本文關(guān)鍵詞：誘騙受體3（DcR3）在胰腺癌中對T淋巴細(xì)胞功能影響的實驗研究

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【摘要】：第一部分誘騙受體3(Dc R3)在胰腺癌中的表達(dá)及臨床意義目的研究誘騙受體3(Dc R3)在胰腺癌中的表達(dá),并探討其臨床意義。方法(1)用免疫組織化學(xué)法(IHC)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)分別檢測40例胰腺癌患者組織標(biāo)本和血清中Dc R3蛋白的表達(dá),分析其與臨床病理因素之間的相關(guān)性。(2)用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測上述40例胰腺癌患者外周血中CD4+、CD8+T細(xì)胞的表達(dá),探討Dc R3對胰腺癌患者機體免疫功能的影響。結(jié)果(1)Dc R3在胰腺癌組織中陽性率為62.5%,在相應(yīng)非癌胰腺組織中陽性率為12.5%。Dc R3在胰腺癌組織中的陽性率明顯高于非癌胰腺組織,兩者的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=21.33,P0.001),而且Dc R3的表達(dá)與腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)胰腺癌患者血清中Dc R3的表達(dá)水平明顯升高,與胰腺良性腫瘤組和正常健康組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。(3)胰腺癌患者外周血中CD4+/CD8+比值與Dc R3表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(Spearman,r=-0.6512,P0.0001)。結(jié)論Dc R3蛋白在胰腺癌中的高表達(dá)與腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。血清中Dc R3的表達(dá)與胰腺癌患者外周血中CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān),是影響機體免疫功能的因素之一。第二部分在胰腺癌細(xì)胞中靶向沉默Dc R3對T淋巴細(xì)胞功能的影響目的觀察在胰腺癌Panc-1細(xì)胞中靶向沉默Dc R3的表達(dá)對T淋巴細(xì)胞功能的影響。方法構(gòu)建針對Dc R3基因的小干擾RNA慢病毒包裝體系轉(zhuǎn)染人胰腺癌Panc-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后與淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng),采用流式細(xì)胞術(shù)檢測T細(xì)胞活化,T細(xì)胞亞群的變化以及Th1細(xì)胞、Th2細(xì)胞的偏移,ELISA檢測IFN-γ和IL-4水平。流式細(xì)胞術(shù)通過CD3-/Annexin V-FITC/PI檢測混合培養(yǎng)細(xì)胞中腫瘤細(xì)胞的凋亡率,并用利用CFDA-SE檢測分析混合培養(yǎng)細(xì)胞中T淋巴細(xì)胞增殖率。結(jié)果(1)轉(zhuǎn)染Dc R3-si RNA48h后的Panc-1細(xì)胞中Dc R3蛋白表達(dá)下降。(2)轉(zhuǎn)染細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)后CD3+、CD4+T細(xì)胞增多(P0.05),而CD8+T細(xì)胞無明顯變化,而且Th1細(xì)胞增多,Th2細(xì)胞細(xì)胞減少(P0.05),細(xì)胞上清液中代表Th1型細(xì)胞因子的IFN-γ濃度升高(P0.01)而代表Th2型細(xì)胞因子的IL-4水平下降(P0.01)。(3)發(fā)現(xiàn)Dc R3-RNAi組T細(xì)胞上CD25、CD69的表達(dá)升高、T淋巴細(xì)胞的增殖率上升,而且Dc R3-RNAi組腫瘤細(xì)胞的凋亡率也有明顯升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在胰腺癌細(xì)胞中靶向沉默Dc R3的表達(dá),可以有效恢復(fù)T淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)功能,糾正失衡的Th1/Th2細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。Dc R3有望成為胰腺癌基因治療和免疫調(diào)控的潛在靶點。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-15
• 參考文獻(xiàn)12-15
• 第一部分 DCR3在胰腺癌中的表達(dá)及其臨床意義15-31
• 材料16-17
• 方法17-21
• 結(jié)果21-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 第二部分 在胰腺癌細(xì)胞中靶向沉默Dc R3對T淋巴細(xì)胞功能的影響31-51
• 材料31-33
• 方法33-41
• 結(jié)果41-46
• 討論46-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 全文結(jié)論51-52
• 綜述52-62
• 參考文獻(xiàn)58-62
• 全文縮略詞62-64
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文64-65
• 致謝65-66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：917811