本文關(guān)鍵詞：TM4SF1在人乳腺癌細胞MCF-7和MDA-MB-231中的表達及其對細胞增殖和遷移能力的影響

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【摘要】：背景乳腺癌是全世界女性最常見的惡性腫瘤,大約占患癌女性的18%。最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)指出,全世界約有120萬女性被確診為乳腺癌。與發(fā)達國家相比,我國屬于乳腺癌的低發(fā)區(qū),但近年來的發(fā)病率增長趨勢明顯,目前約有47萬乳腺癌患者。由于早期診斷和治療方式的改善,越來越多的婦女得以存活,每年死于乳腺癌的絕對人數(shù)在逐年下降,其5年生存率約為50%-60%。然而,國內(nèi)外相關(guān)研究報道,侵襲和轉(zhuǎn)移仍然是臨床工作中乳腺癌治療的主要挑戰(zhàn),并是導致治療失敗和患者死亡的主要原因,且現(xiàn)階段,乳腺癌的轉(zhuǎn)移機制還不完全清楚,加之現(xiàn)有分子靶向藥物使用的局限性和耐藥的出現(xiàn),因此,急切需要我們深入探索乳腺癌的轉(zhuǎn)移機制和發(fā)現(xiàn)新的靶基因用于乳腺癌的治療。TM4SF1(Transmembrane-4-L-six-family-member-1)是四次跨膜蛋白L6超家族成員之一,其在肺癌,胰腺癌,前列腺癌,結(jié)直腸癌等多種惡性腫瘤組織中呈現(xiàn)異常高表達,而在正常組織及正常血管內(nèi)皮細胞呈相對低表達,該基因與腫瘤細胞的增殖,粘附,遷移,侵襲和腫瘤血管生成等密切相關(guān)。近年來,TM4SF1作為多種惡性腫瘤治療的新靶點被廣泛研究。目的1.對比研究TM4SF1在人乳腺癌細胞株MCF-7和MDA-MB-231中的表達情況,初步探討該基因與細胞惡性程度的相關(guān)性;2.采用si RNA靶向抑制TM4SF1基因后,分析兩種細胞的增殖、遷移能力的變化。方法采用Real-time PCR(Q-PCR)檢測人乳腺癌細胞株MCF-7和MDA-MB-231中TM4SF1 m RNA相對表達情況,并以人正常乳腺細胞系MCF-10A中TM4SF1m RNA的表達作為參照;應(yīng)用TM4SF1-si RNA瞬時轉(zhuǎn)染MCF-7、MDA-MB-231兩種細胞株,采用Western blot方法分析轉(zhuǎn)染效果和TM4SF1蛋白表達情況;CCK-8法和劃痕實驗分別檢測沉默TM4SF1前后2種細胞株增殖能力和遷移能力的變化。結(jié)果1.瞬時轉(zhuǎn)染的效率:特異性轉(zhuǎn)染TM4SF1-si RNA后,沉默組TM4SF1m RNA相對表達量較si NC組和空白對照組明顯下降,表明該基因成功被抑制(P0.01)。2.三種細胞株TM4SF1 m RNA的相對表達量:正常乳腺癌細胞株MCF-10A TM4SF1 m RNA相對表達量為(0.016±0.004),乳腺癌細胞MCF-7 TM4SF1 m RNA相對表達量為(1.159±0.218),MDA-MB-231 TM4SF1 m RNA相對表達量為(1.396±0.199),MCF-7和MDA-MB-231的TM4SF1 m RNA相對表達量均高于MCF-10A的表達量(F=150.447,P0.01);高度惡性的三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231 TM4SF1m RNA相對表達量高于低度惡性的雌激素受體陽性細胞株MCF-7的表達量(P0.05)。3.Western blot結(jié)果:沉默組TM4SF1蛋白條帶明顯暗于陰性對照組和空白對照組,表明兩種乳腺癌細胞株已成功被轉(zhuǎn)染。4.CCK-8結(jié)果:MCF-7細胞沉默TM4SF1基因0h后,si NC組和si TM4SF1組的增殖力分別為:(0.113±0.015)、(0.112±0.010);24h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.074±0.081)、(1.028±0.042);48h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.114±0.061)、(1.021±0.055);72h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.070±0.101)、(0.909±0.075)。MDA-MB-231細胞沉默TM4SF1基因0h后,si NC組和si TM4SF1組的增殖力分別為:(0.110±0.010)、(0.112±0.009);24h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.296±0.072)、(1.199±0.055);48h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.335±0.054)、(1.247±0.071);72h后,上述實驗組的增殖力分別為:(1.261±0.047)、(1.123±0.097)。以上各段時間的si NC組和si TM4SF1組采用兩獨立樣本的t檢驗,結(jié)果均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。5.劃痕實驗結(jié)果:沉默TM4SF1基因24h后,MCF-7 si NC組遷移率為(42.359±3.639)%,si TM4SF1組為(23.412±6.397)%,兩兩比較結(jié)果:t=4.459,P=0.011;MDA-MB-231 si NC組遷移率為(51.799±5.429)%,Si TM4SF1組為(30.549±5.978)%,兩兩比較結(jié)果:t=4.558,P=0.010。結(jié)論1.TM4SF1在乳腺癌細胞中較正常乳腺細胞呈現(xiàn)相對高表達;2.TM4SF1基因增強乳腺癌細胞的遷移能力,而與細胞的增殖能力相關(guān)性無統(tǒng)計學意義;3.TM4SF1可能與細胞的惡性程度正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：TM4SF1 乳腺癌 轉(zhuǎn)染 細胞增殖 遷移
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 英文縮略詞索引12-14
• 前言14-18
• 材料與方法18-27
• 結(jié)果27-32
• 討論32-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻35-37
• 綜述 乳腺癌分子靶向治療最新進展37-54
• 參考文獻50-54
• 個人簡歷及在研究生期間發(fā)表的學術(shù)論文54-55
• 致謝55

