發(fā)布時間：2017-09-20 20:16

  本文關(guān)鍵詞：甲狀腺乳頭狀癌細胞對促甲狀腺激素反應(yīng)性研究

  更多相關(guān)文章： 甲狀腺乳頭狀癌 促甲狀腺激素 內(nèi)分泌治療 細胞培養(yǎng) 流式細胞儀

【摘要】：目的:甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病中發(fā)病率最高的惡性腫瘤,是最常見的甲狀腺惡性腫瘤,約占全身惡性腫瘤的1%。其中甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是最為常見的病理類型[1],約占成人甲狀腺癌的60%和兒童甲狀腺癌的全部。近幾十年間,甲狀腺乳頭狀癌發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈現(xiàn)出迅猛增長的態(tài)勢。然而甲狀腺乳頭狀癌的惡性程度較低,即便較早出現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,但是預(yù)后較好,10年生存率仍能達到90%以上。目前被公認的甲狀腺乳頭狀癌標準的綜合治療方式是手術(shù)切除治療以及術(shù)后輔助治療。手術(shù)治療是甲狀腺乳頭狀癌的基本治療方法,術(shù)后輔助治療可進一步降低術(shù)后復(fù)發(fā)率。其中內(nèi)分泌治療在術(shù)后輔助治療中占據(jù)著重要地位。內(nèi)分泌治療即為甲狀腺乳頭狀癌患者接受手術(shù)后應(yīng)終身服用甲狀腺素片,通過下丘腦-垂體-甲狀腺軸的自身調(diào)節(jié)來完成,其意義在于預(yù)防甲狀腺功能減退和抑制促甲狀腺素(thyroid stimulating hormone,TSH)。內(nèi)分泌治療甲狀腺乳頭狀癌的主要依據(jù)為甲狀腺乳頭狀癌細胞內(nèi)存在TSH受體的表達,而且分化程度越高的腫瘤,其TSH受體表達越高�；颊咄ㄟ^口服藥物攝入適量的甲狀腺素,促使人體內(nèi)分泌的TSH減少,從而降低TSH對殘余癌組織的刺激。大部分臨床學(xué)者認為,甲狀腺乳頭狀癌患者長期使用促甲狀腺素(TSH)抑制劑量的甲狀腺素能降低復(fù)發(fā)率和死亡率[2,3]。特別是在甲狀腺乳頭狀癌的高危組,內(nèi)分泌治療可以使病人的無病生存率提高2-3倍[4]。但是,患者長期服用超生理量甲狀腺素會有一定副作用產(chǎn)生。長期TSH抑制會導(dǎo)致患者心率加快,頻發(fā)的房性期前收縮。據(jù)統(tǒng)計,TSH抑制使房顫發(fā)生率比正常增加3倍[5]。并且長期TSH抑制可導(dǎo)致絕經(jīng)后婦女患骨質(zhì)疏松癥的風險增高,但這一般不發(fā)生于絕經(jīng)前的女性[6]。而且TSH要發(fā)揮作用必須要與甲狀腺細胞膜上或細胞質(zhì)中促甲狀腺激素受體(TSHR)相結(jié)合。有研究表明:甲狀腺癌細胞的TSHR基因表達存在缺失[7]。TSHR在甲狀腺乳頭狀癌組織中的陽性表達率較低,并且隨著分化型甲狀腺癌臨床分期的增加TSHR陽性表達率逐漸下降[8]。在甲狀腺乳頭狀癌中,TSH高含量與TSHR低表達形成矛盾。這其中的原因并不十分清楚,但是可以肯定的是:促甲狀腺素與促甲狀腺素受體之間的作用復(fù)雜,存在多種作用機制[9]。近年來,學(xué)術(shù)界對TSH治療在甲狀腺乳頭狀癌的抑制作用是否有效依然存在爭議。臨床實際工作中我們發(fā)現(xiàn):有一部分甲狀腺乳頭狀癌術(shù)后的患者,規(guī)律口服甲狀腺素制劑治療的若干年后仍出現(xiàn)了腫瘤的復(fù)發(fā)以及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,需要行二次手術(shù)。因此,為了有效降低TSH抑制治療副作的用發(fā)生,實施個體化治療具有重要意義。本研究旨在綜合探討TSH在體外培養(yǎng)甲狀腺乳頭狀癌細胞中的作用和意義。方法:取河北省醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院甲狀腺外科2014年10月-2015年1月間術(shù)中新鮮甲狀腺乳頭狀癌組織標本5例,經(jīng)術(shù)中冰凍及術(shù)后石蠟病理證實。