本文關鍵詞：誘騙受體3（DcR3）在胰腺癌中對T淋巴細胞功能影響的實驗研究

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【摘要】：第一部分誘騙受體3(Dc R3)在胰腺癌中的表達及臨床意義目的研究誘騙受體3(Dc R3)在胰腺癌中的表達,并探討其臨床意義。方法(1)用免疫組織化學法(IHC)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)分別檢測40例胰腺癌患者組織標本和血清中Dc R3蛋白的表達,分析其與臨床病理因素之間的相關性。(2)用流式細胞儀(FCM)檢測上述40例胰腺癌患者外周血中CD4+、CD8+T細胞的表達,探討Dc R3對胰腺癌患者機體免疫功能的影響。結果(1)Dc R3在胰腺癌組織中陽性率為62.5%,在相應非癌胰腺組織中陽性率為12.5%。Dc R3在胰腺癌組織中的陽性率明顯高于非癌胰腺組織,兩者的差異有統(tǒng)計學意義(χ2=21.33,P0.001),而且Dc R3的表達與腫瘤分期及淋巴結轉移密切相關,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)胰腺癌患者血清中Dc R3的表達水平明顯升高,與胰腺良性腫瘤組和正常健康組相比,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。(3)胰腺癌患者外周血中CD4+/CD8+比值與Dc R3表達水平呈負相關關系(Spearman,r=-0.6512,P0.0001)。結論Dc R3蛋白在胰腺癌中的高表達與腫瘤分期及淋巴結轉移呈正相關。血清中Dc R3的表達與胰腺癌患者外周血中CD4+/CD8+呈負相關,是影響機體免疫功能的因素之一。第二部分在胰腺癌細胞中靶向沉默Dc R3對T淋巴細胞功能的影響目的觀察在胰腺癌Panc-1細胞中靶向沉默Dc R3的表達對T淋巴細胞功能的影響。方法構建針對Dc R3基因的小干擾RNA慢病毒包裝體系轉染人胰腺癌Panc-1細胞,轉染后與淋巴細胞混合培養(yǎng),采用流式細胞術檢測T細胞活化,T細胞亞群的變化以及Th1細胞、Th2細胞的偏移,ELISA檢測IFN-γ和IL-4水平。流式細胞術通過CD3-/Annexin V-FITC/PI檢測混合培養(yǎng)細胞中腫瘤細胞的凋亡率,并用利用CFDA-SE檢測分析混合培養(yǎng)細胞中T淋巴細胞增殖率。結果(1)轉染Dc R3-si RNA48h后的Panc-1細胞中Dc R3蛋白表達下降。(2)轉染細胞與T淋巴細胞混合培養(yǎng)后CD3+、CD4+T細胞增多(P0.05),而CD8+T細胞無明顯變化,而且Th1細胞增多,Th2細胞細胞減少(P0.05),細胞上清液中代表Th1型細胞因子的IFN-γ濃度升高(P0.01)而代表Th2型細胞因子的IL-4水平下降(P0.01)。(3)發(fā)現(xiàn)Dc R3-RNAi組T細胞上CD25、CD69的表達升高、T淋巴細胞的增殖率上升,而且Dc R3-RNAi組腫瘤細胞的凋亡率也有明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論在胰腺癌細胞中靶向沉默Dc R3的表達,可以有效恢復T淋巴細胞的免疫調節(jié)功能,糾正失衡的Th1/Th2細胞因子網絡。Dc R3有望成為胰腺癌基因治療和免疫調控的潛在靶點。
【關鍵詞】：
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-15
• 參考文獻12-15
• 第一部分 DCR3在胰腺癌中的表達及其臨床意義15-31
• 材料16-17
• 方法17-21
• 結果21-24
• 討論24-27
• 結論27-28
• 參考文獻28-31
• 第二部分 在胰腺癌細胞中靶向沉默Dc R3對T淋巴細胞功能的影響31-51
• 材料31-33
• 方法33-41
• 結果41-46
• 討論46-48
• 結論48-49
• 參考文獻49-51
• 全文結論51-52
• 綜述52-62
• 參考文獻58-62
• 全文縮略詞62-64
• 攻讀學位期間公開發(fā)表的論文64-65
• 致謝65-66

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前4條

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本文編號：917811