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1 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學雜志;2001年02期

2 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠景[J];中華外科雜志;2002年03期

3 張維彬,汪波,石靈春;中醫(yī)藥在現(xiàn)代乳腺癌治療中的運用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2002年01期

4 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建軍,鄭國華;乳腺癌相關(guān)標志物的研究進展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

6 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

7 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細胞[J];上海生物醫(yī)學工程;2005年04期

8 田富國;郭向陽;張華一;;乳腺癌診治研究新進展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

9 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌的臨床研究進展[J];國外醫(yī)學(外科學分冊);2005年01期

10 郭慶良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相關(guān)性研究進展[J];國外醫(yī)學.外科學分冊;2005年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國免疫學會第四屆學術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

2 郭紅飛;;中醫(yī)治療乳腺癌的策略[A];江西省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學術(shù)交流會論文集[C];2012年

3 龐朋沙;伍會健;;乳腺癌治療靶標的研究進展[A];北方遺傳資源的保護與利用研討會論文匯編[C];2010年

4 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細胞的生長及誘導凋亡的機制研究[A];2000全國腫瘤學術(shù)大會論文集[C];2000年

5 劉愛國;胡冰;;乳腺癌臨床治療進展[A];安徽省抗癌協(xié)會第四次代表大會暨乳腺癌、肺癌專業(yè)委員會成立會議、安徽省腫瘤防治進展學術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

6 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠景[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學術(shù)會議論文匯編[C];2002年

7 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進展[A];山西省抗癌協(xié)會第六屆腫瘤學術(shù)交流會論文匯編[C];2003年

8 邵志敏;;21世紀乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國腫瘤學術(shù)大會教育論文集[C];2004年

9 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學學術(shù)會議論文匯編[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凱陽;王兆鉞;阮長耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細胞中的表達研究[A];第10屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;血檢有望揭示乳腺癌治療效果[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2004年

2 記者 鄭曉春;乳腺癌細胞擴散基因被找到[N];科技日報;2007年

3 中國軍事醫(yī)學科學院腫瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新療法[N];中國婦女報;2002年

4 王艷紅;抑制ＤＮＡ修補可消滅乳腺癌細胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

5 詹建;乳腺癌飲食 兩個時期不一樣[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

6 辛君;乳腺癌擴散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報;2009年

7 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細胞生長的分子[N];科技日報;2010年

8 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日報;2011年

9 王樂　沈基飛;我科學家發(fā)現(xiàn)導致乳腺癌耐藥的新標志物[N];科技日報;2011年

10 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 柴紅燕;疾病狀態(tài)下CYP4Z1和4A的生物學行為及其藥物干預研究[D];武漢大學;2012年

2 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細胞的分化并影響乳腺癌的預后[D];復旦大學;2014年

3 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測及其功能論證[D];復旦大學;2014年

4 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強表皮生長因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學;2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT7誘導乳腺癌細胞發(fā)生表皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換及轉(zhuǎn)移的作用機制研究[D];東北師范大學;2015年

6 侯培鋒;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上調(diào)缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)誘發(fā)高致瘤性干細胞樣乳腺癌細胞機制研究[D];福建醫(yī)科大學;2014年

7 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細胞EMT的分子機制研究[D];東北師范大學;2015年

8 陳麗艷;PI3K抑制劑聯(lián)合組蛋白去乙�；敢种苿⿲θ橄侔﹨f(xié)同殺傷作用的分子機制研究[D];延邊大學;2015年

9 樸俊杰;乳腺癌差異基因篩選及PAIP1對其生物學行為的影響[D];延邊大學;2015年

10 汪[?如;染色體6q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點[D];鄭州大學;2011年

2 單系金;Mfn2磷酸化修飾對其調(diào)控乳腺癌細胞增殖功能的重要性的研究[D];河北聯(lián)合大學;2014年

3 徐晶;缺氧對乳腺癌細胞miR-210表達及侵襲能力的影響[D];河北聯(lián)合大學;2014年

4 李麗;Mfn2對乳腺癌細胞MCF-7侵襲遷移能力的影響及機制探究[D];河北聯(lián)合大學;2014年

5 楊洋;醌氧化還原酶及其抑制劑在乳腺癌增殖與遷移中的作用研究[D];延邊大學;2015年

6 張秀娟;免疫組化與熒光原位雜交檢測乳腺癌Her-2表達的對比研究及17號染色多體對檢測結(jié)果的影響[D];泰山醫(yī)學院;2014年

7 韓晶;納米脂質(zhì)體多西他賽抑制乳腺癌細胞增殖降低骨髓毒性的機制[D];安徽大學;2015年

8 鐘顯峰;乳腺癌的分子亞型與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究[D];泰山醫(yī)學院;2014年

9 張碩穩(wěn);MTDH、IκB、NF-κB P65在乳腺癌組織中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學;2015年

10 謝少利;RNAi阻低UBE3A后對乳腺癌細胞MDA-MB-231生物學行為的影響及其機制研究[D];川北醫(yī)學院;2015年

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本文編號：930793