檢驗(yàn)SOX4的3’UTR與miR-30a有結(jié)合位點(diǎn)。[結(jié)果分析]SOX4在軟骨肉瘤中的表達(dá)明顯高于在軟骨瘤的表達(dá)(P=0.003).且其過表達(dá)與組織分級(jí)(P0.001)、伴隨復(fù)發(fā)(P=0.041)具有顯著關(guān)聯(lián)。此外,我們還證明了SOX4的過表達(dá)與c-MYC(P=0.011)和P53(P=0.029)的陽性表達(dá)及Ki67(P0.001)高表達(dá)密切相關(guān)。更有趣地是,SOX4在低級(jí)別的軟骨肉瘤病人中是獨(dú)立的不良預(yù)后因子。功能上,在軟骨肉瘤細(xì)胞株SW1353中驗(yàn)證得知,SOX4干擾后會(huì)明顯降低其細(xì)胞的增殖、遷移和浸潤(rùn)的能力,暗示著SOX4在軟骨肉瘤細(xì)胞株中具有原癌基因的作用。伴隨著miRNA機(jī)制的不斷深入研究,我們首次在軟骨肉瘤細(xì)胞株中證明了SOX4受miR-30a的直接調(diào)控,且miR-30a在SW1353中是一種腫瘤抑制劑。與此同時(shí),在軟骨肉瘤組織中也證明了SOX4的表達(dá)受miR-30a的負(fù)性相關(guān)調(diào)控。[實(shí)驗(yàn)結(jié)論]我們首次發(fā)現(xiàn)了SOX4在軟骨肉瘤的致瘤作用,而且我們還首次證明了在軟骨肉瘤細(xì)胞株SW1353中SOX4受miR-30a的調(diào)控。更有趣地是,SOX4的過表達(dá)可作為低級(jí)別的軟骨肉瘤的預(yù)后因子。
【關(guān)鍵詞】：SOX4 miR-30a 軟骨肉瘤 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R738.3
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符號(hào)說明11-13
• 前言13-15
• 第一部分 SOX4在軟骨肉瘤中的表達(dá)、臨床病理學(xué)特征及其預(yù)后意義15-22
• 材料方法15-18
• 結(jié)果分析18-21
• 實(shí)驗(yàn)小結(jié)21-22
• 第二部分 S0X4在軟骨肉瘤細(xì)胞中的分子特征22-36
• 材料方法22-34
• 結(jié)果分析34-35
• 實(shí)驗(yàn)小結(jié)35-36
• 第三部分 SOX4在軟骨肉瘤中過表達(dá)機(jī)制研究36-44
• 材料方法36-41
• 結(jié)果分析41-43
• 實(shí)驗(yàn)小結(jié)43-44
• 討論44-46
• 結(jié)論46-47
• 附圖表47-55
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 致謝60-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄61-62
• 附錄62-72
• 附件72

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1 楊運(yùn)俊,程敬亮,張勇,趙藝?yán)?椎旁軟骨肉瘤一例[J];臨床放射學(xué)雜志;2004年01期

2 姜建浩;龔維明;丁遠(yuǎn)景;郭舒亞;寧斌;趙云鵬;王浩;宋宏亮;;高分化軟骨肉瘤2例報(bào)告[J];山東醫(yī)藥;2011年38期

3 黃飛;王顯勛;羅小江;;軟骨肉瘤手術(shù)治療的預(yù)后分析[J];實(shí)用癌癥雜志;2013年04期

4 賈淑芳,劉世杰,王朱;軟骨肉瘤——附26例報(bào)告[J];上海第一醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1980年05期

5 ;少見部位的軟骨肉瘤(附89例分析)[J];青島醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1990年03期

6 郭善群;;透明細(xì)胞型軟骨肉瘤[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(臨床放射學(xué)分冊(cè));1992年01期