所有甲狀腺乳頭狀癌患者術(shù)前均未經(jīng)過放,化療。將新鮮組織30分鐘內(nèi)種植培養(yǎng)瓶中,培養(yǎng)甲狀腺乳頭狀癌細胞。待長成單層細胞后,分為四個組,分別給予不同濃度的TSH(0m U/L、10m U/L、50m U/L、100m U/L),種于24孔培養(yǎng)板內(nèi)于實驗10天運用流式細胞儀對細胞的增殖及凋亡進行檢測。各數(shù)據(jù)采用t檢驗,檢驗標準為P0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1甲狀腺乳頭狀癌細胞的培養(yǎng)及觀察甲狀腺乳頭狀癌細胞直接種植于培養(yǎng)瓶中,細胞生長緩慢。細胞培養(yǎng)24h后,可見少量細胞貼壁,細胞呈橢圓形、梭形,可見偽足,細胞不再移動,貼壁主要見于細胞團處,但大量細胞仍懸浮未貼壁,呈圓形,隨培養(yǎng)液移動。4-5d后,大量細胞貼壁。進入甲狀腺乳頭狀癌細胞的潛伏期,期間細胞的偽足進一步伸長,細胞呈多角形,細胞核及細胞體積逐漸增大。5-7d后,細胞進入生長較快增殖期,細胞繼續(xù)伸長且向四周生長,彼此連接,呈長梭形,幾乎無圓形及橢圓形細胞,已貼滿培養(yǎng)瓶底一半以上。7-8d后,于培養(yǎng)瓶中形成單層細胞,于高倍鏡下可見圓形核仁及其他細胞器。2不同濃度的TSH培養(yǎng)細胞之間的比較2.1根據(jù)測定流式細胞儀測定細胞周期,篩選增殖結(jié)果,通過統(tǒng)計軟件SPSS13.0,計算多個樣本的t檢驗,P0.05,說明各組之間有統(tǒng)計學(xué)意義。繪制直方圖。測Pearson相關(guān)性R2=0.955,相關(guān)性良好且呈正相關(guān)。2.2根據(jù)流式細胞儀測定細胞凋亡結(jié)果,均為小于5%。結(jié)論:1 TSH對體外培養(yǎng)甲狀腺乳頭狀癌細胞有誘導(dǎo)增殖作用,且隨著TSH濃度的增加,誘導(dǎo)增殖的能力越強。2 TSH對體外培養(yǎng)甲狀腺乳頭狀癌細胞無誘導(dǎo)凋亡作用。3人甲狀腺乳頭狀癌細胞原代培養(yǎng)技術(shù)適用于甲狀腺乳頭狀癌細胞功能方面的研究,填補了其他研究方法不能研究活細胞功能的空缺,為研究甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生、發(fā)展機理及其特性提供了更為合適的替代工具。
【關(guān)鍵詞】：甲狀腺乳頭狀癌 促甲狀腺激素 內(nèi)分泌治療 細胞培養(yǎng) 流式細胞儀
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R736.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12
• 材料與方法12-16
• 結(jié)果16-18
• 附圖18-22
• 附表22-23
• 討論23-27
• 結(jié)論27
• 參考文獻27-31
• 綜述 甲狀腺癌術(shù)后輔助治療31-43
• 參考文獻38-43
• 致謝43-44
• 個人簡歷44

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 何冉;雌、孕激素受體在甲狀腺腫瘤組織中的表達[J];中國醫(yī)師雜志;2002年11期

2 魯澤清;;外放射和放射性碘治療甲狀腺癌[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;1981年04期

3 金東嶺;李聯(lián)祥;劉現(xiàn)軍;梁爽;李蘭梅;席豐;高金生;李沛;;雌激素受體ERα、ERβ亞型與Ki-67在不同甲狀腺病變組織中的表達及其意義[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2008年09期

4 余永利,金常青,陳立波,陸漢魁,朱瑞森;~(131)I治療分化型甲狀腺癌肺轉(zhuǎn)移對肺功能的影響[J];中華核醫(yī)學(xué)雜志;2002年02期

5 哈獻文;;頭頸部惡性腫瘤廣泛切除術(shù)的應(yīng)用與評價[J];腫瘤防治研究;1979年05期

，

本文編號：890152