癌基因c-jun在三氧化二砷抑制腺樣囊性癌細胞中的表達及意義
本文關鍵詞:癌基因c-jun在三氧化二砷抑制腺樣囊性癌細胞中的表達及意義
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【摘要】:目的本實驗旨在研究c-jun在三氧化二砷(arsenic trioxide As2O3)促進腺樣囊性癌細胞ACC-2凋亡及抑制癌細胞增殖中的表達及意義,進而為腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)治療的可行途徑提供線索。方法(1)將經過不同濃度As2O3培養(yǎng)的ACC-2細胞作為實驗組,不含As2O3培養(yǎng)液的ACC-2細胞作為對照組,倒置顯微鏡觀察兩組細胞的形態(tài)變化;(2)用RT-PCR法檢測兩組ACC-2細胞c-jun基因在m RNA水平上的表達變化情況;(3)免疫組化法觀察藥物作用前后Jun蛋白表達量的變化。采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件包處理、分析數(shù)據,檢驗水準為a=0.05。結果(1)顯微鏡下:實驗組ACC-2細胞生長緩慢,細胞貼壁能力下降,變圓變小,隨著培養(yǎng)時間延長及As2O3濃度增加,細胞逐漸出現(xiàn)脫落、壞死。(2)RT-PCR:c-jun m RNA在對照組ACC-2細胞的表達量最高,而隨著As2O3作用濃度的增加和作用時間的延長,其表達量明顯下降,在6μmol/L作用48h時表達量最低,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.001);(3)免疫組化檢測:Jun蛋白表達于細胞核,胞漿不著色,胞核呈棕黃色或褐色,Jun蛋白在對照組ACC-2細胞中呈高表達,As2O3作用于ACC-2細胞后,其表達量降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.008)。結論1、As2O3可抑制體外培養(yǎng)的ACC-2細胞生長并誘導細胞凋亡;2、ACC-2細胞中存在c-jun m RNA和蛋白的表達,As2O3能夠改變ACC-2細胞中c-jun m RNA和蛋白的表達水平,其作用具有時間劑量性;3、c-jun基因在As2O3抑制ACC-2細胞生長并誘導其凋亡中起重要作用,為As2O3應用于腺樣囊性癌的臨床治療提供了一定的理論依據。
【關鍵詞】:腺樣囊性癌 三氧化二砷 c-jun 免疫組化 RT-PCR
【學位授予單位】:青島大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R730.26
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-7
- 第一章 材料和方法7-14
- 1.1 實驗材料7-9
- 1.1.1 細胞來源7
- 1.1.2 主要耗材7
- 1.1.3 實驗設備7-8
- 1.1.4 主要試劑8
- 1.1.5 引物設計8-9
- 1.2 實驗方法9-10
- 1.2.1 ACC-2 細胞培養(yǎng)9
- 1.2.2 常用液體的配置9-10
- 1.3 實驗步驟10-12
- 1.3.1 免疫組織化學SP法染色步驟10-11
- 1.3.2 RT-PCR11-12
- 1.4 統(tǒng)計方法12-14
- 第二章 實驗結果14-17
- 2.1 ACC-2 細胞的形態(tài)學變化14
- 2.2 免疫細胞化學實驗結果14-15
- 2.3 RT-PCR實驗結果15-17
- 第三章 討論17-19
- 第四章 結論19-20
- 參考文獻20-24
- 綜述24-33
- 參考文獻30-33
- 攻讀學位期間的研究成果33-34
- 致謝34-35
【共引文獻】
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本文編號:923698
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