7 陶正龍;顱內(nèi)間胚葉軟骨肉瘤一例報(bào)告[J];臨床放射學(xué)雜志;1993年05期

8 李玉軍，姜天福;9例顱內(nèi)軟骨肉瘤臨床病理分析[J];中國(guó)腫瘤臨床;1995年06期

9 張翼鵬,嚴(yán)培榮,宋惠芳;腎間胚葉性軟骨肉瘤1例報(bào)告[J];臨床泌尿外科雜志;1998年11期

10 廖傳仙;腹膜后軟骨肉瘤1例報(bào)告[J];實(shí)用放射學(xué)雜志;2000年09期

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1 鮑潔;張玲;楊永輝;;肺原發(fā)性軟骨肉瘤一例[A];第三屆重癥醫(yī)學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2009年

2 郭麗敏;遲放魯;王紓宜;錢雯;;鼻腔鼻竇軟骨肉瘤9例臨床分析(摘要)[A];第三屆第四次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會(huì)論文匯編[C];2002年

3 李福軍;徐婭蘋;;鼻內(nèi)窺鏡下鼻中隔軟骨肉瘤切除一例報(bào)告[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科學(xué)分會(huì)成立60周年慶典暨2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)耳鼻咽喉頭頸外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

4 李雄峰;施林楓;;骨外間質(zhì)型軟骨肉瘤的特點(diǎn)和文獻(xiàn)回顧[A];2013中國(guó)工程院科技論壇暨浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

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6 嚴(yán)曉波;劉楊波;師鐘麗;馮潔;楊迪生;李偉栩;;蛋白酶體抑制劑MG132誘導(dǎo)軟骨肉瘤細(xì)胞凋亡的研究[A];2008年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 柳晨;袁慧書;王俊杰;孟娜;韓嵩博;馬永強(qiáng);;脊柱軟骨肉瘤術(shù)后復(fù)發(fā)CT引導(dǎo)下放射性125I粒子植入的初步結(jié)果[A];中國(guó)(第七屆)腫瘤微創(chuàng)治療學(xué)術(shù)大會(huì)暨世界影像導(dǎo)引下腫瘤微創(chuàng)治療學(xué)會(huì)成立籌備大會(huì)論文匯編[C];2011年

8 丁曉毅;;X線、CT和MR檢查在軟骨肉瘤診治中的優(yōu)勢(shì)與不足[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)放射學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2009年

9 龍漢安;張賢良;魏于全;楊光華;成娘;馬躍榮;;P16表達(dá)和DNA倍體在軟骨肉瘤研究的臨床意義[A];21世紀(jì)醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2001年

10 龍漢安;張賢良;魏于全;楊光華;成娘;馬躍榮;;P16表達(dá)和DNA倍體在軟骨肉瘤研究的臨床意義[A];2000全國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

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1 孫凌凌;Vγ9Vδ2 T細(xì)胞聯(lián)合唑來膦酸免疫治療軟骨肉瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];浙江大學(xué);2014年

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1 段登科;Ki-67和P-gp在人軟骨肉瘤中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 盧寧;S0X4在軟骨肉瘤中的表達(dá)及其分子特征分析的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 陳晨;不同分化軟骨肉瘤中細(xì)胞凋亡與增殖關(guān)系的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

4 董麗軍;軟骨肉瘤手術(shù)治療的療效觀察[D];山西醫(yī)科大學(xué);2008年

5 游新茂;軟骨肉瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)因素分析[D];浙江大學(xué);2008年

6 張嘉鍇;37例軟骨肉瘤患者預(yù)后多因素分析[D];浙江大學(xué);2011年

7 李磊;軟骨肉瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素及其對(duì)患者預(yù)后的影響[D];山東大學(xué);2011年

8 包光輝;骨盆軟骨肉瘤的外科治療[D];浙江大學(xué);2011年

9 鄒紅梅;軟骨肉瘤影像學(xué)表現(xiàn)與病理對(duì)照研究[D];青島大學(xué);2013年

10 呂佳楠;軟組織內(nèi)軟骨肉瘤的臨床特點(diǎn)及治療分析[D];山東大學(xué);2008年

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本文編號(hào)：934817